中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
·前言 | 第12页 |
·植物启动子的研究进展 | 第12-18页 |
·启动子的基本概念 | 第12-13页 |
·植物启动子的基本特征 | 第13页 |
·植物启动子的分类 | 第13-16页 |
·诱导型启动子 | 第13-15页 |
·组织特异型启动子 | 第15页 |
·组成型启动子 | 第15-16页 |
·启动子分离克隆的方法 | 第16-17页 |
·启动子的研究方法 | 第17-18页 |
·启动子的稳定表达 | 第17页 |
·启动子的瞬时表达分析 | 第17-18页 |
·启动子缺失突变分析 | 第18页 |
·启动子的改造 | 第18页 |
·Bt 基因的研究进展 | 第18-19页 |
·大豆遗传转化的研究 | 第19-24页 |
·大豆的再生系统 | 第19-20页 |
·大豆遗传转化的方法及进展 | 第20-24页 |
·农杆菌介导法 | 第20-22页 |
·基因枪法 | 第22页 |
·花粉管通道法 | 第22-23页 |
·显微注射法 | 第23页 |
·电激法 | 第23页 |
·PEG 介导法 | 第23-24页 |
·原位转化法 | 第24页 |
·超声波辅助农杆菌转化方法 | 第24页 |
·植物抗逆基因工程研究进展 | 第24-26页 |
·植物耐盐机理 | 第24-25页 |
·植物对非生物胁迫的应答机制 | 第25页 |
·植物抗逆相关基因研究进展 | 第25-26页 |
·本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
第二章 玉米诱导性启动子的克隆及植物表达载体的构建 | 第27-43页 |
·材料 | 第27-28页 |
·植物材料 | 第27页 |
·菌株 | 第27页 |
·试剂 | 第27页 |
·仪器设备 | 第27页 |
·培养基和溶液的配制 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-35页 |
·目的基因的选择 | 第28-29页 |
·CTAB 法小量提取玉米基因组DNA | 第29页 |
·目的基因的克隆与回收 | 第29-31页 |
·目的片段与pMD18-T 载体的连接 | 第31页 |
·连接产物酶切鉴定 | 第31-33页 |
·电转化感受态细胞的制备(E. coli DH5α) | 第31-32页 |
·电转化E. coli DH5α感受态细胞 | 第32页 |
·质粒的提取 | 第32-33页 |
·阳性质粒酶切鉴定 | 第33页 |
·阳性克隆的序列测定 | 第33页 |
·植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
·目的基因片段获得与植物表达载体线性化 | 第33-34页 |
·连接 | 第34页 |
·连接产物的转化及阳性质粒的获得 | 第34页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第34-35页 |
·热激根癌农杆菌感受态细胞的制备(EHA105) | 第34-35页 |
·热激根癌农杆菌的转化 | 第35页 |
·农杆菌转化子的鉴定 | 第35页 |
·PCR 鉴定 | 第35页 |
·质粒酶切鉴定 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-41页 |
·STY 基因序列的克隆 | 第35-37页 |
·STY 启动子序列分析 | 第37-39页 |
·植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第三章 Bt 基因转化大豆的研究 | 第43-59页 |
·材料 | 第43-44页 |
·植物材料 | 第43页 |
·质粒与菌株 | 第43页 |
·试剂 | 第43页 |
·仪器 | 第43页 |
·培养基和溶液的配制 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-50页 |
·植物表达载体质粒转化根癌农杆菌 | 第44-45页 |
·转化根癌农杆菌的鉴定 | 第45-46页 |
·PCR 鉴定 | 第45页 |
·质粒酶切鉴定 | 第45-46页 |
·植物表达载体质粒转化发根农杆菌K599 | 第46页 |
·转化发根农杆菌K599 的验证 | 第46页 |
·根癌农杆菌介导转化大豆的研究 | 第46-48页 |
·大豆外植体的获得 | 第46-47页 |
·菌液的制备 | 第47页 |
·预培养、侵染和共培养时间以及抗性标记浓度的筛选 | 第47页 |
·子叶节的转化 | 第47-48页 |
·利用发根农杆菌K599 转化大豆的研究 | 第48-49页 |
·大豆的萌发 | 第48页 |
·生根的诱导 | 第48-49页 |
·根癌农杆菌转基因大豆的PCR 检测 | 第49页 |
·CTAB 法小量提取大豆DNA | 第49页 |
·PCR 检测 | 第49页 |
·发根农杆菌转基因根的检测 | 第49-50页 |
·转基因根的组织化学染色分析 | 第49页 |
·转基因根的离体培养 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-57页 |
·根癌农杆菌转化子鉴定 | 第50页 |
·发根农杆菌转化子的鉴定 | 第50-51页 |
·根癌农杆菌介导的转基因大豆的获得 | 第51-54页 |
·预培养时间的确定 | 第51-52页 |
·侵染和共培养时间的确定 | 第52页 |
·抗性标记浓度的筛选 | 第52-53页 |
·转基因大豆的获得 | 第53-54页 |
·发根农杆菌转化大豆 | 第54-55页 |
·根癌农杆菌转基因大豆植株初步检测 | 第55-56页 |
·发根农杆菌转基因根的GUS 组织化学染色分析 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
第四章 结论 | 第59-60页 |
·诱导性启动子的克隆及表达载体的构建 | 第59页 |
·大豆的遗传转化 | 第59页 |
·展望 | 第59-60页 |
作者简介及科研成果 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
致谢 | 第66页 |