摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第13-15页 |
第1章 文献综述 | 第15-31页 |
1.1 抗菌肽的分类 | 第15-18页 |
1.1.1 根据来源分类 | 第16-17页 |
1.1.2 根据化学结构分类 | 第17页 |
1.1.3 根据肽链结构分类 | 第17-18页 |
1.2 抗菌肽理化性质及生物学活性 | 第18-19页 |
1.3 抗菌肽的应用 | 第19-20页 |
1.4 天蚕素抗菌肽的研究进展 | 第20-21页 |
1.5 细胞色素P450酶概述 | 第21-22页 |
1.6 研究外源性物质对猪CYP450酶影响的意义 | 第22-23页 |
1.7 猪CYP450酶的相关调控机理 | 第23-27页 |
1.8 猪CYP3A是人CYP3A的最适研究模型 | 第27-29页 |
1.9 生物药物对药物代谢酶的表达调控研究 | 第29-31页 |
第2章 Cecropin B对猪CYP3A29的表达的影响 | 第31-43页 |
2.1 前言 | 第31-32页 |
2.2 实验材料及试剂配制 | 第32-34页 |
2.2.1 细胞系及实验动物 | 第32页 |
2.2.2 细胞培养相关试剂及试剂配制 | 第32页 |
2.2.3 荧光定量、Western Blot相关试剂 | 第32-34页 |
2.2.4 主要实验仪器及设备 | 第34页 |
2.3 实验方法 | 第34-38页 |
2.3.1 猪肝细胞的原代培养 | 第34页 |
2.3.2 猪肝细胞的传代培养 | 第34-35页 |
2.3.3 细胞毒性试验(MTT法) | 第35页 |
2.3.4 荧光定量 | 第35-37页 |
2.3.5 Western blot | 第37-38页 |
2.3.6 统计学方法 | 第38页 |
2.4 结果与分析 | 第38-42页 |
2.4.1 Cecropin B对细胞的毒性作用研究 | 第38-39页 |
2.4.2 Cecropin B对CYP3A29、PXR表达的浓度梯度影响 | 第39-40页 |
2.4.3 Cecropin B对CYP3A29、PXR表达的时间梯度影响 | 第40-41页 |
2.4.4 Cecropin B对RXR-α 表达的影响 | 第41-42页 |
2.5 讨论 | 第42-43页 |
第3章 CYP3A29及PXR启动子载体的构建及转录因子结合位点分析 | 第43-56页 |
3.1 前言 | 第43页 |
3.2 实验材料及试剂配制 | 第43-44页 |
3.2.1 细胞系 | 第43页 |
3.2.2 载体构建、转染相关试剂及试剂配制 | 第43-44页 |
3.2.3 主要实验仪器及设备 | 第44页 |
3.3 实验方法 | 第44-48页 |
3.3.1 猪肝细胞的传代培养 | 第44-45页 |
3.3.2 载体构建 | 第45-48页 |
3.3.3 定点突变试验 | 第48页 |
3.3.4 荧光素酶法测启动子活性 | 第48页 |
3.3.5 统计学方法 | 第48页 |
3.4 结果与分析 | 第48-55页 |
3.4.1 CYP3A29启动子报告质粒的构建 | 第48-51页 |
3.4.2 CYP3A29启动子区转录因子结合位点分析 | 第51-52页 |
3.4.3 PXR启动子的构建及启动子区转录因子结合位点的分析 | 第52-55页 |
3.5 讨论 | 第55-56页 |
第4章 Cecropin B对CYP3A29表达调控的信号通路研究 | 第56-80页 |
4.1 前言 | 第56页 |
4.2 实验材料及试剂配制 | 第56-59页 |
4.2.1 细胞系 | 第56页 |
4.2.2 细胞培养相关试剂及配制 | 第56-57页 |
4.2.3 荧光定量、Western Blot、RNA干扰相关试剂 | 第57-58页 |
4.2.4 染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP)试验、细胞免疫荧光(Immunohistochemistry ,IHC)试验、免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)试验相关试剂 | 第58页 |
4.2.5 主要实验仪器及设备 | 第58-59页 |
4.3 实验方法 | 第59-65页 |
4.3.1 猪肝细胞的传代培养 | 第59页 |
4.3.2 荧光素酶活性测定试验 | 第59-60页 |
4.3.3 荧光定量 | 第60页 |
4.3.4 Western blot | 第60页 |
4.3.5 RNA干扰 | 第60-61页 |
4.3.6 染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP) | 第61-63页 |
4.3.7 细胞免疫荧光(Immunohistochemistry ,IHC) | 第63页 |
4.3.8 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP) | 第63-64页 |
4.3.9 统计学方法 | 第64-65页 |
4.4 结果与分析 | 第65-77页 |
4.4.1 PXR、RXR-α 在Cecropin B抑制CYP3A29表达过程中的作用研究 | 第65-67页 |
4.4.2 Cecropin B通过核受体PXR、RXR-α 在转录水平对CYP3A29启动子的抑制作用研究 | 第67-69页 |
4.4.3 Cecropin B诱导激活NF-κB的研究 | 第69-72页 |
4.4.4 Cecropin B激活NF-κB/PXR/RXR-α 信号通路的研究 | 第72-74页 |
4.4.5 Cecropin B通过TLRs进行跨膜信号传导调控CYP3A29的表达的研究 | 第74-77页 |
4.5 讨论 | 第77-80页 |
第5章 结论 | 第80-81页 |
第6章 参考文献 | 第81-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
附录 | 第104-106页 |