摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-21页 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS) | 第12页 |
1.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) | 第12-15页 |
1.2.1 PRRSV的基因组构成 | 第12-13页 |
1.2.2 PRRSV的非结构蛋白 | 第13-14页 |
1.2.3 PRRSV的结构蛋白 | 第14页 |
1.2.4 PRRSV的基因多样性 | 第14页 |
1.2.5 PRRSV的复制机制 | 第14-15页 |
1.3 PRRSV感染与先天性免疫应答 | 第15-17页 |
1.3.1 Toll样受体信号 | 第15-16页 |
1.3.2 PRRSV感染对先天性免疫应答的调节 | 第16-17页 |
1.4 IL-10研究进展 | 第17-20页 |
1.4.1 IL-10的生物学活性及功能 | 第17-20页 |
1.4.2 PRRSV与IL-10 | 第20页 |
1.5 研究目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 PRRSV HuN4株强弱毒体外诱导IL-10产生差异的分子基础研究 | 第21-31页 |
2.1 材料和方法 | 第21-25页 |
2.1.1 病毒和细胞 | 第21页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 猪肺泡巨噬细胞(PAM)的获取 | 第22页 |
2.1.4 病毒感染 | 第22页 |
2.1.5 细胞总RNA的提取 | 第22-23页 |
2.1.6 cDNA合成 | 第23页 |
2.1.7 实时荧光定量PCR | 第23页 |
2.1.8 实时荧光定量RT-PCR检测PRRSV病毒含量 | 第23-24页 |
2.1.9 ELISA检测IL-10蛋白 | 第24-25页 |
2.1.10裂解细胞和Western blot分析 | 第25页 |
2.2 结果 | 第25-29页 |
2.2.1 PRRSV强弱毒感染PAM细胞后IL-10的表达存在明显差异 | 第25-27页 |
2.2.2 PRRSV强弱毒感染PAM细胞复制水平存在明显差异 | 第27页 |
2.2.3 PRRSV强弱毒感染PAM细胞TLR出现差异表达 | 第27-28页 |
2.2.4 PRRSV强弱毒感染PAM细胞后对MyD88和TRIF的影响 | 第28-29页 |
2.2.5 PRRSV强毒感染PAM细胞后激活p38 MAPK通路 | 第29页 |
2.3 讨论 | 第29-31页 |
第三章 PRRSV不同编码区对IL-10影响的研究 | 第31-43页 |
3.1 材料与方法 | 第31-35页 |
3.1.1 病毒和细胞 | 第31页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第31页 |
3.1.3 嵌合病毒构建策略 | 第31-33页 |
3.1.4 嵌合病毒的拯救 | 第33-34页 |
3.1.5 拯救嵌合病毒的鉴定 | 第34页 |
3.1.6 拯救嵌合病毒的生长特性 | 第34页 |
3.1.7 嵌合病毒对IL-10影响的初步研究 | 第34-35页 |
3.2 结果 | 第35-40页 |
3.2.1 全长嵌合cDNA质粒的线性化 | 第35页 |
3.2.2 测序以及genomic marker的检测 | 第35页 |
3.2.3 间接免疫荧光检测结果 | 第35-36页 |
3.2.4 拯救嵌合病毒生长特性 | 第36-37页 |
3.2.5 PRRSV大片段嵌合病毒感染PAM细胞后IL-10的表达存在差异 | 第37-38页 |
3.2.6 PRRSV大片段嵌合病毒感染PAM细胞后复制水平存在差异 | 第38页 |
3.2.7 PRRSV大片段嵌合病毒感染PAM细胞后p38磷酸化水平存在差异 | 第38-39页 |
3.2.8 PRRSV非结构蛋白嵌合病毒感染PAM细胞后IL-10的表达存在差异 | 第39页 |
3.2.9 PRRSV非结构蛋白嵌合病毒感染PAM细胞后复制水平存在差异 | 第39-40页 |
3.2.10 PRRSV非结构蛋白嵌合病毒感染PAM细胞后p38磷酸化水平存在差异 | 第40页 |
3.4 讨论 | 第40-43页 |
第四章 全文总结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简历 | 第56页 |