摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
略语表 | 第12-13页 |
目录 | 第13-16页 |
第一章 绪论 | 第16-25页 |
·植物与病原物的互作 | 第16页 |
·植物抗病反应中的基因 | 第16-18页 |
·抗病基因 | 第16-17页 |
·防卫基因 | 第17页 |
·无毒基因 | 第17页 |
·番茄的抗病基因 | 第17-18页 |
·番茄花叶病毒 | 第18-21页 |
·番茄 | 第18-19页 |
·番茄花叶病毒的侵染特性 | 第19页 |
·番茄花叶病毒结构和基因组功能 | 第19-21页 |
·番茄花叶病毒的形态 | 第21页 |
·番茄花叶病毒主要功能蛋白研究 | 第21页 |
·侵染性克隆研究进展 | 第21-23页 |
·植物病毒侵染性克隆构建研究进展 | 第21-22页 |
·农杆菌介导的侵染性克隆 | 第22-23页 |
·番茄花叶病毒侵染性克隆构建研究进展 | 第23页 |
·本文的研究目的与意义 | 第23-25页 |
·研究的目的与意义 | 第23页 |
·研究内容 | 第23-25页 |
第二章 ToMV-N5 和 ToMV-S1 株系农杆菌侵染性克隆构建 | 第25-38页 |
·材料和方法 | 第25-26页 |
·毒源及寄主 | 第25页 |
·酶和试剂等 | 第25页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·侵染性克隆质粒分段构建过程 | 第26-32页 |
·病毒粒子的提取 | 第27页 |
·病毒粒子 RNA 的提取 | 第27页 |
·RT-PCR 扩增 | 第27-29页 |
·PCR 产物清洁回收 | 第29页 |
·PCR 产物和载体酶切 | 第29-30页 |
·载体与目的片段的连接 | 第30页 |
·重组质粒转化 | 第30页 |
·阳性克隆的筛选 | 第30-31页 |
·PCR 鉴定阳性克隆 | 第31页 |
·酶切鉴定阳性质粒 | 第31-32页 |
·重组质粒农杆菌转化与接种 | 第32-33页 |
·重组质粒农杆菌转化 | 第32-33页 |
·农杆菌浸润接种 | 第33页 |
·结果与分析 | 第33-37页 |
·ToMV-N5 和 ToMV-S1 全序列分段克隆结果 | 第33-35页 |
·pToMV-N5 和 pToMV-S1 农杆菌浸润接种结果 | 第35-37页 |
·小结与讨论 | 第37-38页 |
第三章 互换两株系 MP 和 CP 对 ToMV 在番茄上症状的影响 | 第38-44页 |
·材料和方法 | 第38-40页 |
·毒源、寄主 | 第38页 |
·酶和试剂等 | 第38页 |
·pToMV-N5MPCPS1和 pToMVS1MPCPN5嵌合重组病毒构建过程 | 第38-40页 |
·农杆菌转化与病毒接种 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-43页 |
·嵌合重组病毒构建分析 | 第40-41页 |
·农杆菌浸润接种结果分析 | 第41-43页 |
·小结与讨论 | 第43-44页 |
第四章 ToMV-N5 引起番茄系统性坏死与移动蛋白相关 | 第44-64页 |
·ToMV-N5 和 ToMV-S1 株系置换 MP 的嵌合病毒构建的材料与方法 | 第44-51页 |
·毒源与寄主 | 第44页 |
·酶和试剂等 | 第44页 |
·重叠 PCR 引物设计 | 第44-46页 |
·MP 和 CP 分段 PCR 扩增 | 第46页 |
·重叠 PCR 扩增 | 第46-47页 |
·嵌合病毒重组质粒的构建 | 第47-48页 |
·农杆菌转化与浸润接种 | 第48页 |
·总 RNA 提取 | 第48-49页 |
·Northern Blot 检测 | 第49-50页 |
·Western Blot 检测 | 第50-51页 |
·ToMV-N5 和 ToMV-S1 株系 MP 定点置换 aa 嵌合病毒构建的材料与方法 | 第51-54页 |
·毒源与寄主 | 第51页 |
·酶与试剂 | 第51页 |
·定点突变引物设计 | 第51-52页 |
·ToMV-N5 和 ToMV-S1 的 MPF1 MPF2 MPF3 MPF4 片段扩增 | 第52-53页 |
·重叠 PCR 扩增 | 第53页 |
·嵌合重组质粒构建 | 第53页 |
·农杆菌浸润接种 | 第53-54页 |
·结果与分析 | 第54-62页 |
·pToMV-N5MPS1/pToMV-S1MPN5重组质粒构建结果与分析 | 第54-56页 |
·pToMV-N5MPS1/ pToMV-S1MPN5浸润接种结果与分析 | 第56页 |
·Northern Blot 印迹结果与分析 | 第56-57页 |
·Western Blot 印迹结果与分析 | 第57页 |
·ToMV-N5 和 ToMV-S1 株系 MP 定点置换嵌合病毒重组质粒构建结果与分析 | 第57-60页 |
·农杆菌浸润接种结果与分析 | 第60-62页 |
·小结与讨论 | 第62-64页 |
总结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附录:重要溶液的配制 | 第70-72页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第72页 |