| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 上篇 文献综述 | 第10-31页 |
| 第一章 蛋白磷酸酶的在真核生物中研究进展 | 第11-31页 |
| 1 蛋白磷酸酶概述 | 第11-18页 |
| 1.1 蛋白磷酸酶简介 | 第11-13页 |
| 1.2 蛋白磷酸酶的结构 | 第13-18页 |
| 2 蛋白磷酸酶的生物学功能 | 第18-24页 |
| 2.1 蛋白磷酸酶对丝裂原激活的蛋白激酶信号通路的调节 | 第18-20页 |
| 2.2 蛋白磷酸酶对细胞周期的调控作用 | 第20-22页 |
| 2.3 蛋白磷酸酶对基因转录的调控作用 | 第22-23页 |
| 2.4 蛋白磷酸酶的其他功能 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-31页 |
| 下篇 研究内容 | 第31-73页 |
| 第一章 Gα互作蛋白的筛选及PsPP2C磷酸酶活性测定 | 第33-49页 |
| 1 材料与方法 | 第35-39页 |
| 1.1 供试菌株 | 第35页 |
| 1.2 质粒构建 | 第35-36页 |
| 1.3 原核诱导表达蛋白 | 第36页 |
| 1.4 Western-blot | 第36-37页 |
| 1.5 GST Pull-down体外筛选PsGPA1互作蛋白 | 第37页 |
| 1.6 GST Pull-down 一对一互作验证 | 第37-38页 |
| 1.7 蛋白磷酸酶活性检测 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-46页 |
| 2.1 GST Pull-down筛选PsGPA1互作蛋白结果分析 | 第39-41页 |
| 2.2 GST Pull-down 一对一互作验证 | 第41-43页 |
| 2.3 PsPP2C磷酸酶活性的测定 | 第43-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第二章 PsPP2C参与调控大豆疫霉的生长发育及致病性 | 第49-73页 |
| 1 材料和方法 | 第51-56页 |
| 1.1 供试菌株 | 第51页 |
| 1.2 数据库信息和系统发育分析 | 第51页 |
| 1.3 质粒构建 | 第51-52页 |
| 1.4 大豆疫霉遗传转化 | 第52-53页 |
| 1.5 DNA和RNA的提取 | 第53-54页 |
| 1.6 PsPP2C沉默转化子的筛选 | 第54页 |
| 1.7 PsPP2C过表达转化子的筛选 | 第54页 |
| 1.8 SYBR green实时定量RT-PCR分析 | 第54页 |
| 1.9 PsPP2C转化子的表型分析 | 第54-55页 |
| 1.10 致病性测定 | 第55页 |
| 1.11 菌丝细胞膜FM4-64染色观察 | 第55-56页 |
| 1.12 目的基因插入的验证 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-69页 |
| 2.1 PsPP2C生物学信息分析 | 第56-58页 |
| 2.2 PsPP2C沉默转化子的获得 | 第58-59页 |
| 2.3 PsPP2C参与调控大豆疫霉的生长过程 | 第59-60页 |
| 2.4 PsPP2C参与调控大豆疫霉孢子囊的产生过程 | 第60-61页 |
| 2.5 PsPP2C的沉默不影响大豆疫霉游动孢子的趋化性 | 第61-62页 |
| 2.6 PsPP2C参与调控大豆疫霉致病过程 | 第62-64页 |
| 2.7 PsPP2C参与调控大豆疫霉的有性生殖过程 | 第64-66页 |
| 2.8 PsPP2C过表达转化子的获得 | 第66-67页 |
| 2.9 PsPP2C的亚细胞定位 | 第67页 |
| 2.10 PsPP2C的过量表达不影响大豆疫霉的致病力和趋化性 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
