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蒙古马高负荷运动训练前后转录组与miRNA文库特征及关联分析

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
缩略词表第13-15页
1. 引言第15-24页
    1.1 赛马简述第15-16页
    1.2 蒙古马及其特点第16-17页
    1.3 蒙古马的耐力第17页
    1.4 蒙古马的现状第17-18页
    1.5 马运动学研究进展概述第18-20页
    1.6 马运动学转录组概述第20-22页
    1.7 miRNA测序进展即及马属动物应用概述第22-24页
2.本研究的目的意义及技术路线第24-26页
    2.1 本研究的意义和目的第24-25页
    2.2 本研究的技术路线第25-26页
3. 实验准备第26-35页
    3.1 实验材料第26-28页
        3.1.1 实验主要仪器设备第26页
        3.1.2 实验主要试剂耗材第26-27页
        3.1.3 实验主要数据库及分析软件第27-28页
    3.2 实验用马的训练及样品采集第28-32页
        3.2.1 实验用马的训练第28-30页
        3.2.2 样品采集第30页
        3.2.3 Tol RNA的提取与质量评估第30-32页
    3.3 蒙古马骨骼肌细胞体外培养第32-35页
4. 实验方法第35-43页
    4.1 血液生理生化指标的检测第35页
    4.2 转录组高通量测序分析第35-37页
        4.2.1 文库制备与文库测序第36-37页
        4.2.2 原始数据的质量检测第37页
    4.3 miRNA测序分析第37-41页
        4.3.1 miRNA文库制备与测序第37-38页
        4.3.2 测序数据的质量控制第38-39页
        4.3.3 参考序列比对第39-40页
        4.3.4 miRNA分类注释与miRNA的预测第40-41页
        4.3.5 GO 功能富集和 KEGG Pathway 分析第41页
    4.4 mi RNA-m RNA整合关联分析第41-42页
    4.5 细胞转染实验第42-43页
5. 实验结果与分析第43-96页
    5.1 血液生理生化指标的检测第43-44页
    5.2 转录组测序分析第44-63页
        5.2.1 原始序列数据质量控制第44-46页
        5.2.2 测序饱和度分析第46-47页
        5.2.3 去除核糖体RNA第47页
        5.2.4 将clean data比对到参考基因组第47-48页
        5.2.5 基因覆盖度统计第48页
        5.2.6 相关性分析第48-49页
        5.2.7 表达模式聚类分析第49-50页
        5.2.8 成对差异基因结果统计第50-53页
        5.2.9 差异基因的Gene Ontology功能富集分析第53-56页
        5.2.10 差异基因KEGG Pathway第56-59页
        5.2.11 蒙古马训练前后差异表达基因的实时荧光定量PCR验证第59-63页
    5.3 mi RNA测序分析第63-83页
        5.3.1 测序数据质量及长度分布第63-64页
        5.3.2 公共及特有序列第64-65页
        5.3.3 mi RNA基因组定位及分类注释第65-72页
        5.3.4 各样品中新mi RNA预测统计第72-73页
        5.3.5 已知差异表达的mi RNA第73-75页
        5.3.6 miRNA靶基因预测及富集分析第75-78页
            5.3.6.1 miRNA靶基因预测第75页
            5.3.6.2 靶基因Gene Ontology富集分析第75-76页
            5.3.6.3 靶基因KEGG富集分析第76-78页
        5.3.7 差异表达mi RNA的q RT-PCR验证第78-83页
    5.4 miRNA-mRNA整合关联分析第83-90页
        5.4.1 差异表达miRNA与基因比较分析第83-86页
        5.4.2 靶基因GO富集分析第86-87页
        5.4.3 靶基因KEGG富集分析第87-90页
    5.5 运动学候选miRNA的载体构建及细胞转染第90-96页
        5.5.1 Pre-miR-1 载体的构建第90-92页
        5.5.2 载体的构建第92页
        5.5.3 载体双酶切鉴定第92-93页
        5.5.4 细胞转染第93-94页
        5.5.5 实时荧光定量PCR第94-96页
6. 讨论第96-107页
    6.1 训练方案的制定第96-98页
    6.2 血液生理生化指标的检测第98-100页
    6.3 转录组测序分析第100-103页
    6.4 miRNA测序分析第103-105页
    6.5 miRNA-mRNA整合关联分析第105-107页
7. 全文研究的创新与展望第107-108页
致谢第108-109页
参考 文献第109-121页
作者 简介第121-123页

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