| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-21页 |
| ·月季是世界第一大切花 | 第9页 |
| ·乙烯是影响月季花朵开放的重要因素 | 第9-11页 |
| ·月季花朵的开放依赖于花瓣细胞扩展 | 第11-16页 |
| ·乙烯参与了细胞扩展的调节 | 第16页 |
| ·转录因子是乙烯作用机制中不可或缺的组分 | 第16-17页 |
| ·DELLA蛋白可能参与了乙烯调节的月季花朵开放 | 第17-19页 |
| ·研究思路 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 RhGAI1基因的克隆和蛋白的生化特性分析 | 第21-36页 |
| ·材料与方法 | 第21-26页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌类材料及载体 | 第21页 |
| ·常用培养基 | 第21-22页 |
| ·常用试剂 | 第22-23页 |
| ·基因枪轰击和观察 | 第23页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·酵母转化 | 第24页 |
| ·滤纸染色实验 | 第24页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性的定量测定 | 第24-25页 |
| ·基因的克隆和载体构建 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-35页 |
| ·RhGAI1基因的克隆 | 第26-30页 |
| ·RhGAI1蛋白的亚细胞定位 | 第30-32页 |
| ·RhGAI1蛋白的转录激活活性分析 | 第32-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 乙烯对RhGAI1基因的转录调节分析 | 第36-61页 |
| ·材料与方法 | 第36-51页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·菌类材料及载体 | 第36页 |
| ·实验仪器 | 第36-37页 |
| ·酶及试剂 | 第37页 |
| ·常用培养基 | 第37页 |
| ·常用试剂 | 第37-40页 |
| ·月季基因组DNA提取 | 第40页 |
| ·月季花瓣RNA提取 | 第40-41页 |
| ·拟南芥DNA提取 | 第41页 |
| ·拟南芥RNA提取 | 第41页 |
| ·反转录 | 第41-42页 |
| ·月季基因克隆 | 第42-45页 |
| ·回收 | 第45页 |
| ·连接 | 第45-46页 |
| ·转化 | 第46页 |
| ·质粒提取 | 第46页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第46-47页 |
| ·拟南芥遗传转化 | 第47页 |
| ·原生质体的提取和转化 | 第47-48页 |
| ·原生质体GUS提取和活性测定 | 第48页 |
| ·原生质体蛋白含量测定 | 第48-49页 |
| ·载体构建 | 第49-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-60页 |
| ·乙烯和1-MCP处理后RhGAI1基因的表达特性 | 第51-52页 |
| ·RhETRs沉默后RhGAI1基因的表达特性 | 第52-53页 |
| ·拟南芥ein2突变体中RhGAI1启动子活性分析 | 第53-54页 |
| ·RhEIN3-3对RhGAI1启动子的转录激活分析 | 第54-57页 |
| ·RhGAI1是RhEIN3-3的一个直接下游基因 | 第57-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 第四章 RhGAI1对花瓣扩展的调节及其机理分析 | 第61-83页 |
| ·材料与方法 | 第61-73页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·基因沉默实验相关试剂 | 第61-62页 |
| ·月季基因启动子克隆 | 第62-65页 |
| ·重叠PCR(Overlap PCR) | 第65页 |
| ·月季花瓣VIGS | 第65-66页 |
| ·花瓣表皮细胞固定和观察 | 第66页 |
| ·烟草叶片瞬时表达 | 第66-67页 |
| ·蛋白原核表达和纯化 | 第67-68页 |
| ·凝胶阻滞实验(Electrophoresis Mobility Shift Assay,EMSA) | 第68-70页 |
| ·载体构建和表达检测 | 第70-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-82页 |
| ·RhGAI1在拟南芥中的过表达分析 | 第73-74页 |
| ·RhGAI1在月季花瓣中的沉默分析 | 第74-75页 |
| ·RhGAI1沉默花瓣中下游基因的表达分析 | 第75-76页 |
| ·RhGAI1对部分下游基因的转录激活分析 | 第76-78页 |
| ·RhCesA2是RhGAI1的一个直接下游基因 | 第78-80页 |
| ·RhGAI1其他可能的直接下游基因 | 第80-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| 第五章 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 个人简历 | 第92页 |
