| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第8-13页 |
| 1.1 Mst1与Mst2基因简介 | 第8页 |
| 1.2 Mst1,Mst2及Hippo信号通路 | 第8-10页 |
| 1.3 Mst1参与的其他信号通路及生理过程 | 第10-13页 |
| 1.3.1 Mst1,Foxo1/3和Akt信号通路 | 第11页 |
| 1.3.2 Mst1,Rap1和RAPL信号通路 | 第11-13页 |
| 第二章 Mstl与Mst2在小鼠胚胎发育中的功能研究 | 第13-43页 |
| 2.1 背景知识 | 第13-18页 |
| 2.1.1 小鼠胚胎发育简介 | 第13-14页 |
| 2.1.2 小鼠胎盘发育过程介绍 | 第14-18页 |
| 2.1.2.1 胎盘发育总揽 | 第14-16页 |
| 2.1.2.2 调控滋养细胞分化的信号分子 | 第16-18页 |
| 2.2 选题意义 | 第18-19页 |
| 2.3 材料与方法 | 第19-23页 |
| 2.3.1 小鼠品系和基因型鉴定 | 第19-20页 |
| 2.3.2 石蜡切片 | 第20页 |
| 2.3.3 冰冻切片 | 第20页 |
| 2.3.4 苏木精伊红(H＆E)染色 | 第20-21页 |
| 2.3.5 免疫荧光染色和免疫组化 | 第21页 |
| 2.3.6 X-gal染色 | 第21页 |
| 2.3.7 小鼠全胚免疫组化 | 第21-22页 |
| 2.3.8 小鼠胎盘RNA原位杂交 | 第22-23页 |
| 2.3.9 统计学分析 | 第23页 |
| 2.4 结果与分析 | 第23-40页 |
| 2.4.1 Mst1~(-/-)；Mst2~(-/-)小鼠表现出多种发育缺陷且胚胎发育期死亡 | 第23-26页 |
| 2.4.2 Mst~(L/L); Mst2~(-/-)；Nestin-Cre小鼠可以存活但出生后生长迟缓 | 第26-29页 |
| 2.4.3 Mst1~(L/L);Mst2~(-/-);Tie2-Cre小鼠胚胎致死但心脏血管发育没有明显缺陷 | 第29-30页 |
| 2.4.4 Mst1~(L/L)；Mst2~(-/-)；Tie2-Cre小鼠胎盘迷路层发育缺陷 | 第30-33页 |
| 2.4.5 Mst1~(-/-)；Mst2~(-/-)小鼠胎盘滋养细胞层及迷路层严重发育缺陷 | 第33-35页 |
| 2.4.6 Mst1和Mst2在小鼠胎盘滋养细胞高表达 | 第35-37页 |
| 2.4.7 Mst1~(-/-)；Mst2~(-/-)小鼠胎盘中滋养细胞凋亡与增殖没有明显异常 | 第37-38页 |
| 2.4.8 Mst1~(-/-)；Mst2~(-/-)小鼠胎盘滋养细胞中P38磷酸化水平没有显著改变 | 第38-39页 |
| 2.4.9 Mst1~(-/-)；Mst2~(-/-)小鼠胎盘滋养细胞中转录因子Mash2表达量下降 | 第39-40页 |
| 2.5 讨论与总结 | 第40-43页 |
| 第三章 Mst1与Mst2在小鼠调节T细胞及免疫耐受中的功能研究 | 第43-79页 |
| 3.1 背景知识 | 第43-48页 |
| 3.1.1 调节T细胞发育和功能 | 第43-45页 |
| 3.1.2 Foxp3与调节T细胞 | 第45-47页 |
| 3.1.3 Mst1和Mst2在免疫系统中的研究背景 | 第47-48页 |
| 3.2 选题意义 | 第48页 |
| 3.3 材料与方法 | 第48-52页 |
| 3.3.1 组织切片及免疫荧光染色 | 第48-49页 |
| 3.3.2 抗核抗体检测 | 第49页 |
| 3.3.3 淋巴细胞流式细胞分析 | 第49页 |
| 3.3.4 细胞胞内信号和Foxp3染色 | 第49-50页 |
| 3.3.5 Annexin V凋亡分析 | 第50页 |
| 3.3.6 BrdU增殖实验 | 第50页 |
| 3.3.7 骨髓移植实验 | 第50页 |
| 3.3.8 调节T细胞抑制功能分析实验 | 第50-51页 |
| 3.3.9 调节T细胞体外诱导分化试验 | 第51页 |
| 3.3.10 荧光定量PCR | 第51页 |
| 3.3.11 荧光素酶报告基因实验 | 第51-52页 |
| 3.3.12 蛋白印迹 | 第52页 |
| 3.3.13 统计学分析 | 第52页 |
| 3.4 结果与分析 | 第52-75页 |
| 3.4.1 Mst1~(-/-)及Mst1~(L/L)；Lck-Cre小鼠表现出自身免疫病表型 | 第52-54页 |
| 3.4.2 Mst1~(-/-)T细胞的增殖,激活和分化增强 | 第54-57页 |
| 3.4.3 Mst1~(-/-)小鼠的调节T细胞发育缺陷 | 第57-61页 |
| 3.4.4 Mst1~(-/-)小鼠的调节T细胞的功能缺陷 | 第61-62页 |
| 3.4.5 显性免疫耐受的缺失可能是导致Mst1~(-/-)小鼠自身免疫病的主要原因 | 第62-64页 |
| 3.4.6 Mstl通过调节Foxo1和Foxo3a蛋白稳定性影响Foxp3基因表达 | 第64-71页 |
| 3.4.6.1 Mst1缺失导致Foxp3基因诱导表达的缺陷 | 第64-66页 |
| 3.4.6.2 Mst1缺失不影响TGFβ-Smad信号通路 | 第66-67页 |
| 3.4.6.3 Mst1-Foxo信号通路调节Foxp3基因表达 | 第67页 |
| 3.4.6.4 Mst1调节Foxo蛋白的稳定性 | 第67-69页 |
| 3.4.6.5 Mst1通过磷酸化Foxo1/3a蛋白调节其稳定性 | 第69-70页 |
| 3.4.6.6 Mst1可能通过抑制Akt活性(磷酸化)间接调控Foxo1/3a活性 | 第70-71页 |
| 3.4.7 Mst1与Mst2在小鼠Treg发育和免疫耐受中的冗余性 | 第71-75页 |
| 3.5 讨论与总结 | 第75-79页 |
| 第四章 参考文献 | 第79-84页 |
| 在学期间发表论文 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
