| 第1章 引言 | 第1-22页 |
| ·植物核糖体失活蛋白的研究进展 | 第7-13页 |
| ·分类、分布及基本理化性质 | 第7-10页 |
| ·核糖体失活蛋白的作用机制 | 第10-11页 |
| ·RNA N-糖苷酶活性 | 第10页 |
| ·多核苷酸:腺苷糖苷酶活性 | 第10-11页 |
| ·核糖体失活蛋白的生理和医学功能 | 第11-13页 |
| ·苦瓜的研究概况 | 第13-15页 |
| ·苦瓜凝集素 | 第13-14页 |
| ·苦瓜啶 | 第14页 |
| ·苦瓜素 | 第14-15页 |
| ·靶向治疗概况 | 第15-20页 |
| ·免疫毒素的基础研究 | 第17-18页 |
| ·毒素蛋白与抗体的偶联 | 第18-19页 |
| ·免疫毒素的临床研究 | 第19-20页 |
| ·本课题的提出及其目的 | 第20-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-38页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验流程 | 第22-23页 |
| ·串联离子交换色谱分离纯化核糖体失活蛋白α-MMC和β－MMC | 第23-24页 |
| ·离子交换色谱法原理 | 第23-24页 |
| ·核糖体失活蛋白的分离纯化 | 第24页 |
| ·SDS-PAGE法鉴定α-MMC和β－MMC的分子量 | 第24-28页 |
| ·N－末端氨基酸序列测定 | 第28-29页 |
| ·Folin-酚法测定蛋白质含量 | 第29-31页 |
| ·抗真菌活性的鉴定 | 第31页 |
| ·α-MMC和β－MMC对细胞抑制活性的检测 | 第31-33页 |
| ·结晶紫染色法 | 第31-32页 |
| ·α-MMC和β－MMC对细胞抑制活性的时间依赖关系 | 第32页 |
| ·α-MMC和β－MMC抑制细胞活性(IC50)的测定 | 第32-33页 |
| ·免疫毒素的构建 | 第33-37页 |
| ·双功能交联剂SPDP | 第33页 |
| ·反应步骤 | 第33-34页 |
| ·免疫毒素的构建 | 第34页 |
| ·反应混合物的分离 | 第34-35页 |
| ·凝胶成像扫描 | 第35-37页 |
| ·免疫毒素对细胞的靶向抑制活性的检测 | 第37-38页 |
| ·免疫毒素抑制细胞活性的时间依赖关系 | 第37页 |
| ·免疫毒素抑制细胞活性(IC50)的测定 | 第37-38页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第38-62页 |
| ·苦瓜籽核糖体失活蛋白α-MMC和β－MMC的分离纯化 | 第38-45页 |
| ·采用阳离子交换柱分离纯化α-MMC和β－MMC | 第38-42页 |
| ·离子交换柱的选择 | 第38-39页 |
| ·缓冲体系的选择 | 第39-40页 |
| ·缓冲液pH的选择 | 第40-41页 |
| ·洗脱梯度的选择 | 第41-42页 |
| ·阴离子交换柱的分离纯化 | 第42-43页 |
| ·串联色谱的分离纯化 | 第43-45页 |
| ·N-端氨基酸序列测定 | 第45页 |
| ·蛋白质回收率 | 第45-46页 |
| ·抗真菌活性 | 第46-47页 |
| ·α－MMC 和β－MMC对细胞抑制活性的表征 | 第47-53页 |
| ·α－MMC 和β－MMC抑制静脉内皮细胞Hunec的时间依赖关系 | 第47-49页 |
| ·α－MMC 和β－MMC抑制肝癌细胞Bel-7402的时间依赖关系 | 第49-50页 |
| ·α－MMC 和β－MMC抑制HELA的时间依赖关系 | 第50-51页 |
| ·α－MMC 和β－MMC抑制Hunec活性(IC50)的测定 | 第51-52页 |
| ·α－MMC 和β－MMC抑制Bel-7402活性(IC50)的测定 | 第52-53页 |
| ·α－MMC 和β－MMC抑制HELA活性(IC50)的测定 | 第53页 |
| ·免疫毒素的构建 | 第53-57页 |
| ·免疫毒素的交联 | 第54-56页 |
| ·免疫毒素的分离 | 第56页 |
| ·凝胶成像扫描 | 第56-57页 |
| ·免疫毒素对细胞抑制活性的检测 | 第57-62页 |
| ·免疫毒素抑制非靶正常细胞Hunec的时间依赖关系 | 第58-59页 |
| ·免疫毒素抑制靶细胞Bel-7402的时间依赖关系 | 第59页 |
| ·免疫毒素抑制非靶病变细胞HELA的时间依赖关系 | 第59-60页 |
| ·免疫毒素抑制靶细胞与非靶细胞活性(IC50)的测定 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简历 | 第71页 |
