摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 综述 | 第10-33页 |
1.1 油菜素甾醇的合成途径 | 第10-14页 |
1.2 油菜素甾醇合成基因的组织特异性表达以及内源BRs的分布 | 第14-15页 |
1.3 油菜素甾醇的代谢途径 | 第15-21页 |
1.3.1 BR代谢过程中的修饰方法 | 第16-17页 |
1.3.2 BR修饰相关的基因 | 第17-20页 |
1.3.3 外界刺激因素对于BR修饰基因的调节 | 第20页 |
1.3.4 现有发现的BRs酯化反应 | 第20-21页 |
1.4 油菜素甾醇的信号途径 | 第21-25页 |
1.4.1 BRs的受体BRI1 | 第23-24页 |
1.4.2 转录因子BES1和BZRl | 第24-25页 |
1.5 现有酰基转移酶的功能 | 第25-31页 |
1.6 本论文研究的生物学问题 | 第31-33页 |
第二章 实验材料和实验方法 | 第33-45页 |
2.1 实验材料 | 第33-36页 |
2.1.1 植物材料和培养条件 | 第33页 |
2.1.2 菌株 | 第33页 |
2.1.3 酶 | 第33页 |
2.1.4 抗体 | 第33页 |
2.1.5 载体 | 第33-34页 |
2.1.6 抗生素 | 第34页 |
2.1.7 蛋白纯化介质 | 第34页 |
2.1.8 试剂盒 | 第34页 |
2.1.9 主要的化学试剂 | 第34-35页 |
2.1.10 主要的实验仪器 | 第35页 |
2.1.11 图像及数据分析软件 | 第35-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-45页 |
2.2.1 载体的构建 | 第36页 |
2.2.2 融合蛋白体外表达及纯化 | 第36页 |
2.2.3 拟南芥基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
2.2.4 反转录PCR | 第37-38页 |
2.2.5 基因表达谱分析 | 第38页 |
2.2.6 实时定量PCR检测基因表达 | 第38页 |
2.2.7 拟南芥的杂交 | 第38-39页 |
2.2.8 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第39页 |
2.2.9 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第39-40页 |
2.2.10 质粒的提取 | 第40页 |
2.2.11 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第40-41页 |
2.2.12 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第41页 |
2.2.13 植物材料的种植 | 第41-42页 |
2.2.14 激活标签群体的构建及鉴定 | 第42页 |
2.2.15 激素处理实验 | 第42页 |
2.2.16 BR含量的测定 | 第42页 |
2.2.17 蛋白样品的提取及免疫分析 | 第42-43页 |
2.2.18 油菜素甾醇相关化合物的合成 | 第43-44页 |
2.2.19 酰基转移酶催化活性的实验 | 第44-45页 |
第三章 酰基转移酶DRL1在BR代谢中的功能研究 | 第45-63页 |
3.1 激活标签群体的构建以及突变体drl1-D的表型分析 | 第45-46页 |
3.2 突变体drl1-D与BRs的关系 | 第46-48页 |
3.3 突变体drl1-D的鉴定 | 第48-50页 |
3.4 基因DRL1功能的探索 | 第50-53页 |
3.5 基因DRL1受植物激素的调节 | 第53-54页 |
3.6 同源基因的相关特性 | 第54-59页 |
3.7 基因DRL1在水稻中的应用 | 第59-63页 |
第四章 讨论与展望 | 第63-69页 |
4.1 结论 | 第63页 |
4.2 讨论 | 第63-68页 |
4.3 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-82页 |
附录 | 第82-92页 |
附录A 本论文中用到的引物 | 第82-86页 |
附录B 常用试剂和缓冲液配方 | 第86-90页 |
附录C 常用培养基配方 | 第90-91页 |
附录D 订购的T-DNA SALK编号及相对应基因 | 第91-92页 |
在读期间发表论文及申请专利 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-95页 |