| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 NS1蛋白的结构与功能 | 第13-18页 |
| 1.1 NS1蛋白的结构 | 第13-14页 |
| 1.2 NS1蛋白参与病毒的复制 | 第14-15页 |
| 1.3 NS1蛋白参与病毒RNA的合成 | 第15页 |
| 1.4 NS1蛋白与自噬作用 | 第15-16页 |
| 1.5 NS1蛋白对病毒毒力的影响 | 第16-17页 |
| 1.6 NS1蛋白与信号通路 | 第17页 |
| 1.7 NS1蛋白的免疫保护性 | 第17-18页 |
| 2 黄病毒蛋白与宿主细胞蛋白的相互作用 | 第18-19页 |
| 2.1 NS1蛋白的宿主受体 | 第18页 |
| 2.2 黄病毒其它蛋白的宿主细胞受体 | 第18-19页 |
| 3 酵母双杂交技术 | 第19-22页 |
| 3.1 酵母双杂交技术的原理 | 第19-20页 |
| 3.2 酵母双杂交技术的运用 | 第20-22页 |
| 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二部分 试验研究 | 第23-70页 |
| 第一章 乙型脑炎病毒NS1蛋白诱饵酵母菌的构建 | 第23-45页 |
| 1 试验材料 | 第23-25页 |
| 1.1 菌株和载体 | 第23页 |
| 1.2 病毒株 | 第23页 |
| 1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 1.4 所需溶液及配制 | 第24-25页 |
| 1.5 主要仪器设备 | 第25页 |
| 2 试验方法 | 第25-37页 |
| 2.1 诱饵质粒pGBKT7-NS1的构建 | 第25-33页 |
| 2.2 诱饵酵母菌的制备 | 第33-35页 |
| 2.3 诱饵酵母菌表型鉴定 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-42页 |
| 3.1 NS1基因的TA克隆鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2 诱饵质粒pGBKT7-NS1的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第38-40页 |
| 3.3 诱饵酵母菌的鉴定 | 第40页 |
| 3.4 目标蛋白表达的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.5 毒性效应检测 | 第41-42页 |
| 3.6 自激活效应检测 | 第42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 5 小结 | 第44-45页 |
| 第二章 乙型脑炎病毒NS1蛋白的宿主互作蛋白筛选 | 第45-55页 |
| 1 试验材料 | 第45-46页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第45页 |
| 1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 1.3 所需溶液及配制配制 | 第45-46页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46-48页 |
| 2.1 酵母双杂交第一轮筛选 | 第46-47页 |
| 2.2 第二轮筛选 | 第47页 |
| 2.3 阳性克隆的鉴定 | 第47页 |
| 2.4 回复杂交验证 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-51页 |
| 3.1 交杂交率的计算 | 第48页 |
| 3.2 筛选结果 | 第48-49页 |
| 3.3 阳性克隆质粒PCR鉴定结果 | 第49页 |
| 3.4 阳性克隆质粒测序结果 | 第49-50页 |
| 3.5 回复杂交验证结果 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 5 小结 | 第54-55页 |
| 第三章 乙型脑炎病毒NS1蛋白与宿主互作蛋白相互作用的鉴定 | 第55-70页 |
| 1 试验材料 | 第55-56页 |
| 1.1 菌株和病毒株 | 第55页 |
| 1.2 细胞系、载体质粒 | 第55页 |
| 1.3 主要试剂 | 第55-56页 |
| 1.4 所需溶液及配制 | 第56页 |
| 1.5 主要仪器设备 | 第56页 |
| 2 实验方法 | 第56-62页 |
| 2.1 真核表达重组质粒的构建 | 第56-59页 |
| 2.2 真核表达质粒检测 | 第59-61页 |
| 2.3 免疫共沉淀验证 | 第61-62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-67页 |
| 3.1 真核表达质粒pEGFP-NS1的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第62-63页 |
| 3.2 宿主蛋白真核表达质粒的PCR鉴定和酶切鉴定结果 | 第63-65页 |
| 3.3 真核表达结果 | 第65页 |
| 3.4 免疫共沉淀结果 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-69页 |
| 5 小结 | 第69-70页 |
| 全文结论 | 第70-71页 |
| 论文创新点 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
