缩略词表 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-16页 |
1 文献综述 | 第16-38页 |
·植物表皮毛形成的分子机理 | 第16-22页 |
·拟南芥表皮毛形成的分子机制 | 第16-18页 |
·棉花纤维形成的分子机制 | 第18-19页 |
·金鱼草、矮牵牛、烟草和番茄表皮毛调控机制的研究进展 | 第19-22页 |
·金鱼草、矮牵牛和烟草表皮毛调控机制的研究进展 | 第20-21页 |
·番茄表皮毛的研究进展 | 第21-22页 |
·植物表皮毛的防卫作用 | 第22-24页 |
·番茄基因的图位克隆技术 | 第24-28页 |
·图位克隆技术的发展 | 第24-26页 |
·图位克隆技术的细节 | 第26-28页 |
·遗传分离群体的构建 | 第26-27页 |
·目的基因的粗定位 | 第27页 |
·目的基因的精细定位 | 第27页 |
·目的基因的预测和功能互补实验 | 第27-28页 |
·图位克隆技术的应用 | 第28页 |
·HD-Zip类转录因子的研究 | 第28-31页 |
·植物周期蛋白和CDK的研究 | 第31-34页 |
·周期蛋白的研究 | 第31-32页 |
·CDK的研究 | 第32-33页 |
·细胞周期与表皮毛的关系 | 第33-34页 |
·植物基因功能的研究方法 | 第34-35页 |
·植物胚胎形成的调控 | 第35-38页 |
·胚胎早期形态建成的分子机制 | 第35-37页 |
·胚后期成熟的调控 | 第37-38页 |
·本研究的目的和意义 | 第38页 |
2 材料和方法 | 第38-51页 |
·番茄材料 | 第38-39页 |
·作图群体构建 | 第39页 |
·样品采集和DNA提取 | 第39页 |
·分子标记的获得 | 第39-40页 |
·SSR标记的开发 | 第39-40页 |
·STS标记和CAPS标记的开发 | 第40页 |
·遗传连锁分析和遗传图谱的绘制 | 第40页 |
·物理图谱的构建 | 第40-41页 |
·候选基因预测 | 第41页 |
·表达载体的构建和遗传转化 | 第41-43页 |
·超量表达载体的构建 | 第41页 |
·RNAi抑制表达载体的构建 | 第41-42页 |
·GFP融合表达载体的构建 | 第42页 |
·启动子载体的构建 | 第42页 |
·遗传转化 | 第42-43页 |
·转基因植株的阳性检测 | 第43-44页 |
·PCR检测 | 第43页 |
·Southern杂交 | 第43-44页 |
·目标蛋白的亚细胞定位分析 | 第44页 |
·基因的表达分析 | 第44-46页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第44-45页 |
·real-time RT-PCR | 第45页 |
·原位杂交 | 第45-46页 |
·GUS组织化学分析 | 第46页 |
·石蜡切片 | 第46-47页 |
·半薄切片 | 第47页 |
·扫描电子显微镜 | 第47-48页 |
·芯片杂交 | 第48-49页 |
·植物总RNA的提取 | 第48页 |
·样品RNA的荧光标记 | 第48页 |
·芯片的杂交 | 第48页 |
·芯片扫描、图像采集和数据分析 | 第48-49页 |
·差异表达基因的生物信息学分析 | 第49页 |
·3’RACE扩增 | 第49-50页 |
·酵母单杂交实验 | 第50页 |
·酵母转化载体的构建 | 第50页 |
·蛋白-DNA互作关系的鉴定 | 第50页 |
·双分子荧光互补实验 | 第50-51页 |
·酵母双杂交实验 | 第51页 |
3 实验结果和分析 | 第51-82页 |
·LA3186茸毛表型的遗传分析 | 第51页 |
·遗传群体的构建 | 第51-52页 |
·分子标记的开发 | 第52-54页 |
·Wo的粗定位 | 第54-55页 |
·Wo的精细定位 | 第55-56页 |
·Wo的候选基因确定 | 第56-57页 |
·候选基因表达载体的构建 | 第57-59页 |
·超量表达载体的获得 | 第57-59页 |
·RNAi表达载体的获得 | 第59页 |
·转基因植株的获得和阳性检测 | 第59-60页 |
·转基因植株的表型观察和表达量分析 | 第60-62页 |
·表型的观察 | 第60-61页 |
·表达量的分析 | 第61-62页 |
·Wo在不同组织的表达分析 | 第62-63页 |
·Wo启动子驱动GUS:YFP的表达分析 | 第63-65页 |
·启动子结构分析 | 第63页 |
·GUS和YFP活性的检测 | 第63-65页 |
·原位杂交分析 | 第65页 |
·Wo基因的亚细胞定位分析 | 第65-66页 |
·番茄表皮毛观察 | 第66-68页 |
·表皮毛形成初期的特点 | 第66-67页 |
·表皮茸毛类型的变化 | 第67-68页 |
·Wo的表达与胚胎败育的关系 | 第68-70页 |
·胚胎的细胞学观察 | 第68-70页 |
·Wo在胚胎发育过程中的表达变化 | 第70页 |
·Wo位点的等位基因 | 第70-71页 |
·Wo的同源基因搜索和比对分析 | 第71-73页 |
·芯片杂交结果分析 | 第73-75页 |
·差异表达基因的对比归类分析 | 第73-74页 |
·差异表达基因按照分子功能、生物学进程和细胞组分的分类 | 第74页 |
·差异表达基因参与的代谢途径分析 | 第74-75页 |
·差异表达基因中的转录因子分析 | 第75页 |
·差异表达基因中的激素相关因子分析 | 第75页 |
·差异表达细胞中的细胞周期相关因子分析 | 第75页 |
·Wo下游关键基因的确定 | 第75-76页 |
·U226950的生物信息学分析 | 第76页 |
·SlCycB2 3'RACE扩增 | 第76-77页 |
·SlCycB2的同源基因搜索和比对分析 | 第77页 |
·SlCycB2的表达分析 | 第77-79页 |
·SlCycB2在Wo不同等位突变体中的表达 | 第77-78页 |
·SlCycB2在不同组织中的表达分析 | 第78页 |
·SlCycB2在不同转基因植株中的表达分析 | 第78-79页 |
·SlCycB2的转基因分析 | 第79-80页 |
·SlCycB2干涉载体的构建和转基因植株的获得 | 第79页 |
·转基因植株的检测、表达量分析和表型观察 | 第79-80页 |
·Wo基因与SlCycB2基因的关系 | 第80-82页 |
·SlCycB2基因启动子分析 | 第80-81页 |
·Wo不具有与顺式元件CTAATTGTTTA的结合活性 | 第81-82页 |
·Wo与SlCycB2所编码的蛋白存在直接互作关系 | 第82页 |
4 讨论 | 第82-89页 |
·研究过程中的一些技术性问题 | 第82-84页 |
·利用ILs作亲本所构建的分离群体进行基因定位需要注意的问题 | 第84页 |
·Wo在番茄抗性育种中的应用前景分析 | 第84-85页 |
·Wo功能多效性的原因分析 | 第85页 |
·Wo不同等位基因之间功能差异的原因分析 | 第85-86页 |
·Wo调控表皮毛形成的机制分析 | 第86-87页 |
·Wo调控胚胎发育的机制分析 | 第87页 |
·关于后续工作的设想 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
附录A | 第110-121页 |
附录B | 第121页 |