新型木糖利用酵母的评价及其遗传表达系统构建
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 缩略词表 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-25页 |
| ·木质纤维质资源综合利用 | 第10-13页 |
| ·木质纤维素资源概述 | 第10页 |
| ·木质纤维素组成 | 第10-12页 |
| ·木质纤维素的利用 | 第12-13页 |
| ·木糖代谢研究进展 | 第13-19页 |
| ·木糖代谢途径 | 第13-14页 |
| ·利用木糖的天然微生物 | 第14-15页 |
| ·木糖代谢基因工程菌 | 第15-16页 |
| ·影响酵母木糖发酵的因素 | 第16-18页 |
| ·木糖制备生物基化学品 | 第18-19页 |
| ·木糖酵母转化系统 | 第19-23页 |
| ·木糖酵母遗传编码特性 | 第19-21页 |
| ·基因操作工具的选择 | 第21-23页 |
| ·转化方法 | 第23页 |
| ·本课题研究目的与意义 | 第23-24页 |
| ·本课题研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第26页 |
| ·仪器设备 | 第26-27页 |
| ·引物 | 第27-28页 |
| ·菌种考察 | 第28-29页 |
| ·酵母生长曲线测定 | 第28页 |
| ·酵母耐受性测定 | 第28页 |
| ·同化碳源能力 | 第28页 |
| ·氮源利用能力 | 第28-29页 |
| ·酵母发酵特性测定 | 第29页 |
| ·酵母遗传表达系统构建 | 第29-32页 |
| ·抗生素敏感性测定 | 第29页 |
| ·酵母倍性测定 | 第29页 |
| ·酵母染色体的提取 | 第29-30页 |
| ·植物乳杆菌染色体提取 | 第30页 |
| ·目的片段PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·DNA片段纯化 | 第31页 |
| ·扩增片段与pMD19-T载体的连接 | 第31页 |
| ·制备和转化E.coli JM109 感受态细胞 | 第31页 |
| ·其他常规分子生物学操作 | 第31页 |
| ·基因定点突变 | 第31-32页 |
| ·酵母醋酸锂转化 | 第32页 |
| ·转化子菌落PCR验证 | 第32页 |
| ·遗传表达系统有效性验证 | 第32-33页 |
| ·绿色荧光蛋白的有效表达与检测 | 第32-33页 |
| ·代谢工程构建乳酸工程菌 | 第33页 |
| ·整合型质粒稳定性测定 | 第33页 |
| ·分析方法 | 第33-36页 |
| ·糖和代谢产物含量测定 | 第33页 |
| ·生物量的测定 | 第33-34页 |
| ·发酵动力学参数的计算 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-76页 |
| ·木糖利用酵母的生理代谢特性 | 第36-40页 |
| ·酵母耐受性测定 | 第36-38页 |
| ·生理生化特性测定 | 第38-40页 |
| ·小结 | 第40页 |
| ·木糖利用酵母的发酵特性 | 第40-55页 |
| ·生长曲线的测定 | 第41页 |
| ·温度对酵母木糖发酵的影响 | 第41-44页 |
| ·pH对酵母木糖发酵的影响 | 第44-46页 |
| ·初始木糖浓度对酵母发酵的影响 | 第46-49页 |
| ·供氧对木糖酵母发酵的影响 | 第49-51页 |
| ·混合糖对木糖酵母发酵的影响 | 第51-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| ·木糖酵母遗传表达系统构建 | 第55-71页 |
| ·待测酵母抗生素敏感性测定 | 第55-56页 |
| ·待测酵母倍性测定 | 第56-58页 |
| ·木糖酵母游离型遗传表达系统构建 | 第58-62页 |
| ·木糖酵母整合型遗传表达系统构建 | 第62-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| ·代谢工程构建乳酸生产工程菌 | 第71-76页 |
| ·目的基因ldh L的克隆及表达载体构建 | 第71页 |
| ·乳酸生产工程菌的构建及转化子验证 | 第71-73页 |
| ·透明圈法检测重组菌乳酸生产性能 | 第73页 |
| ·重组菌乳酸发酵性能的研究 | 第73-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 主要结论与展望 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第86页 |
