| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-30页 |
| 1 植物防御机制研究进展 | 第15-22页 |
| ·植物防御反应过程中3个主要的信号传导途径 | 第16-22页 |
| 2 植物胞外ATP研究进展 | 第22-25页 |
| ·植物胞外ATP的生理功能 | 第22-24页 |
| ·植物胞外ATP的信号传导机制 | 第24-25页 |
| 3 昆虫分泌物与诱导的植物防御反应 | 第25-30页 |
| ·鳞翅目昆虫幼虫口腔分泌物与唾液的区别 | 第26-27页 |
| ·鳞翅目昆虫幼虫唾液与诱导的植物防御 | 第27-29页 |
| ·鳞翅目昆虫幼虫唾液与寄主范围 | 第29-30页 |
| 前言 | 第30-32页 |
| 第二章 外源apyrase对番茄植株的影响 | 第32-45页 |
| 1 材料与方法 | 第32-41页 |
| ·供试植物 | 第32页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第32-33页 |
| ·番茄叶片胞外ATP的提取 | 第33页 |
| ·荧光计检测商业化apyrase的ATP水解活性 | 第33-34页 |
| ·商业化apyrase对番茄叶片的直观影响 | 第34页 |
| ·商业化apyrase对番茄防御反应相关基因表达水平的影响 | 第34-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-43页 |
| ·Apyrase对番茄叶片的直观影响 | 第41-42页 |
| ·植物防御反应相关基因表达水平检测结果 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 谷实夜蛾体内蛋白质ATP水解活性的鉴定 | 第45-51页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| ·供试昆虫 | 第46页 |
| ·供试植物 | 第46页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第46-47页 |
| ·ATP水解活性试验 | 第47-48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-49页 |
| ·谷实夜蛾唾液蛋白对番茄叶片胞外ATP的降解作用 | 第48页 |
| ·谷实夜蛾各组织内蛋白质的ATP水解活性 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 谷实夜蛾体内3个ATP水解酶基因克隆及表达 | 第51-82页 |
| 第一节 谷实夜蛾体内3个ATP水解酶基因克隆及序列分析 | 第51-78页 |
| 1 材料与方法 | 第52-57页 |
| ·供试昆虫 | 第52页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第52-53页 |
| ·总RNA的提取 | 第53-54页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第54-55页 |
| ·PCR反应 | 第55-56页 |
| ·PCR产物克隆与测序 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-76页 |
| ·谷实夜蛾3个ATP水解酶基因片段克隆及序列分析 | 第57-65页 |
| ·谷实夜蛾3个ATP水解酶基因全长克隆 | 第65-76页 |
| 3 讨论 | 第76-78页 |
| 第二节 谷实夜蛾体内3个ATP水解酶基因mRNA表达水平研究 | 第78-82页 |
| 1 材料与方法 | 第78-79页 |
| ·供试昆虫 | 第78页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第78页 |
| ·总RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第78页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-81页 |
| ·3个ATP水解酶在谷实夜蛾体内的表达水平分析 | 第79-80页 |
| ·饲料对谷实夜蛾唾液腺ATPase 13A1表达水平的影响 | 第80-81页 |
| 3 讨论 | 第81-82页 |
| 第五章 谷实夜蛾体内3个ATP水解酶基因原核表达及鉴定 | 第82-92页 |
| 1 材料与方法 | 第83-88页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第83-84页 |
| ·引物设计 | 第84-85页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第85-87页 |
| ·重组菌的培养及表达 | 第87页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第87-88页 |
| 2 结果与分析 | 第88-91页 |
| ·3个ATP水解酶基因片段的扩增 | 第88-89页 |
| ·双酶切反应效率鉴定 | 第89-90页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第90-91页 |
| 3 讨论 | 第91-92页 |
| 第六章 重组蛋白的分离纯化及活性鉴定 | 第92-102页 |
| 1 材料与方法 | 第92-97页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第92-93页 |
| ·目的基因的原核表达 | 第93页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第93-95页 |
| ·纯化后蛋白质的SDS-PAGE鉴定 | 第95页 |
| ·蛋白质的Western鉴定 | 第95-97页 |
| ·纯化后蛋白质ATP水解活性鉴定 | 第97页 |
| 2 结果与分析 | 第97-101页 |
| ·纯化后蛋白质的SDS-PAGE鉴定 | 第97-98页 |
| ·蛋白质的Western检测 | 第98-99页 |
| ·纯化后蛋白质的native-PAGE鉴定 | 第99页 |
| ·纯化后蛋白质的荧光反应鉴定 | 第99-101页 |
| 3 讨论 | 第101-102页 |
| 第七章 谷实夜蛾ATP水解酶对番茄植株的影响 | 第102-110页 |
| 第一节 谷实夜蛾ATP水解酶对番茄防御反应相关基因的影响 | 第102-107页 |
| 1 材料与方法 | 第102-104页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第102-103页 |
| ·番茄植株的处理 | 第103页 |
| ·引物设计 | 第103-104页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第104页 |
| 2 结果与分析 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105-107页 |
| 第二节 谷实夜蛾ATP水解酶对番茄腺毛产量的影响 | 第107-110页 |
| 1 材料与方法 | 第108页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第108页 |
| ·番茄植株的处理 | 第108页 |
| 2 结果与分析 | 第108-109页 |
| 3 讨论 | 第109-110页 |
| 主要结论、创新点与研究展望 | 第110-115页 |
| 参考文献 | 第115-135页 |
| 缩略词 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 在读期间发表论文目录及参加的科研项目 | 第137页 |
