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李离体再生体系的建立及愈伤组织分化相关microRNA分析

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略词第14-15页
第一章 文献综述第15-32页
   ·问题的提出第15-16页
   ·植物组织培养研究进展第16-25页
     ·植物组织培养研究概况第16-17页
     ·植物组织培养技术的应用第17-18页
       ·快速繁殖种苗第17页
       ·无病毒苗的培养第17-18页
       ·培养远缘杂种,提高育种效率第18页
       ·种质资源保存第18页
       ·植物基因工程第18页
     ·核果类果树组织培养第18-24页
       ·茎尖培养第19-20页
       ·叶片培养第20-21页
       ·胚培养第21-22页
       ·原生质体培养第22-23页
       ·其他培养方式第23-24页
     ·核果类果树组织培养存在的问题及解决方法第24-25页
   ·植物miRNA的研究进展第25-31页
     ·miRNA的发现第25-26页
     ·miRNA的概念和特点第26-27页
       ·概念第26页
       ·特点第26-27页
     ·miRNA的生物合成和作用机制第27-28页
       ·miRNA生物的合成和加工成熟过程第27页
       ·miRNA的作用机理第27-28页
     ·植物miRNA功能的研究进展第28-30页
       ·miRNA调控植物的生长发育第28-29页
       ·miRNA调节植物激素及信号转导第29页
       ·miRNA参与抗逆反应第29-30页
     ·miRNA的研究方法第30-31页
       ·miRNA的鉴定分离第30-31页
       ·miRNA靶基因的预测和验证第31页
   ·本研究的目的和意义第31-32页
第二章 中国李‘Nubiana’种胚胚轴和实生苗上胚轴离体再生体系的建立第32-44页
   ·前言第32页
   ·材料与方法第32-36页
     ·植物材料第32-33页
     ·技术路线第33页
     ·初代培养基的筛选第33-34页
     ·抗氧化剂对外植体褐化的影响第34页
     ·碳源的筛选第34-35页
     ·再生苗的继代增殖第35页
     ·生根培养第35-36页
     ·炼苗与移栽第36页
     ·培养条件第36页
     ·试验数据统计方法第36页
   ·结果与分析第36-41页
     ·初代培养基对‘Nubiana’李种胚胚轴和上胚轴离体再生的影响第36-37页
     ·抗氧化剂对外植体褐化的影响第37-38页
     ·不同碳源对外植体愈伤组织形成的影响第38-39页
     ·再生苗的继代培养第39-40页
     ·生根培养第40页
     ·炼苗与移栽第40-41页
   ·讨论第41-44页
     ·激素浓度配比对中国李‘Nubiana’种胚胚轴和实生苗上胚轴外植本不定芽再生的影响第41页
     ·外植体褐化现象及其克服第41-42页
     ·不同碳源对外植体愈伤组织形成的影响第42页
     ·不同激素配比对‘Nubiana’李再生苗的继代和增殖的影响第42-43页
     ·IBA对‘Nubiana’生根培养的影响第43页
     ·不同炼苗方法对‘Nubiana’炼苗与移栽的影响第43-44页
第三章 欧洲李‘Tardicots’叶柄和叶片离体再生体系的建立及再生苗与母株遗传稳定性RAPD分析第44-56页
   ·前言第44页
   ·材料与方法第44-49页
     ·植物材料第44页
     ·初代培养基的筛选第44-45页
     ·不同暗培养时间对外植体再生的影响第45页
     ·碳源的筛选第45-46页
     ·再生苗的继代和增殖第46页
     ·生根培养第46页
     ·炼苗与移栽第46页
     ·再生苗的随机扩增多态性DNA(RAPD)分析第46-48页
       ·DNA的提取与检测第46页
       ·引物设计第46-47页
