| 中文摘要 | 第12-15页 |
| ABSTRACT | 第15-18页 |
| 第一章 前言 | 第19-41页 |
| 1.1 几丁质 | 第19-23页 |
| 1.1.1 几丁质概述 | 第19-21页 |
| 1.1.2 昆虫与几丁质 | 第21-23页 |
| 1.2 几丁质酶 | 第23-29页 |
| 1.2.1 昆虫几丁质酶的结构特性 | 第23-24页 |
| 1.2.2 昆虫几丁质酶的分类与生物学功能 | 第24-26页 |
| 1.2.3 几丁质酶与人类健康 | 第26-27页 |
| 1.2.4 几丁质酶应用及展望 | 第27-29页 |
| 1.3 RNA干扰 | 第29-35页 |
| 1.3.1 RNAi机制 | 第29-31页 |
| 1.3.2 昆虫RNAi | 第31-33页 |
| 1.3.3 RNAi在害虫防治中的应用展望 | 第33-35页 |
| 1.4 转基因作物 | 第35-37页 |
| 1.4.1 转基因技术概述 | 第35-37页 |
| 1.4.2 RNAi介导的转基因抗虫研究进展 | 第37页 |
| 1.5 本文研究意义及主要内容 | 第37-41页 |
| 第二章 飞蝗几丁质酶家族基因的分子特性 | 第41-61页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第41-42页 |
| 2.1.1 供试飞蝗 | 第41页 |
| 2.1.2 实验试剂与仪器 | 第41-42页 |
| 2.2 研究方法 | 第42-47页 |
| 2.2.1 LmChts片段的获得与分析 | 第42-43页 |
| 2.2.2 LmChts cDNA全长序列获得 | 第43-45页 |
| 2.2.3 LmChts基因组结构分析 | 第45页 |
| 2.2.4 LmChts氨基酸推导与分析 | 第45-46页 |
| 2.2.5 昆虫和脊椎动物几丁质酶系统发育树的构建 | 第46-47页 |
| 2.2.6 LmChts功能域分析 | 第47页 |
| 2.3 实验结果 | 第47-58页 |
| 2.3.1 LmChts cDNA全长序列 | 第47-50页 |
| 2.3.2 LmChts氨基酸序列推导与分析 | 第50-53页 |
| 2.3.3 LmChts基因结构分析 | 第53页 |
| 2.3.4 昆虫与脊椎动物几丁质酶的系统发育树 | 第53-55页 |
| 2.3.5 LmChts功能域保守位点分析 | 第55-58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-61页 |
| 第三章 飞蝗几丁质酶家族基因的表达特性 | 第61-77页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第61-62页 |
| 3.1.1 飞蝗饲养 | 第61页 |
| 3.1.2 主要试剂与仪器 | 第61-62页 |
| 3.2 实验方法 | 第62-70页 |
| 3.2.1 飞蝗解剖 | 第62-63页 |
| 3.2.2 飞蝗不同天数卵的收集 | 第63页 |
| 3.2.3 dsLmEcR处理 | 第63-65页 |
| 3.2.4 药物处理 | 第65-66页 |
| 3.2.5 cDNA模板制备 | 第66-67页 |
| 3.2.6 RT-qPCR检测与数据分析 | 第67-70页 |
| 3.3 实验结果 | 第70-75页 |
| 3.3.1 LmChts不同组织部位的表达图谱 | 第70-71页 |
| 3.3.2 卵发育期LmChts的表达图谱 | 第71-72页 |
| 3.3.3 飞蝗若虫及成虫期LmChts的表达图谱及与激素调控的关系 | 第72-75页 |
| 3.3.4 飞蝗蜕皮相关几丁质酶基因筛选结果 | 第75页 |
| 3.4 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 飞蝗Ⅰ组几丁质酶基因的分子特性及功能研究 | 第77-89页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第77页 |
| 4.1.1 飞蝗 | 第77页 |
| 4.1.2 实验试剂与仪器 | 第77页 |
| 4.2 方法 | 第77-79页 |
| 4.2.1 LmCht5s基因组结构分析 | 第77页 |
| 4.2.2 昆虫Cht5s系统发育树的构建 | 第77-78页 |
| 4.2.3 Cht5s催化域比对分析 | 第78页 |
| 4.2.4 LmCht5s的表达特性研究 | 第78页 |
| 4.2.5 RNA干扰及表型观察 | 第78-79页 |
| 4.3 结果 | 第79-87页 |
| 4.3.1 LmCht5s分子特性的差异分析 | 第79-83页 |
| 4.3.2 LmCht5s组织分布及发育表达差异分析 | 第83-85页 |
| 4.3.3 LmCht5s干扰后表型及功能差异分析 | 第85-87页 |
| 4.4 讨论 | 第87-89页 |
| 第五章 飞蝗几丁质酶基因10的分子特性及功能研究 | 第89-101页 |
| 5.1 实验材料与试剂 | 第89-90页 |
| 5.1.1 飞蝗 | 第89页 |
| 5.1.2 实验试剂与仪器 | 第89-90页 |
| 5.2 方法 | 第90-93页 |
| 5.2.1 昆虫Cht10功能域分析 | 第90页 |
| 5.2.2 LmCht10若虫RNA干扰 | 第90-91页 |
| 5.2.3 几丁质酶酶活检测 | 第91-92页 |
| 5.2.4 体壁切片染色与观察 | 第92页 |
| 5.2.5 几丁质含量检测 | 第92-93页 |
| 5.2.6 LmCht10成虫RNA干扰 | 第93页 |
| 5.2.7 RNAi后卵期表达检测 | 第93页 |
| 5.3 结果 | 第93-99页 |
| 5.3.1 昆虫Cht10结构特征 | 第93-95页 |
| 5.3.2 LmCht10对飞蝗若虫表皮发育影响 | 第95-98页 |
| 5.3.3 LmCht10对飞蝗卵发育影响 | 第98-99页 |
| 5.4 讨论 | 第99-101页 |
| 第六章 转基因抗虫玉米的培育 | 第101-125页 |
| 6.1 材料与试剂 | 第101-102页 |
| 6.1.1 供试材料 | 第101-102页 |
| 6.1.2 主要试剂与仪器 | 第102页 |
| 6.2 研究方法 | 第102-111页 |
| 6.2.1 靶标基因筛选 | 第102-104页 |
| 6.2.2 靶标dsRNA筛选 | 第104-105页 |
| 6.2.3 转基因作物培育 | 第105-108页 |
| 6.2.4 转基因抗虫玉米喂食飞蝗及生物学测定 | 第108页 |
| 6.2.5 northern blot检测 | 第108-111页 |
| 6.3 结果 | 第111-121页 |
| 6.3.1 飞蝗靶标基因筛选 | 第111-112页 |
| 6.3.2 中华稻蝗OcCht10序列的获得及生物学功能研究 | 第112-114页 |
| 6.3.3 LmCht10 dsRNA筛选 | 第114-117页 |
| 6.3.4 转基因玉米的培育 | 第117-119页 |
| 6.3.5 转基因玉米对飞蝗发育的影响 | 第119-121页 |
| 6.4 讨论 | 第121-125页 |
| 全文总结 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-151页 |
| 博士期间研究成果 | 第151-154页 |
| 致谢 | 第154-155页 |
| 个人简况及联系方式 | 第155-157页 |
