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紫红链霉菌(Streptomyces violaceoruber)磷脂酶A2基因在巴斯德毕赤酵母中的表达与应用研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 绪论第9-17页
   ·立题意义第9页
   ·国内外研究进展第9-15页
     ·磷脂酶A_2简介第9-10页
     ·磷脂酶A_2分类第10-11页
     ·紫红链霉菌磷脂酶A_2第11页
     ·巴斯德毕赤酵母表达系统第11-13页
     ·磷脂酶A_2的应用第13页
     ·磷脂酶A_2在植物油脱胶中的应用第13-15页
   ·本课题研究思路和内容第15-17页
     ·课题研究思路第15页
     ·课题研究内容第15-16页
     ·课题来源第16-17页
第二章 实验材料与方法第17-26页
   ·实验材料第17-19页
     ·菌株与质粒第17页
     ·培养基与溶液第17-18页
     ·主要试剂与仪器第18-19页
   ·实验方法第19-26页
     ·rPLA_2基因表达菌株的构建第19-20页
     ·PLA_2基因中糖基化位点突变菌株的构建第20-22页
     ·重组菌株的摇瓶发酵第22-23页
     ·rPLA_2酶学性质测定第23-24页
     ·rPLA_2脱胶优化研究第24-26页
第三章 结果与讨论第26-45页
   ·rPLA_2在毕赤酵母中的表达第26-32页
     ·GS115/pPIC9K-PLA_2基因工程菌的构建与筛选第26-28页
     ·PLA_2基因在毕赤酵母基因工程菌中的拷贝数鉴定第28-29页
     ·表达PLA_2基因的毕赤酵母基因工程菌的摇瓶发酵第29-32页
   ·糖基化位点的鉴定及其对rPLA_2基因表达的影响第32-38页
     ·PAS法鉴定rPLA_2糖基化第33页
     ·酶法鉴定rPLA_2糖基化第33-34页
     ·糖基化位点突变菌株的构建与筛选第34-35页
     ·N-糖基化对rPLA_2在毕赤酵母基因工程菌中分泌表达的影响第35-38页
   ·rPLA_2酶学性质研究第38-42页
     ·rPLA_2的粗提第38-39页
     ·温度对酶活力及稳定性的影响第39-40页
     ·pH对酶活力及稳定性的影响第40-41页
     ·Ca~(2+)对rPLA_2的影响第41页
     ·rPLA_2等电点测定第41-42页
     ·rPLA_2的底物特异性第42页
   ·rPLA_2在植物油脱胶中的应用研究第42-45页
     ·加水量对脱胶效果的影响第42-43页
     ·pH对脱胶效果的影响第43页
     ·反应温度对脱胶效果的影响第43-44页
     ·加酶量对脱胶效果的影响第44-45页
主要结论及展望第45-47页
 主要结论第45-46页
 展望第46-47页
参考文献第47-51页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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