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猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导IL-10产生的分子基础研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-21页
    1.1 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)第12页
    1.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)第12-15页
        1.2.1 PRRSV的基因组构成第12-13页
        1.2.2 PRRSV的非结构蛋白第13-14页
        1.2.3 PRRSV的结构蛋白第14页
        1.2.4 PRRSV的基因多样性第14页
        1.2.5 PRRSV的复制机制第14-15页
    1.3 PRRSV感染与先天性免疫应答第15-17页
        1.3.1 Toll样受体信号第15-16页
        1.3.2 PRRSV感染对先天性免疫应答的调节第16-17页
    1.4 IL-10研究进展第17-20页
        1.4.1 IL-10的生物学活性及功能第17-20页
        1.4.2 PRRSV与IL-10第20页
    1.5 研究目的与意义第20-21页
第二章 PRRSV HuN4株强弱毒体外诱导IL-10产生差异的分子基础研究第21-31页
    2.1 材料和方法第21-25页
        2.1.1 病毒和细胞第21页
        2.1.2 试剂与仪器第21-22页
        2.1.3 猪肺泡巨噬细胞(PAM)的获取第22页
        2.1.4 病毒感染第22页
        2.1.5 细胞总RNA的提取第22-23页
        2.1.6 cDNA合成第23页
        2.1.7 实时荧光定量PCR第23页
        2.1.8 实时荧光定量RT-PCR检测PRRSV病毒含量第23-24页
        2.1.9 ELISA检测IL-10蛋白第24-25页
        2.1.10裂解细胞和Western blot分析第25页
    2.2 结果第25-29页
        2.2.1 PRRSV强弱毒感染PAM细胞后IL-10的表达存在明显差异第25-27页
        2.2.2 PRRSV强弱毒感染PAM细胞复制水平存在明显差异第27页
        2.2.3 PRRSV强弱毒感染PAM细胞TLR出现差异表达第27-28页
        2.2.4 PRRSV强弱毒感染PAM细胞后对MyD88和TRIF的影响第28-29页
        2.2.5 PRRSV强毒感染PAM细胞后激活p38 MAPK通路第29页
    2.3 讨论第29-31页
第三章 PRRSV不同编码区对IL-10影响的研究第31-43页
    3.1 材料与方法第31-35页
        3.1.1 病毒和细胞第31页
        3.1.2 试剂与仪器第31页
        3.1.3 嵌合病毒构建策略第31-33页
        3.1.4 嵌合病毒的拯救第33-34页
        3.1.5 拯救嵌合病毒的鉴定第34页
        3.1.6 拯救嵌合病毒的生长特性第34页
        3.1.7 嵌合病毒对IL-10影响的初步研究第34-35页
    3.2 结果第35-40页
        3.2.1 全长嵌合cDNA质粒的线性化第35页
        3.2.2 测序以及genomic marker的检测第35页
        3.2.3 间接免疫荧光检测结果第35-36页
        3.2.4 拯救嵌合病毒生长特性第36-37页
        3.2.5 PRRSV大片段嵌合病毒感染PAM细胞后IL-10的表达存在差异第37-38页
        3.2.6 PRRSV大片段嵌合病毒感染PAM细胞后复制水平存在差异第38页
        3.2.7 PRRSV大片段嵌合病毒感染PAM细胞后p38磷酸化水平存在差异第38-39页
        3.2.8 PRRSV非结构蛋白嵌合病毒感染PAM细胞后IL-10的表达存在差异第39页
        3.2.9 PRRSV非结构蛋白嵌合病毒感染PAM细胞后复制水平存在差异第39-40页
        3.2.10 PRRSV非结构蛋白嵌合病毒感染PAM细胞后p38磷酸化水平存在差异第40页
    3.4 讨论第40-43页
第四章 全文总结第43-44页
参考文献第44-55页
致谢第55-56页
作者简历第56页

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