| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-23页 |
| ·猪瘟和猪瘟病毒概述 | 第12-18页 |
| ·猪瘟概述 | 第12页 |
| ·猪瘟病毒粒子的结构和理化性质 | 第12-13页 |
| ·猪瘟病毒的基因组结构 | 第13-14页 |
| ·猪瘟病毒对细胞结构的侵入 | 第14页 |
| ·猪瘟病毒的编码蛋白及其功能 | 第14-16页 |
| ·猪瘟病毒的遗传分型 | 第16-17页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗概述 | 第17-18页 |
| ·猪瘟诊断方法概述 | 第18-23页 |
| ·免疫荧光试验 | 第18页 |
| ·病毒分离 | 第18页 |
| ·间接血凝试验 | 第18页 |
| ·病毒中和试验 | 第18-19页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第19-20页 |
| ·新城疫病毒强化法 | 第20页 |
| ·传统PCR检测方法 | 第20-21页 |
| ·荧光定量PCR检测方法 | 第21-23页 |
| 第二章 猪瘟兔化弱毒ST传代细胞源疫苗体外效检替代方法的建立和应用 | 第23-33页 |
| 摘要 | 第23页 |
| ·引言 | 第23-24页 |
| ·材料与方法 | 第24-25页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗 | 第24页 |
| ·细胞及试验动物 | 第24页 |
| ·试剂和仪器 | 第24页 |
| ·效检替代方法操作流程的建立 | 第24-25页 |
| ·效检替代方法对成品疫苗的检测 | 第25页 |
| ·兔体定型热法测定成品疫苗 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-29页 |
| ·猪瘟兔化弱毒湿毒系列稀释后接种细胞所收样品的检测 | 第25-26页 |
| ·效检替代方法对成品疫苗的检测 | 第26-28页 |
| ·兔体定型热法的效检结果与比较 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-33页 |
| 第三章 鉴别检测猪瘟兔化弱毒和野毒的RT-nestPCR检测方法的建立和应用 | 第33-47页 |
| 摘要 | 第33页 |
| ·引言 | 第33-34页 |
| ·材料与方法 | 第34-38页 |
| ·试验材料 | 第34-35页 |
| ·引物设计 | 第35-37页 |
| ·RT-nestPCR检测方法的建立 | 第37-38页 |
| ·RT-nestPCR方法检测临床样本和猪瘟兔化弱毒疫苗 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-45页 |
| ·优化后的外围和内围PCR反应体系和反应条件 | 第38-40页 |
| ·巢式PCR方法的敏感性和特异性测定 | 第40-41页 |
| ·临床样本和猪瘟疫苗的检测 | 第41-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 鉴别检测猪瘟兔化弱毒、猪瘟野毒和牛病毒性腹泻病毒的三重TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用 | 第47-75页 |
| 摘要 | 第47页 |
| ·引言 | 第47-48页 |
| ·材料与方法 | 第48-56页 |
| ·试验材料 | 第48-50页 |
| ·引物和探针设计 | 第50-54页 |
| ·病毒RNA的提取、反转录和支原体基因组DNA提取 | 第54页 |
| ·三重荧光定量RT-PCR标准品的制备 | 第54-55页 |
| ·三重荧光定量PCR反应条件的优化 | 第55页 |
| ·特异性试验 | 第55页 |
| ·敏感性试验 | 第55页 |
| ·重复性试验 | 第55-56页 |
| ·三重荧光定量RT-PCR检测临床组织样品和商品化猪瘟兔化弱毒疫苗 | 第56页 |
| ·三重荧光定量RT-PCR与其它检测方法的符合率试验 | 第56页 |
| ·病毒分离鉴定 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-72页 |
| ·溶解曲线的建立及RT-PCR扩增 | 第56-59页 |
| ·三重荧光定量RT-PCR反应条件的优化 | 第59-64页 |
| ·三重荧光定量RT-PCR特异性试验 | 第64-66页 |
| ·三重荧光定量PCR标准曲线的建立和敏感性试验 | 第66-68页 |
| ·三重荧光定量RT-PCR重复性试验 | 第68页 |
| ·三重荧光定量RT-PCR检测临床样品和商品化猪瘟兔化弱毒疫苗 | 第68-70页 |
| ·三重荧光定量RT-PCR与其它检测方法的符合率 | 第70-72页 |
| ·病毒分离鉴定结果 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| 第五章 分离自中国北方部分地区种猪场临床健康猪的猪瘟病毒E2基因序列的分析 | 第75-89页 |
| 摘要 | 第75页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·材料和方法 | 第76-80页 |
| ·临床样品、病毒检测和病毒分离 | 第76页 |
| ·RT-PCR扩增和序列测定 | 第76-77页 |
| ·E2基因序列分析 | 第77-80页 |
| ·结果 | 第80-86页 |
| ·临床样本的检测和病毒分离结果 | 第80-81页 |
| ·E2基因扩增和测序 | 第81-82页 |
| ·E2基因核酸序列分析 | 第82-85页 |
| ·E2基因氨基酸序列比对 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| 第六章 结论与下一步工作展望 | 第89-90页 |
| ·猪瘟兔化弱毒ST传代细胞源疫苗体外效检替代方法的建立 | 第89页 |
| ·鉴别检测猪瘟兔化弱毒和野毒的RT-nestPCR检测方法的建立和应用 | 第89页 |
| ·鉴别检测猪瘟兔化弱毒、猪瘟野毒和牛病毒性腹泻病毒的三重TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用 | 第89页 |
| ·分离自中国北方部分地区种猪场临床健康猪的猪瘟病毒E2基因序列的分析 | 第89页 |
| ·下一步工作展望 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 作者简历 | 第102页 |
