| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩写词表 | 第8-11页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 奶牛乳腺上皮细胞体外培养的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 奶牛乳腺上皮细胞体外培养的意义 | 第11页 |
| 1.1.2 乳腺上皮细胞原代培养的研究概况 | 第11-12页 |
| 1.1.3 细胞培养添加物 | 第12页 |
| 1.1.4 乳腺上皮细胞鉴定的研究概况 | 第12-13页 |
| 1.2 Wnt 信号通路概述 | 第13-16页 |
| 1.2.1 经典的 Wnt 信号传导通路 | 第14页 |
| 1.2.2 卷曲蛋白受体的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.3 β-catenin 的研究进展 | 第15页 |
| 1.2.4 经典的 Wnt 信号传导通路中其他成分 | 第15-16页 |
| 1.3 本课题研究意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验用动物组织 | 第17页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-29页 |
| 2.2.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第18-19页 |
| 2.2.2 乳腺上皮细胞的鉴定 | 第19-23页 |
| 2.2.3 wnt3a 蛋白乳腺上皮细胞数量及活性的影响 | 第23页 |
| 2.2.4 Frizzled1 和β-catenin 在奶牛乳腺上皮细胞中的表达 | 第23-29页 |
| 3 结果 | 第29-35页 |
| 3.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第29-30页 |
| 3.2 细胞培养液中β-酪蛋白的提取及鉴定 | 第30页 |
| 3.3 Wnt3a 蛋白对奶牛乳腺上皮细胞数量的影响 | 第30-31页 |
| 3.4 Wnt3a 蛋白对奶牛乳腺上皮细胞活性的影响 | 第31-32页 |
| 3.5 荧光定量 PCR 检测结果 | 第32-35页 |
| 3.5.1 RT-PCR 扩增结果 | 第32页 |
| 3.5.2 质粒 PCR 检测结果 | 第32-33页 |
| 3.5.3 标准曲线建立结果 | 第33-34页 |
| 3.5.4 Frizzled1 和β-catenin 基因荧光定量 PCR 结果 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| 4.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第35页 |
| 4.2 乳腺上皮细胞的鉴定 | 第35-36页 |
| 4.3 Wnt3a 蛋白对奶牛乳腺上皮细胞数量及泌乳活性的影响 | 第36页 |
| 4.4 Wnt3a 蛋白对奶牛乳腺上皮细胞的 FZD1 和β-catenin 表达量的影响 | 第36-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-46页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
| 作者简历 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
