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缝隙连接在脑血管痉挛病理机制中作用的实验研究

附件第3-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
目录第10-12页
英文缩略词第12-13页
第1章 引言第13-15页
第2章 实验材料及试剂第15-22页
    2.1. 实验动物第15页
    2.2. 实验试剂及材料第15-20页
        2.2.1. 模型建立所需试剂及材料第15页
        2.2.2. HE 染色试剂第15-16页
        2.2.3. 压力机动实验试剂第16页
        2.2.4. Western blot 实验试剂第16-19页
        2.2.5. 全细胞膜片钳技术试剂第19-20页
    2.3. 实验仪器第20-22页
        2.3.1. 模型建立仪器第20页
        2.3.2. HE 染色仪器第20页
        2.3.3. 压力机动实验仪器第20页
        2.3.4. Western blot 仪器第20-21页
        2.3.5. 全细胞膜片钳技术仪器第21-22页
第3章 实验方法第22-29页
    3.1. 实验思路第22页
    3.2. 实验动物分组第22-23页
    3.3. 应用视交叉前池注血法蛛网膜下腔出血模型的建立第23页
    3.4. HE 染色鉴定模型及观察基底动脉形态变化第23-24页
    3.5. 采用 Kaoutzanis M 大鼠神经行为学评分法评分第24页
    3.6. 压力机动仪检测基底动脉直径变化第24页
        3.6.1. 实验步骤第24页
        3.6.2. 仪器设备参数第24页
    3.7. Western blot 技术检测缝隙连接蛋白表达变化第24-27页
        3.7.1. 不同实验组总蛋白的提取第24-25页
        3.7.2. 分光光度仪检测总蛋白含量第25页
        3.7.3. 提取总蛋白浓度配平及变性处理第25页
        3.7.4. 10%分离胶及 5%浓缩胶的制备第25-26页
        3.7.5. 蛋白上样第26页
        3.7.6. 蛋白电泳第26页
        3.7.7. 转膜第26页
        3.7.8. 封闭第26页
        3.7.9. 样品蛋白与特异性一抗免疫反应第26页
        3.7.10. TBST 洗涤 PVDF 膜上非特异性结合一抗第26页
        3.7.11. 特异性一抗与特异性二抗免疫反应第26-27页
        3.7.12. TBST 洗涤 PDVF 膜上非特异性结合二抗第27页
        3.7.13. 样品蛋白化学发光及暗室曝光第27页
        3.7.14. 膜再生第27页
        3.7.15. 内参蛋白β-actin 与特异性一抗及二抗免疫反应第27页
        3.7.16. 内参蛋白蛋白β-actin 化学发光及暗室曝光第27页
        3.7.17. 图像分析第27页
    3.8. 全细胞膜片钳技术观察缝隙连接通道电生理的变化第27-28页
        3.8.1. 实验步骤第27-28页
        3.8.2. 实验参数第28页
    3.9. 数据统计及分析第28-29页
第4章 实验结果第29-40页
    4.1. 视交叉前池注血法二次注血模型的建立第29页
    4.2. 神经行为学评分第29-30页
    4.3. 压力机动测脑血管直径变化第30-32页
    4.4. Western blot 检测基底动脉缝隙连接蛋白的表达第32-38页
        4.4.1. Cx37 蛋白表达检测第32页
        4.4.2. Cx40 蛋白表达检测第32-34页
        4.4.3. Cx43 蛋白表达检测第34-35页
        4.4.4. Cx45 蛋白表达检测第35-37页
        4.4.5. Cxs 间及与基底动脉直径的相关性分析第37-38页
    4.5. 全细胞膜片钳技术观察缝隙连接通道电生理的变化第38-40页
第5章 讨论第40-44页
    5.1. 关于蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的概述第40页
    5.2. 缝隙连接在脑血管痉挛病理机制中作用的概述第40-41页
        5.2.1. 缝隙连接结构第40-41页
        5.2.2. 缝隙连接功能第41页
        5.2.3. GJ 与 CVS 的关系第41页
    5.3. 自发性蛛网膜下腔出血模型的建立第41-42页
    5.4. 神经行为学评分第42页
    5.5. 压力机动测基底动脉直径变化第42页
    5.6. Western blot 检测基底动脉缝隙连接蛋白的表达第42-43页
    5.7. 全细胞膜片钳技术观察 GJ 电生理的变化第43页
    5.9. 展望第43-44页
第6章 结论第44-45页
参考文献第45-50页
综述第50-57页
    参考文献第55-57页
致谢第57-58页
作者简介及研究项目、发表文章第58页

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