附件 | 第3-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
目录 | 第10-12页 |
英文缩略词 | 第12-13页 |
第1章 引言 | 第13-15页 |
第2章 实验材料及试剂 | 第15-22页 |
2.1. 实验动物 | 第15页 |
2.2. 实验试剂及材料 | 第15-20页 |
2.2.1. 模型建立所需试剂及材料 | 第15页 |
2.2.2. HE 染色试剂 | 第15-16页 |
2.2.3. 压力机动实验试剂 | 第16页 |
2.2.4. Western blot 实验试剂 | 第16-19页 |
2.2.5. 全细胞膜片钳技术试剂 | 第19-20页 |
2.3. 实验仪器 | 第20-22页 |
2.3.1. 模型建立仪器 | 第20页 |
2.3.2. HE 染色仪器 | 第20页 |
2.3.3. 压力机动实验仪器 | 第20页 |
2.3.4. Western blot 仪器 | 第20-21页 |
2.3.5. 全细胞膜片钳技术仪器 | 第21-22页 |
第3章 实验方法 | 第22-29页 |
3.1. 实验思路 | 第22页 |
3.2. 实验动物分组 | 第22-23页 |
3.3. 应用视交叉前池注血法蛛网膜下腔出血模型的建立 | 第23页 |
3.4. HE 染色鉴定模型及观察基底动脉形态变化 | 第23-24页 |
3.5. 采用 Kaoutzanis M 大鼠神经行为学评分法评分 | 第24页 |
3.6. 压力机动仪检测基底动脉直径变化 | 第24页 |
3.6.1. 实验步骤 | 第24页 |
3.6.2. 仪器设备参数 | 第24页 |
3.7. Western blot 技术检测缝隙连接蛋白表达变化 | 第24-27页 |
3.7.1. 不同实验组总蛋白的提取 | 第24-25页 |
3.7.2. 分光光度仪检测总蛋白含量 | 第25页 |
3.7.3. 提取总蛋白浓度配平及变性处理 | 第25页 |
3.7.4. 10%分离胶及 5%浓缩胶的制备 | 第25-26页 |
3.7.5. 蛋白上样 | 第26页 |
3.7.6. 蛋白电泳 | 第26页 |
3.7.7. 转膜 | 第26页 |
3.7.8. 封闭 | 第26页 |
3.7.9. 样品蛋白与特异性一抗免疫反应 | 第26页 |
3.7.10. TBST 洗涤 PVDF 膜上非特异性结合一抗 | 第26页 |
3.7.11. 特异性一抗与特异性二抗免疫反应 | 第26-27页 |
3.7.12. TBST 洗涤 PDVF 膜上非特异性结合二抗 | 第27页 |
3.7.13. 样品蛋白化学发光及暗室曝光 | 第27页 |
3.7.14. 膜再生 | 第27页 |
3.7.15. 内参蛋白β-actin 与特异性一抗及二抗免疫反应 | 第27页 |
3.7.16. 内参蛋白蛋白β-actin 化学发光及暗室曝光 | 第27页 |
3.7.17. 图像分析 | 第27页 |
3.8. 全细胞膜片钳技术观察缝隙连接通道电生理的变化 | 第27-28页 |
3.8.1. 实验步骤 | 第27-28页 |
3.8.2. 实验参数 | 第28页 |
3.9. 数据统计及分析 | 第28-29页 |
第4章 实验结果 | 第29-40页 |
4.1. 视交叉前池注血法二次注血模型的建立 | 第29页 |
4.2. 神经行为学评分 | 第29-30页 |
4.3. 压力机动测脑血管直径变化 | 第30-32页 |
4.4. Western blot 检测基底动脉缝隙连接蛋白的表达 | 第32-38页 |
4.4.1. Cx37 蛋白表达检测 | 第32页 |
4.4.2. Cx40 蛋白表达检测 | 第32-34页 |
4.4.3. Cx43 蛋白表达检测 | 第34-35页 |
4.4.4. Cx45 蛋白表达检测 | 第35-37页 |
4.4.5. Cxs 间及与基底动脉直径的相关性分析 | 第37-38页 |
4.5. 全细胞膜片钳技术观察缝隙连接通道电生理的变化 | 第38-40页 |
第5章 讨论 | 第40-44页 |
5.1. 关于蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的概述 | 第40页 |
5.2. 缝隙连接在脑血管痉挛病理机制中作用的概述 | 第40-41页 |
5.2.1. 缝隙连接结构 | 第40-41页 |
5.2.2. 缝隙连接功能 | 第41页 |
5.2.3. GJ 与 CVS 的关系 | 第41页 |
5.3. 自发性蛛网膜下腔出血模型的建立 | 第41-42页 |
5.4. 神经行为学评分 | 第42页 |
5.5. 压力机动测基底动脉直径变化 | 第42页 |
5.6. Western blot 检测基底动脉缝隙连接蛋白的表达 | 第42-43页 |
5.7. 全细胞膜片钳技术观察 GJ 电生理的变化 | 第43页 |
5.9. 展望 | 第43-44页 |
第6章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
综述 | 第50-57页 |
参考文献 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介及研究项目、发表文章 | 第58页 |