摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-17页 |
·立题意义 | 第9页 |
·国内外研究进展 | 第9-15页 |
·磷脂酶A_2简介 | 第9-10页 |
·磷脂酶A_2分类 | 第10-11页 |
·紫红链霉菌磷脂酶A_2 | 第11页 |
·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第11-13页 |
·磷脂酶A_2的应用 | 第13页 |
·磷脂酶A_2在植物油脱胶中的应用 | 第13-15页 |
·本课题研究思路和内容 | 第15-17页 |
·课题研究思路 | 第15页 |
·课题研究内容 | 第15-16页 |
·课题来源 | 第16-17页 |
第二章 实验材料与方法 | 第17-26页 |
·实验材料 | 第17-19页 |
·菌株与质粒 | 第17页 |
·培养基与溶液 | 第17-18页 |
·主要试剂与仪器 | 第18-19页 |
·实验方法 | 第19-26页 |
·rPLA_2基因表达菌株的构建 | 第19-20页 |
·PLA_2基因中糖基化位点突变菌株的构建 | 第20-22页 |
·重组菌株的摇瓶发酵 | 第22-23页 |
·rPLA_2酶学性质测定 | 第23-24页 |
·rPLA_2脱胶优化研究 | 第24-26页 |
第三章 结果与讨论 | 第26-45页 |
·rPLA_2在毕赤酵母中的表达 | 第26-32页 |
·GS115/pPIC9K-PLA_2基因工程菌的构建与筛选 | 第26-28页 |
·PLA_2基因在毕赤酵母基因工程菌中的拷贝数鉴定 | 第28-29页 |
·表达PLA_2基因的毕赤酵母基因工程菌的摇瓶发酵 | 第29-32页 |
·糖基化位点的鉴定及其对rPLA_2基因表达的影响 | 第32-38页 |
·PAS法鉴定rPLA_2糖基化 | 第33页 |
·酶法鉴定rPLA_2糖基化 | 第33-34页 |
·糖基化位点突变菌株的构建与筛选 | 第34-35页 |
·N-糖基化对rPLA_2在毕赤酵母基因工程菌中分泌表达的影响 | 第35-38页 |
·rPLA_2酶学性质研究 | 第38-42页 |
·rPLA_2的粗提 | 第38-39页 |
·温度对酶活力及稳定性的影响 | 第39-40页 |
·pH对酶活力及稳定性的影响 | 第40-41页 |
·Ca~(2+)对rPLA_2的影响 | 第41页 |
·rPLA_2等电点测定 | 第41-42页 |
·rPLA_2的底物特异性 | 第42页 |
·rPLA_2在植物油脱胶中的应用研究 | 第42-45页 |
·加水量对脱胶效果的影响 | 第42-43页 |
·pH对脱胶效果的影响 | 第43页 |
·反应温度对脱胶效果的影响 | 第43-44页 |
·加酶量对脱胶效果的影响 | 第44-45页 |
主要结论及展望 | 第45-47页 |
主要结论 | 第45-46页 |
展望 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |