| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 综述 | 第8-24页 |
| ·蛋白质药物半衰期的问题 | 第8-9页 |
| ·延长蛋白质药物半衰期的方法和策略 | 第9-13页 |
| ·蛋白质融合技术 | 第9-10页 |
| ·化学修饰 | 第10-11页 |
| ·微囊化 | 第11-12页 |
| ·抗蛋白酶突变体 | 第12-13页 |
| ·糖基化 | 第13页 |
| ·人血清白蛋白作为延长蛋白质药物半衰期的载体蛋白 | 第13-15页 |
| ·噬菌体表面展示技术 | 第15-17页 |
| ·噬菌体表面展示技术的生物学基础 | 第17-21页 |
| ·状噬菌体 | 第17-18页 |
| ·M13噬菌体的组成与结构 | 第18-20页 |
| ·M13噬菌体的生长周期 | 第20-21页 |
| ·噬菌体肽库展示技术在药物研发方面的应用 | 第21-23页 |
| ·蛋白质间相互作用 | 第21页 |
| ·抗原表位的研究 | 第21-22页 |
| ·在肿瘤导向治疗中的应用 | 第22页 |
| ·药物筛选和开发研究 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-32页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·菌株与菌体 | 第24-25页 |
| ·实验药品 | 第25页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第25-26页 |
| ·主要仪器与设备 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-32页 |
| ·测定噬菌体滴度(常规M13方法) | 第26-27页 |
| ·淘选程序 | 第27-29页 |
| ·特异性结合肽的富集 | 第29页 |
| ·特异性噬菌体展示肽的筛选 | 第29-30页 |
| ·测序模板的快速纯化 | 第30页 |
| ·序列鉴定及同源性搜索 | 第30-32页 |
| 第三章 实验结果 | 第32-40页 |
| ·噬菌体展示肽库筛选技术平台的建立 | 第32-34页 |
| ·检测原库中噬菌体滴度 | 第32页 |
| ·阳性对照的淘选结果 | 第32-34页 |
| ·以人血清白蛋白为靶分子的淘选结果 | 第34-36页 |
| ·Gly-HCl(pH2.2)作为洗脱液进行洗脱 | 第34页 |
| ·用竞争性洗脱液进行洗脱 | 第34-36页 |
| ·HSA特异性结合肽的筛选和鉴定 | 第36页 |
| ·1~#特异性结合肽的鉴定 | 第36-40页 |
| ·用1~#噬菌体进行鉴定实验 | 第37页 |
| ·HSA特异性结合肽段的DNA序列测定 | 第37-40页 |
| 第四章 讨论 | 第40-47页 |
| ·噬菌体表面展示肽库的淘选标准(回收率与选择比) | 第40-41页 |
| ·噬菌体表面展示肽库淘选程序中洗脱方法的比较 | 第41-43页 |
| ·HSA黏附肽结构 | 第43-44页 |
| ·以黏附人血清白蛋白HSA为策略提高蛋白质药物的半衰期 | 第44-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |