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ToMV引起番茄系统性坏死与移动蛋白相关

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
略语表第12-13页
目录第13-16页
第一章 绪论第16-25页
   ·植物与病原物的互作第16页
   ·植物抗病反应中的基因第16-18页
     ·抗病基因第16-17页
     ·防卫基因第17页
     ·无毒基因第17页
     ·番茄的抗病基因第17-18页
   ·番茄花叶病毒第18-21页
     ·番茄第18-19页
     ·番茄花叶病毒的侵染特性第19页
     ·番茄花叶病毒结构和基因组功能第19-21页
     ·番茄花叶病毒的形态第21页
     ·番茄花叶病毒主要功能蛋白研究第21页
   ·侵染性克隆研究进展第21-23页
     ·植物病毒侵染性克隆构建研究进展第21-22页
     ·农杆菌介导的侵染性克隆第22-23页
     ·番茄花叶病毒侵染性克隆构建研究进展第23页
   ·本文的研究目的与意义第23-25页
     ·研究的目的与意义第23页
     ·研究内容第23-25页
第二章 ToMV-N5 和 ToMV-S1 株系农杆菌侵染性克隆构建第25-38页
   ·材料和方法第25-26页
     ·毒源及寄主第25页
     ·酶和试剂等第25页
     ·引物设计第25-26页
   ·侵染性克隆质粒分段构建过程第26-32页
     ·病毒粒子的提取第27页
     ·病毒粒子 RNA 的提取第27页
     ·RT-PCR 扩增第27-29页
     ·PCR 产物清洁回收第29页
     ·PCR 产物和载体酶切第29-30页
     ·载体与目的片段的连接第30页
     ·重组质粒转化第30页
     ·阳性克隆的筛选第30-31页
     ·PCR 鉴定阳性克隆第31页
     ·酶切鉴定阳性质粒第31-32页
   ·重组质粒农杆菌转化与接种第32-33页
     ·重组质粒农杆菌转化第32-33页
     ·农杆菌浸润接种第33页
   ·结果与分析第33-37页
     ·ToMV-N5 和 ToMV-S1 全序列分段克隆结果第33-35页
     ·pToMV-N5 和 pToMV-S1 农杆菌浸润接种结果第35-37页
   ·小结与讨论第37-38页
第三章 互换两株系 MP 和 CP 对 ToMV 在番茄上症状的影响第38-44页
   ·材料和方法第38-40页
     ·毒源、寄主第38页
     ·酶和试剂等第38页
     ·pToMV-N5MPCPS1和 pToMVS1MPCPN5嵌合重组病毒构建过程第38-40页
     ·农杆菌转化与病毒接种第40页
   ·结果与分析第40-43页
     ·嵌合重组病毒构建分析第40-41页
     ·农杆菌浸润接种结果分析第41-43页
   ·小结与讨论第43-44页
第四章 ToMV-N5 引起番茄系统性坏死与移动蛋白相关第44-64页
   ·ToMV-N5 和 ToMV-S1 株系置换 MP 的嵌合病毒构建的材料与方法第44-51页
     ·毒源与寄主第44页
     ·酶和试剂等第44页
     ·重叠 PCR 引物设计第44-46页
     ·MP 和 CP 分段 PCR 扩增第46页
     ·重叠 PCR 扩增第46-47页
     ·嵌合病毒重组质粒的构建第47-48页
     ·农杆菌转化与浸润接种第48页
     ·总 RNA 提取第48-49页
     ·Northern Blot 检测第49-50页
     ·Western Blot 检测第50-51页
   ·ToMV-N5 和 ToMV-S1 株系 MP 定点置换 aa 嵌合病毒构建的材料与方法第51-54页
     ·毒源与寄主第51页
     ·酶与试剂第51页
     ·定点突变引物设计第51-52页
     ·ToMV-N5 和 ToMV-S1 的 MPF1 MPF2 MPF3 MPF4 片段扩增第52-53页
     ·重叠 PCR 扩增第53页
     ·嵌合重组质粒构建第53页
     ·农杆菌浸润接种第53-54页
   ·结果与分析第54-62页
     ·pToMV-N5MPS1/pToMV-S1MPN5重组质粒构建结果与分析第54-56页
     ·pToMV-N5MPS1/ pToMV-S1MPN5浸润接种结果与分析第56页
     ·Northern Blot 印迹结果与分析第56-57页
     ·Western Blot 印迹结果与分析第57页
     ·ToMV-N5 和 ToMV-S1 株系 MP 定点置换嵌合病毒重组质粒构建结果与分析第57-60页
     ·农杆菌浸润接种结果与分析第60-62页
   ·小结与讨论第62-64页
总结第64-65页
参考文献第65-69页
致谢第69-70页
附录:重要溶液的配制第70-72页
攻读硕士学位期间的研究成果第72页

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