| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 中英文缩写对照表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1 引言 | 第14页 |
| 2 肌肉形成概述 | 第14-17页 |
| 3 成肌细胞增殖、细胞凋亡以及细胞分化之间的关系 | 第17-19页 |
| ·成肌细胞增殖向细胞分化的转变的机制 | 第17-18页 |
| ·成肌细胞凋亡促进细胞分化 | 第18-19页 |
| 4 miRNAs对成肌细胞分化影响的研究进展 | 第19-24页 |
| ·miRNAs的形成和作用机制 | 第19-20页 |
| ·miRNAs参与调控成肌细胞的分化 | 第20-22页 |
| ·miR-449a的研究进展 | 第22-24页 |
| 5 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-49页 |
| 1 材料 | 第25-30页 |
| ·主要仪器与设备 | 第25-26页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
| ·常用化学试剂及其配制 | 第27-29页 |
| ·载体 | 第29页 |
| ·主要分子生物学软件及数据库 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-49页 |
| ·Hdac1 基因的 3'UTR的pmirGLO荧光报告载体的构建 | 第30-37页 |
| ·突变的Hdac1 基因 3'UTR的pmirGLO荧光报告载体的构建 | 第37-39页 |
| ·C2C12 细胞培养和转染 | 第39-40页 |
| ·荧光活性的检测 | 第40-41页 |
| ·总RNA和蛋白质的提取 | 第41-42页 |
| ·miR-449a的QPCR分析 | 第42-45页 |
| ·相关基因的QPCR分析 | 第45-46页 |
| ·Western Blot检测相关基因的蛋白 | 第46-49页 |
| 第三章 结果与分析 | 第49-72页 |
| 1 miR-449a的生物信息学分析结果 | 第49-50页 |
| ·miR-449a的保守性分析结果 | 第49页 |
| ·miR-449a靶基因的预测分析结果 | 第49-50页 |
| 2 miR-449a在C2C12 成肌细胞分化过程中表达量分析结果 | 第50-55页 |
| ·C2C12 成肌细胞的培养及分化 | 第50-51页 |
| ·C2C12 成肌细胞总RNA的提取 | 第51-52页 |
| ·C2C12 成肌细胞总RNA的反转录及检测分析结果 | 第52-53页 |
| ·对相关研究基因定量引物的检测分析结果 | 第53-55页 |
| ·miR-449a在C2C12 成肌细胞分化过程中表达分析结果 | 第55页 |
| 3 miR-449a潜在靶基因在C2C12 成肌细胞分化过程中表达的分析结果 | 第55-59页 |
| ·Hdac1 基因在C2C12 成肌细胞分化过程中表达分析结果 | 第55-56页 |
| ·Cdc25a基因在C2C12 成肌细胞分化过程中表达分析结果 | 第56-57页 |
| ·Cdk6 基因在C2C12 成肌细胞分化过程中表达分析结果 | 第57页 |
| ·Bcl2 基因在C2C12 成肌细胞分化过程中表达量变化分析结果 | 第57-58页 |
| ·E2F1 基因在C2C12 成肌细胞分化过程中表达分析结果 | 第58-59页 |
| 4 转染miR-449a mimics对C2C12 成肌细胞分化影响的分析结果 | 第59-69页 |
| ·miR-449a mimics转染效率的分析结果 | 第59页 |
| ·显微镜观察转染miR-449a mimics对C2C12 成肌细胞分化影响分析结果 | 第59-60页 |
| ·转染miR-449amimics对Hdac1 基因表达和荧光活性影响的分析结果 | 第60-62页 |
| ·转染miR-449a mimics对Cdc25a基因表达影响分析结果 | 第62-63页 |
| ·转染miR-449a mimics对Cdk6 基因表达影响的分析结果 | 第63-64页 |
| ·转染miR-449a mimics对Bcl2 基因表达影响的分析结果 | 第64-65页 |
| ·转染miR-449a mimics对E2F1 基因的表达分析结果 | 第65-66页 |
| ·转染miR-449a mimics对MHC基因蛋白表达影响的分析结果 | 第66-67页 |
| ·转染miR-449a mimics对MyoD和Myomaker基因表达影响的分析结果 | 第67-68页 |
| ·转染miR-449a mimics对Myog基因蛋白表达影响的分析结果 | 第68页 |
| ·转染miR-449a mimics对Caspase-3 和P21 基因表达影响的分析 | 第68-69页 |
| 5 转染miR-449a inhibitor对C2C12 成肌细胞分化影响的分析结果 | 第69-72页 |
| ·转染miR-449a inhibitor对Hdac1 基因表达影响的分析结果 | 第69页 |
| ·转染miR-449a inhibitor对Cdc25a基因表达影响的分析结果 | 第69-70页 |
| ·转染miR-449a inhibitor对Cdk6 基因表达影响的分析结果 | 第70-71页 |
| ·转染miR-449a inhibitor对Myomaker基因表达影响的分析结果 | 第71-72页 |
| 第四章 讨论 | 第72-78页 |
| 1 miR-449a的生物信息学分析 | 第72页 |
| 2 miR-449a在C2C12 成肌细胞分化过程中表达量分析 | 第72-73页 |
| 3 miR-449a潜在靶基因在C2C12 成肌细胞分化过程中表达的分析 | 第73-74页 |
| 4 转染miR-449a mimics对C2C12 成肌细胞分化影响的分析 | 第74-77页 |
| ·转染miR-449a mimics对Hdac1 基因表达和荧光活性影响的分析 | 第74页 |
| ·转染miR-449a mimics对Cdc25a、Cdk6 和E2F1 基因表达影响分析 | 第74-75页 |
| ·转染miR-449a mimics对Bcl2、Caspase-3 和P21 基因表达影响的分析 | 第75-76页 |
| ·转染miR-449a mimics对MHC、Myod、Myomaker和Myog基因表达影响的分析 | 第76-77页 |
| 5 转染miR-449a inhibitor对C2C12 成肌细胞分化影响的分析 | 第77-78页 |
| 第五章 小结 | 第78-81页 |
| 1 论文实验总结 | 第78-80页 |
| 2 下一步工作计划 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-92页 |
| 附录 载体pmirGLO-Hdac13'UTR序列 | 第92-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
