| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-26页 |
| ·脂肪酶简介 | 第14页 |
| ·脂肪酶的结构特征 | 第14-15页 |
| ·脂肪酶的研究进展 | 第15-24页 |
| ·脂肪酶的筛选方法 | 第15页 |
| ·脂肪酶的发酵生产 | 第15-16页 |
| ·脂肪酶生产菌的诱变选育 | 第16-17页 |
| ·脂肪酶的分离纯化 | 第17-22页 |
| ·微生物脂肪酶的预分离 | 第18-19页 |
| ·层析纯化 | 第19-21页 |
| ·新型的分离纯化技术 | 第21-22页 |
| ·脂肪酶的应用 | 第22-24页 |
| ·脂肪酶在食品工业中的应用 | 第22页 |
| ·脂肪酶在纺织和去污工业中的应用 | 第22-23页 |
| ·脂肪酶在其它工业中的应用 | 第23-24页 |
| ·选题意义 | 第24页 |
| ·研究思路及技术路线 | 第24-26页 |
| 第二章 米曲霉WZ007的诱变选育 | 第26-38页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·实验菌株 | 第26页 |
| ·实验试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| ·诱变育种程序 | 第27页 |
| ·米曲霉WZ007的纯化 | 第27页 |
| ·米曲霉WZ007单孢子悬液的制备 | 第27-28页 |
| ·第一次~(137)Cs射线照射的诱变处理 | 第28页 |
| ·第二次~(137)Cs射线照射的诱变处理 | 第28页 |
| ·突变株的筛选 | 第28页 |
| ·突变株的分离纯化 | 第28-29页 |
| ·遗传稳定性实验 | 第29页 |
| ·生物量的测定 | 第29页 |
| ·脂肪酶活力测定 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-36页 |
| ·第一次~(137)Cs诱变结果 | 第30-33页 |
| ·~(137)Cs的致死效应 | 第30-32页 |
| ·诱变菌的筛选 | 第32-33页 |
| ·诱变菌株C500-14的稳定性试验 | 第33页 |
| ·第二次~(137)Cs诱变结果 | 第33-36页 |
| ·~(137)Cs的致死效应 | 第33-34页 |
| ·诱变菌的筛选 | 第34-36页 |
| ·诱变菌株Cs007和Cy002的稳定性试验 | 第36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 突变株Cs007产脂肪酶的发酵条件优化 | 第38-56页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·菌种 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·培养方法 | 第39页 |
| ·生物量的测定 | 第39页 |
| ·酶活力测定方法 | 第39-40页 |
| ·单因素实验确定对米曲霉产胞外和菌丝体结合脂肪酶的最适碳源和氮源 | 第40页 |
| ·菌体生长及产酶曲线 | 第40页 |
| ·表面活性剂对米曲霉胞外酶产生的影响 | 第40页 |
| ·Plackett-Burman实验 | 第40-41页 |
| ·爬坡实验 | 第41页 |
| ·Box-Behnken响应面分析 | 第41页 |
| ·单因子实验确定最适摇床转速和发酵时间 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-53页 |
| ·培养基碳源、氮源对米曲霉Cs007产胞外及菌丝体结合脂肪酶的研究 | 第41-45页 |
| ·培养基中碳源对产酶的影响 | 第41-43页 |
| ·培养基中氮源对产酶的影响 | 第43-44页 |
| ·米曲霉Cs007生长及产酶时间进程 | 第44-45页 |
| ·米曲霉Cs007产胞外脂肪酶条件响应面优化 | 第45-53页 |
| ·表面活性剂对发酵液脂肪酶合成的影响 | 第45-46页 |
| ·Plackett-Burrman实验设计及结果分析 | 第46-47页 |
| ·最陡爬坡实验确定主要因素的水平中心点 | 第47-48页 |
| ·Box-Behnken试验设计及结果 | 第48-49页 |
| ·二次回归拟合及方差分析 | 第49-50页 |
| ·响应因子水平的优化 | 第50-52页 |
| ·摇床转速和培养时间对产酶的影响 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-56页 |
| 第四章 米曲霉Cs007脂肪酶的分离纯化 | 第56-70页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·实验菌株 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·实验试剂 | 第56-57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·常用缓冲液 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-61页 |
| ·发酵培养 | 第57页 |
| ·酶活力的测定 | 第57页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第57-58页 |
| ·标准曲线的制作 | 第57-58页 |
| ·脂肪酶的分离纯化 | 第58-59页 |
| ·硫酸铵初级沉淀 | 第58页 |
| ·硫酸铵次级沉淀 | 第58-59页 |
| ·透析 | 第59页 |
| ·Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析 | 第59页 |
| ·Superdex G-75凝胶过滤 | 第59页 |
| ·SDS-丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)/丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第59-61页 |
| ·常用溶液的配制 | 第59-61页 |
| ·灌胶 | 第61页 |
| ·上样 | 第61页 |
| ·电泳 | 第61页 |
| ·染色和脱色 | 第61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-68页 |
| ·硫酸铵分级盐析 | 第61-62页 |
| ·硫酸铵初级盐析 | 第62页 |
| ·硫酸铵次级沉淀 | 第62页 |
| ·Q Sepharose Fast Flow层析 | 第62-63页 |
| ·Superdex G-75凝胶过滤 | 第63-65页 |
| ·Lip Ⅰ和Lip Ⅱ的纯度鉴定 | 第65-66页 |
| ·Lip Ⅰ和Lip Ⅱ的分子量测定 | 第66-67页 |
| ·脂肪酶的分离纯化结果 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-70页 |
| 第五章 Aspergillus oryzae CS007脂肪酶的酶学性质研究 | 第70-80页 |
| ·引言 | 第70页 |
| ·材料 | 第70-71页 |
| ·主要试剂 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-72页 |
| ·脂肪酶活力的测定 | 第71页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第71页 |
| ·脂肪酶酶学性质的研究 | 第71-72页 |
| ·温度对脂肪酶活力及稳定性的影响 | 第71页 |
| ·pH对脂肪酶活力及稳定性的影响 | 第71页 |
| ·有机溶剂对脂肪酶稳定性的影响 | 第71页 |
| ·金属离子及其他化学试剂对脂肪酶活力的影响 | 第71-72页 |
| ·脂肪酶的底物特异性 | 第72页 |
| ·酶动力学参数的测定 | 第72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-79页 |
| ·温度对脂肪酶活力及稳定性的影响 | 第72-74页 |
| ·pH对脂肪酶活力及稳定性的影响 | 第74-75页 |
| ·有机溶剂对脂肪酶稳定性的影响 | 第75-76页 |
| ·金属离子及其他化学物质对脂肪酶活力的影响 | 第76页 |
| ·脂肪酶的底物特异性 | 第76-78页 |
| ·酶对不同脂肪酸链长的pNP酯的底物特异性 | 第76-77页 |
| ·酶对不同脂肪酸链长乙酸酯及甘油酯的底物特异性 | 第77-78页 |
| ·动力学常数 | 第78-79页 |
| ·本章小结 | 第79-80页 |
| 第六章 结论与展望 | 第80-82页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| ·展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第90页 |
