| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 小反刍兽疫及其病原研究进展 | 第13-21页 |
| 1.1 前言 | 第13页 |
| 1.2 小反刍兽疫概述 | 第13-14页 |
| 1.3 小反刍兽疫病原学 | 第14-18页 |
| 1.3.1 病毒的理化特性和生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 病毒的基因组结构 | 第15-16页 |
| 1.3.3 编码的蛋白及功能 | 第16-18页 |
| 1.3.4 感染与增殖过程 | 第18页 |
| 1.4 流行与分布 | 第18-19页 |
| 1.5 预防免疫 | 第19-21页 |
| 第二章 小反刍兽疫病毒FY株的分离与鉴定 | 第21-30页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 病料来源 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.3 试验细胞及单抗 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 病料处理 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.3 病毒的分离培养 | 第23页 |
| 2.2.4 病毒的鉴定 | 第23-25页 |
| 2.3 结果 | 第25-28页 |
| 2.3.1 病毒分离结果 | 第25-26页 |
| 2.3.2 RT-PCR鉴定结果 | 第26页 |
| 2.3.3 间接免疫荧光鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.4 Western Blot鉴定 | 第27页 |
| 2.3.5 病毒形态观察 | 第27-28页 |
| 2.3.6 病毒滴度的测定 | 第28页 |
| 2.3.7 病毒一步生长曲线 | 第28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 小反刍兽疫病毒FY株N基因的原核表达及多抗的制备 | 第30-38页 |
| 3.1 材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 主要试剂与仪器 | 第30-31页 |
| 3.1.2 实验动物 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第31页 |
| 3.2.2 PPRVN基因的扩增与纯化 | 第31-32页 |
| 3.2.3 重组表达载体的构建及鉴定 | 第32页 |
| 3.2.4 PPRV N基因的诱导表达及可溶性分析 | 第32页 |
| 3.2.5 包涵体蛋白的纯化 | 第32页 |
| 3.2.6 纯化蛋白的定量 | 第32-33页 |
| 3.2.7 多克隆抗体的制备 | 第33页 |
| 3.2.8 Western Blot检测多抗特异性 | 第33页 |
| 3.2.9 间接免疫荧光实验(IFA) | 第33页 |
| 3.3 结果 | 第33-36页 |
| 3.3.1 目的基因的扩增及重组表达质粒的构建 | 第33-34页 |
| 3.3.2 重组N蛋白的表达及可溶性分析 | 第34-35页 |
| 3.3.3 表达产物的纯化与定量 | 第35页 |
| 3.3.4 间接免疫荧光试验(IFA)鉴定多抗效果 | 第35-36页 |
| 3.3.5 Western Blot鉴定多抗效果 | 第36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 小反刍兽疫病毒FY株全基因组序列测定及分析 | 第38-48页 |
| 4.1 材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 病料 | 第38页 |
| 4.1.2 主要试剂和仪器 | 第38-39页 |
| 4.2 方法 | 第39页 |
| 4.2.1 引物设计合成 | 第39页 |
| 4.2.2 RNA提取及RT-PCR扩增 | 第39页 |
| 4.3 结果与分析 | 第39-47页 |
| 4.3.1 RT-PCR结果 | 第39-40页 |
| 4.3.2 PPRV FY株基因组长度与基因排布 | 第40-41页 |
| 4.3.3 PPRV FY株与参考毒株同源性比较 | 第41-42页 |
| 4.3.4 PPRV FY株与参考毒株基因间隔区序列比较 | 第42-43页 |
| 4.3.5 PPRV FY株与参考毒株末端调控序列及编码区氨基酸序列比较 | 第43-45页 |
| 4.3.6 保守区域氨基酸序列分析 | 第45-46页 |
| 4.3.7 PPRV FY株系统进化分析 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 英文缩略表 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
