| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-14页 |
| ·Proline Specific Endopeptidase（PSEases）简介 | 第10页 |
| ·脯氨酸的特异性 | 第10页 |
| ·PSEases具有丝氨酸蛋白酶家族成员的结构 | 第10-11页 |
| ·不同的PSEases的性质差异 | 第11页 |
| ·PSEases底物特异性 | 第11页 |
| ·PSEases的催化机制 | 第11-12页 |
| ·PSEases的功能应用 | 第12-13页 |
| ·研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第14-18页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·菌株 | 第14页 |
| ·载体 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-18页 |
| ·GB1-PSEase表达载体的构建 | 第15页 |
| ·GB1-PSEase的诱导表达 | 第15页 |
| ·GB1-PSEase的纯化和定量 | 第15-16页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE鉴定和Western-Blot鉴定 | 第16页 |
| ·重组蛋白的酶学性质研究 | 第16-17页 |
| ·GB1-PSEase稳定性 | 第17-18页 |
| 第3章 实验结果及分析 | 第18-29页 |
| ·基因psease及其表达载体pGBTNH-psease的鉴定结果 | 第18-19页 |
| ·GB1-PSEase的原核重组表达鉴定结果 | 第19-21页 |
| ·SDS-PAGE鉴定 | 第19-20页 |
| ·Western-Blot鉴定结果 | 第20-21页 |
| ·GB1-PSEase的酶学性质研究 | 第21-29页 |
| ·对硝基苯胺标准曲线 | 第21-22页 |
| ·酶活力检测结果 | 第22页 |
| ·GB1-PSEase催化底物Z-Gly-Pro-pNA的酶反应动力学参数测定结果 | 第22-23页 |
| ·GB1-PSEase催化底物Z-Gly-Pro-pNA的最适pH和pH稳定性测定结果 | 第23-24页 |
| ·GB1-PSEase催化底物Z-Gly-Pro-pNA的最适温度和温度稳定性测定结果 | 第24-26页 |
| ·金属离子对GB1-PSEase催化底物Z-Gly-Pro-pNA的酶反应活力影响检测结果 | 第26-27页 |
| ·GB1-PSEase的贮藏稳定性检测结果 | 第27-29页 |
| 第4章 讨论 | 第29-32页 |
| ·PSEases具有脯氨酰内肽酶家族成员的特征 | 第29-30页 |
| ·GB1-PSEase可通过镍离子亲和层析技术纯化 | 第30页 |
| ·GB1-PSEase的酶学特性 | 第30-31页 |
| ·金属离子对GB1-PSEase酶活力的影响 | 第31页 |
| ·GB1-PSE的贮藏稳定性 | 第31-32页 |
| 第5章 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 附录 | 第36-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