       ·RAPD PCR反应体系第47页
       ·RAPD PCR反应程序第47-48页
       ·电泳检测第48页
     ·培养条件第48页
     ·试验数据统计方法第48-49页
   ·结果与分析第49-52页
     ·初代培养基对‘Tardicots’李叶柄与叶片外植体离体再生的影响第49-50页
     ·暗培养时间对欧洲李叶柄和叶片再生的影响第50页
     ·不同碳源对欧洲李叶柄和叶片再生的影响第50-51页
     ·Ad对‘Tardicots’李再生苗的继代和增殖的影响第51页
     ·生根培养第51-52页
     ·炼苗与移栽第52页
     ·再生苗的随机扩增多态性DNA(RAPD)分析第52页
   ·讨论第52-56页
     ·初代培养基对‘Tardicots’李叶柄和叶片外植体不定芽再生的影响第52-54页
     ·不同暗培养时间对‘Tardicots’李叶柄和叶片外植体再生的影响第54页
     ·不同碳源对‘Tardicots’李叶柄和叶片外植体愈伤组织诱导的影响第54页
     ·‘Tardicots’李再生苗的继代和增殖第54-55页
     ·IBA对‘Tardicots’李再生苗生根培养的影响第55页
     ·炼苗与移栽第55页
     ·再生苗与母株的随机扩增多态性DNA(RAPD)分析第55页
     ·‘Tardicots’李叶柄与叶片外植体初代培养中内生菌污染问题第55-56页
第四章 欧洲李‘Tardicots’叶柄和叶片愈伤组织差异分析第56-70页
   ·前言第56页
   ·材料与方法第56-59页
     ·植物材料第56-57页
     ·石蜡切片观察第57页
     ·Solexa高通量测序技术鉴定‘Tardicots’李叶柄和叶片愈伤组织中的miRNA第57页
     ·‘Tardicots’李叶柄和叶片愈伤组织小RNA文库构建和Solexa测序第57-59页
       ·‘Tardicots’李叶柄和叶片愈伤组织smallRNA分析第57-58页
       ·‘Tardicots’李叶柄和叶片愈伤组织miRNA靶基因的预测第58页
       ·‘Tardicots’李叶柄和叶片愈伤组织预测miRNA实验验证第58-59页
   ·结果与分析第59-68页
     ·石蜡切片观察第59-60页
     ·‘Tardicots’李叶柄与叶片愈伤组织总RNA的检测第60页
     ·‘Tardicots’李叶柄与叶片愈伤组织中smallRNA的种类分布及数量…第60-63页
     ·‘Tardicots’李叶柄和叶片愈伤组织smallRNA中unique序列的长度分布与表达丰度第63-64页
     ·‘Tardicots’李叶柄与叶片愈伤组织新miRNAs的预测第64-66页
     ·‘Tardicots’李叶柄与叶片愈伤组织中miRNAs靶基因的预测第66页
     ·‘Tardicots’李叶柄与叶片愈伤组织中miRNAs验证结果第66-68页
   ·讨论第68-70页
     ·‘Tardicots’李叶柄和叶片外植体不同培养时期石蜡切片观察第68页
     ·‘Tardicots’李叶柄和叶片外植体愈伤组织Solexa高通量测序第68-70页
第五章 根癌农杆菌介导的GFP基因转化欧洲李叶柄初探第70-75页
   ·前言第70页
   ·材料与方法第70-72页
     ·试验材料第70-71页
     ·试验方法第71-72页
       ·外植体材料对卡那霉素(Km)敏感性试验第71页
       ·外植体材料对头孢霉素(Cef)敏感性试验第71页
       ·农杆菌侵染液的制备第71页
       ·侵染与共培养第71-72页
       ·筛选培养、再生第72页
   ·结果与分析第72-73页
     ·外植体材料对Km敏感性试验第72-73页
     ·头孢霉素对‘Tardicots’李叶柄再生的影响第73页
     ·筛选培养、再生第73页
   ·讨论第73-75页
小结第75-77页
参考文献第77-89页
图版和图版说明第89-103页
致谢第103-104页
附录第104-110页

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