| 中文摘要 | 第14-18页 |
| ABSTRACT | 第18-22页 |
| 符号说明 | 第23-24页 |
| 前言 | 第24-32页 |
| 一、肿瘤免疫疗法 | 第24-25页 |
| 二、基于M2型TAMs的肿瘤免疫疗法 | 第25-27页 |
| 三、载体的选择 | 第27-28页 |
| 四、课题设计 | 第28-32页 |
| 第一章 一级靶向纳米载体的构建及其理化性质研究 | 第32-46页 |
| 一、仪器与试剂 | 第32-33页 |
| 1. 试剂 | 第32页 |
| 2. 仪器 | 第32-33页 |
| 3. 溶液配制 | 第33页 |
| 3.1 磷酸盐缓冲液的配置 | 第33页 |
| 3.2 1×电泳缓冲液的配置 | 第33页 |
| 一、实验方法 | 第33-36页 |
| 1. CPN的合成与表征 | 第33-34页 |
| 2. PR的制备 | 第34页 |
| 3. CPR的制备 | 第34页 |
| 4. 处方考察 | 第34-35页 |
| 4.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
| 4.2 PEI的用量对PR的影响 | 第35页 |
| 4.3 CPN的用量对CPR的影响 | 第35页 |
| 5. 最优处方的理化性质评价 | 第35页 |
| 5.1 形态 | 第35页 |
| 5.2 粒径及粒度分布 | 第35页 |
| 5.3 Zeta电位 | 第35页 |
| 6. 初步稳定性考察 | 第35-36页 |
| 6.1 提取方法的选择 | 第35-36页 |
| 6.2 抗RNaseA能力的考察 | 第36页 |
| 6.3 血清中的稳定性 | 第36页 |
| 三、实验结果 | 第36-44页 |
| 1. CPN的合成与表征 | 第36-37页 |
| 2. PR的制备 | 第37-38页 |
| 3. CPR的制备 | 第38-40页 |
| 4. 最优处方的确定及其理化性质评价 | 第40-41页 |
| 4.1 形态 | 第40页 |
| 4.2 粒径及粒度分布 | 第40-41页 |
| 4.3 Zeta电位 | 第41页 |
| 5. 初步稳定性考察 | 第41-44页 |
| 5.1 提取方法的选择 | 第41-42页 |
| 5.2 抗RNaseA能力的考察 | 第42-43页 |
| 5.3 血清中的稳定性 | 第43-44页 |
| 四、讨论 | 第44-45页 |
| 五、本章小结 | 第45-46页 |
| 第二章: pH敏感逐级靶向纳米载体的构建及其理化性质研究 | 第46-67页 |
| 一、仪器与试剂 | 第46-47页 |
| 1. 试剂 | 第46页 |
| 2. 仪器 | 第46-47页 |
| 3. 溶液配制 | 第47页 |
| 3.1 磷酸盐缓冲液的配置 | 第47页 |
| 3.2 1×电泳缓冲液的配置 | 第47页 |
| 二、实验方法 | 第47-51页 |
| 1. M-PEI的合成与表征 | 第47-48页 |
| 2. MPR的制备 | 第48页 |
| 3. CMPR的制备 | 第48页 |
| 4. 处方考察 | 第48-49页 |
| 4.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第48页 |
| 4.2 M-PEI的用量对MPR的影响 | 第48-49页 |
| 4.3 CPN的用量对CMPR的影响 | 第49页 |
| 5. 最优处方的确定及其理化性质评价 | 第49页 |
| 5.1 形态 | 第49页 |
| 5.2 粒径及粒度分布 | 第49页 |
| 5.3 Zeta电位 | 第49页 |
| 6. 初步稳定性考察 | 第49-50页 |
| 6.1 提取方法的选择 | 第49页 |
| 6.2 抗RNase A能力的考察 | 第49-50页 |
| 6.3 血清中的稳定性 | 第50页 |
| 6.4 存储稳定性 | 第50页 |
| 6.5 血浆稳定性 | 第50页 |
| 7. RNA含量测定方法的建立 | 第50-51页 |
| 7.1 RiboGreen工作液配制 | 第50页 |
| 7.2 激发、发射波长的确定 | 第50页 |
| 7.3 不同pH条件标准曲线的建立 | 第50-51页 |
| 8. 体外释放实验 | 第51页 |
| 9. CPN等电点的测定 | 第51页 |
| 三、实验结果 | 第51-65页 |
| 1. M-PEI的合成与表征 | 第51-53页 |
| 2. MPR的制备 | 第53-54页 |
| 3. CMPR的制备 | 第54-55页 |
| 4. 最优处方的确定及其理化性质评价 | 第55-57页 |
| 4.1 形态 | 第55-56页 |
| 4.2 粒径及粒度分布 | 第56-57页 |
| 4.3 Zeta电位 | 第57页 |
| 5. 初步稳定性考察 | 第57-62页 |
| 5.1 提取方法的选择 | 第57-58页 |
| 5.2 抗RNaseA能力的考察 | 第58-59页 |
| 5.3 血清中的稳定性 | 第59-60页 |
| 5.4 存储稳定性 | 第60-61页 |
| 5.5 血浆稳定性 | 第61-62页 |
| 6. RNA含量测定方法的建立 | 第62-64页 |
| 6.1 激发、发射波长的确定 | 第62页 |
| 6.2 不同pH条件标准曲线的建立 | 第62-64页 |
| 7. 体外释放实验 | 第64-65页 |
| 8. CPN等电点的测定 | 第65页 |
| 四、讨论 | 第65-66页 |
| 五、本章小结 | 第66-67页 |
| 第三章: pH敏感逐级靶向纳米载体的体内、外靶向性评价及其初步安全性评价 | 第67-87页 |
| 一、仪器与试剂 | 第67-68页 |
| 1. 试剂 | 第67页 |
| 2. 仪器 | 第67-68页 |
| 3. 溶液配制 | 第68页 |
| 二、实验方法 | 第68-71页 |
| 1. PR及MPR细胞摄取实验 | 第68页 |
| 2. 竞争性抑制实验 | 第68-69页 |
| 3. CPN pH敏感响应性脱落实验 | 第69页 |
| 4. 小鼠活体成像实验 | 第69页 |
| 5. 肿瘤组织冰冻切片实验 | 第69-70页 |
| 6. 红细胞溶血实验 | 第70-71页 |
| 7. 组织切片实验 | 第71页 |
| 三、实验结果 | 第71-84页 |
| 1. PR及MPR细胞摄取实验 | 第71-73页 |
| 2. 竞争性抑制实验 | 第73-76页 |
| 3. CPNpH敏感响应性脱落实验 | 第76-78页 |
| 4. 小鼠活体成像实验 | 第78-79页 |
| 5. 肿瘤组织冰冻切片实验 | 第79-80页 |
| 6. 红细胞溶血实验 | 第80-83页 |
| 7. 组织切片实验 | 第83-84页 |
| 四、讨论 | 第84-85页 |
| 五、本章小结 | 第85-87页 |
| 全文总结与展望 | 第87-89页 |
| 一、全文结论 | 第87-88页 |
| 二、创新点 | 第88页 |
| 三、展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第98-99页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第99页 |