| 摘要 | 第4-7页 |
| SUMMARY | 第7-9页 |
| 英文缩略图表 | 第10-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-28页 |
| 1.1 研究背景 | 第16-17页 |
| 1.2 乳蛋白的成分和功能 | 第17-18页 |
| 1.3 乳蛋白合成机理 | 第18-19页 |
| 1.3.1 乳蛋白的来源 | 第18页 |
| 1.3.2 乳腺细胞内蛋白质的合成 | 第18-19页 |
| 1.4 乳腺中氨基酸的营养代谢 | 第19-21页 |
| 1.4.1 乳腺中氨基酸的供给和摄取 | 第19-20页 |
| 1.4.2 乳腺中氨基酸的代谢 | 第20-21页 |
| 1.5 理想蛋白质模型及氨基酸平衡理论的提出 | 第21-22页 |
| 1.6 氨基酸影响乳蛋白合成的主要信号转导通路 | 第22-25页 |
| 1.6.1 m TOR信号转导通路 | 第22-24页 |
| 1.6.2 EAA通过mTOR信号通路调控乳蛋白的合成 | 第24-25页 |
| 1.7 永生化奶牛乳腺上皮细胞的系的应用及构建 | 第25-26页 |
| 1.8 立题依据 | 第26页 |
| 1.9 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 1.10技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 亮氨酸通过mTOR信号通路影响奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成 | 第28-50页 |
| 2.1. 引言 | 第28页 |
| 2.2. 试验材料和方法 | 第28-38页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.2 样品的准备 | 第29页 |
| 2.2.3 奶牛乳腺上皮永生系细胞的培养 | 第29-30页 |
| 2.2.4 MTT法检测细胞增殖 | 第30-31页 |
| 2.2.5 qRT-RCR检测相关基因表达与分析 | 第31-35页 |
| 2.2.6 Western Blot检测 | 第35-38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-48页 |
| 2.3.1 亮氨酸对CMEC-H细胞增殖的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.2 亮氨酸在CMEC-H细胞中对酪蛋白合成的影响 | 第39-41页 |
| 2.3.3 亮氨酸在CMEC-H细胞中对mTORC1表达的影响 | 第41-43页 |
| 2.3.4 亮氨酸在CMEC-H细胞中对mTOR信号通路相关因子表达的影响 | 第43-46页 |
| 2.3.5 在CMEC-H细胞中添加亮氨酸探究对酪蛋白的表达与mTOR信号通路相关蛋白磷酸化的相关性 | 第46-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-49页 |
| 2.4.1 亮氨酸对CMEC-H细胞增殖的影响 | 第48页 |
| 2.4.2 亮氨酸对m TOR信号通路介导酪蛋白合成表达的影响 | 第48-49页 |
| 2.4.3 亮氨酸对m TORC1信号通路相关因子表达的影响 | 第49页 |
| 2.5 结论 | 第49-50页 |
| 第三章 组氨酸通过mTOR信号通路影响奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成 | 第50-66页 |
| 3.1. 引言 | 第50页 |
| 3.2. 试验材料和方法 | 第50-53页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第50页 |
| 3.2.2 样品的准备 | 第50页 |
| 3.2.3 奶牛乳腺上皮永生系细胞的培养 | 第50页 |
| 3.2.4 MTT法检测细胞增殖 | 第50-51页 |
| 3.2.5 qRT-RCR检测相关基因表达与分析 | 第51-52页 |
| 3.2.6 Western Blot检测 | 第52-53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-63页 |
| 3.3.1 组氨酸对CMEC-H细胞增殖的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.2 组氨酸对CMEC-H细胞中酪蛋白相关因子表达的影响 | 第54-57页 |
| 3.3.3 组氨酸对m TORC1相关因子表达的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.4 组氨酸在CMEC-H细胞中对mTOR信号通路相关因子表达的影响 | 第58-61页 |
| 3.3.5 在CMEC-H细胞中添加组氨酸探究对酪蛋白的表达与mTOR信号通路相关蛋白磷酸化的相关性 | 第61-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-64页 |
| 3.4.1 组氨酸对CMEC-H细胞增殖的影响 | 第63-64页 |
| 3.4.2 组氨酸对m TOR信号通路介导酪蛋白合成相关基因表达的影响 | 第64页 |
| 3.4.3 组氨酸对m TORC1信号通路相关因子表达的影响 | 第64页 |
| 3.5 结论 | 第64-66页 |
| 第四章 组,赖,蛋和亮氨酸最优配比模式通过mTOR信号通路调节乳腺上皮细胞中β -酪蛋白的表达 | 第66-84页 |
| 4.1 引言 | 第66-67页 |
| 4.2. 试验材料和方法 | 第67-72页 |
| 4.2.1 主要仪器 | 第67页 |
| 4.2.2 样品的准备 | 第67页 |
| 4.2.3 奶牛乳腺上皮永生系细胞的培养 | 第67页 |
| 4.2.4 试验一:MTT法检测细胞增殖 | 第67-68页 |
| 4.2.5 Western Blot检测相关蛋白表达与分析 | 第68-72页 |
| 4.3 结果与分析 | 第72-81页 |
| 4.3.1 不同EAA对CMEC-H细胞增殖的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.2 单独添加亮、组、赖和蛋氨酸对 β-casein表达的影响 | 第73-74页 |
| 4.3.3 利用响应面设计筛选 β-casein酪蛋白表达的最佳浓度配比模式 | 第74-79页 |
| 4.3.4 最佳浓度配比EAA对 β-casein表达的影响 | 第79页 |
| 4.3.5 亮、组、赖和蛋氨酸最佳浓度配比对m TORC1相关蛋白表达的影响64 | 第79-80页 |
| 4.3.6 亮、组、赖和蛋氨酸最佳浓度配比对m TOR下游相关蛋白表达的影响 | 第80-81页 |
| 4.4 讨论 | 第81-83页 |
| 4.4.1 组、赖、蛋和亮氨酸对CMEC-H细胞增殖的影响 | 第81-82页 |
| 4.4.2 组、赖、蛋和亮氨酸对CMEC-H中 β-酪蛋白合成的影响 | 第82页 |
| 4.4.3 组、赖、蛋和亮氨酸对CMEC-H中mTORC1信号通路相关蛋白表达的影响 | 第82-83页 |
| 4.5 结论 | 第83-84页 |
| 第五章 全文总结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 作者简历 | 第93-95页 |
| 导师简介 | 第95-96页 |