| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-36页 |
| ·乳腺癌及其药物治疗 | 第15-20页 |
| ·小干扰RNA 药物研究及其和化疗药物联合治疗癌症 | 第20-24页 |
| ·肿瘤干细胞与乳腺癌治疗 | 第24-27页 |
| ·本课题的选题目的及主要研究内容 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-36页 |
| 第二章 生物可降解聚合物纳米胶束的制备及其输送siRNA 沉默靶基因表达的研究 | 第36-52页 |
| ·引言 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·主要材料 | 第37页 |
| ·细胞株 | 第37页 |
| ·主要药品及试剂 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-42页 |
| ·胶束纳米颗粒（MNPs）的制备 | 第38页 |
| ·胶束纳米颗粒的粒径及表面电势的表征 | 第38页 |
| ·胶束纳米颗粒的形貌观察 | 第38页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳实验检验胶束纳米颗粒结合siRNA 的能力 | 第38-39页 |
| ·胶束纳米颗粒的粒径及表面电势 | 第39页 |
| ·细胞传代培养 | 第39页 |
| ·MTT 实验检测胶束纳米颗粒的生物相容性 | 第39-40页 |
| ·MTT 实验检测胶束纳米颗粒与siRNA 形成的复合物的生物相容性 | 第40页 |
| ·MTT 实验检测Lipofectamine~(TM) 2000 与siRNA 形成的复合物的生物相容性 | 第40页 |
| ·细胞内吞实验 | 第40页 |
| ·流式细胞术检测胶束纳米颗粒输送FAM-siRNA 进入细胞的能力 | 第40页 |
| ·瞬时表达GFP/luciferase 的HEK 293 细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·荧光显微镜观察MNPs 输运GFP siRNA 对细胞内GFP 表达水平的影响 | 第41页 |
| ·流式细胞术检测MNPs 输运GFP siRNA 对细胞内GFP 表达水平的影响 | 第41页 |
| ·流式细胞术检测MNPs 输运luciferase siRNA 对细胞内luciferase 表达水平的作用 | 第41-42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-49页 |
| ·胶束纳米颗粒能够有效结合siRNA | 第42-44页 |
| ·胶束纳米颗粒不显示明显的细胞毒性 | 第44-46页 |
| ·胶束纳米颗粒能够输送siRNA 进入细胞 | 第46-47页 |
| ·胶束纳米颗粒输送siRNA 显著下调细胞中靶基因的表达 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 第三章 聚合物胶束纳米粒同步输送小干扰 RNA 和化疗药物治疗乳腺癌的协同增效作用研究 | 第52-86页 |
| ·引言 | 第52-53页 |
| ·实验材料 | 第53-55页 |
| ·主要材料 | 第53页 |
| ·实验动物 | 第53页 |
| ·细胞株 | 第53-54页 |
| ·主要药品及试剂 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-61页 |
| ·包载紫杉醇的胶束纳米颗粒的制备 | 第55页 |
| ·HPLC 检测胶束纳米颗粒包载紫杉醇的效率 | 第55页 |
| ·载药胶束纳米颗粒与siRNA 形成复合物的稳定性检测 | 第55页 |
| ·载药胶束纳米颗粒与siRNA 形成复合物的形貌观察 | 第55-56页 |
| ·载药胶束纳米颗粒与siRNA 形成复合物的粒径分析 | 第56页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察Rho-paclitaxel 和FAM-siRNA 在肿瘤细胞中的共定位 | 第56页 |
| ·流式细胞术检测Rho-paclitaxel 和FAM-siRNA 在肿瘤细胞中的共定位 | 第56页 |
| ·Real-time PCR 检测micelleplexsiPlk1降低乳腺癌肿瘤细胞中的Plk1 mRNA 的表达水平 | 第56-57页 |
| ·Western blot 检测micelleplexsiPlk1降低乳腺癌肿瘤细胞中的Plk1 蛋白的表达水平 | 第57页 |
| ·3~H-TdR 掺入法检测paclitaxelmicelleplexsiPlk1对MDA-MB-4355 细胞的增殖的影响 | 第57-58页 |
| ·检测(paclitaxel)~micelleplexsiPlk1诱导MDA-MB-4355 细胞产生凋亡 | 第58页 |
| ·MDA-MB-435s 原位肿瘤模型建立 | 第58页 |
| ·Rho-paclitaxelmicelleplexFAM-siRNA在荷瘤裸鼠体内的分布 | 第58页 |
| ·流式细胞仪术检测Rho-paclitaxel 和FAM-siRNA 在体内肿瘤细胞中的共定位 | 第58-59页 |
| ·Rho-paclitaxel 和FAM-siRNA 在体内肿瘤细胞中的共定位 | 第59页 |
| ·Plk1 siRNA 原位杂交检测siPlk1 在肿瘤细胞中的分布 | 第59页 |
| ·乳腺癌原位肿瘤的治疗及肿瘤体积测量 | 第59-60页 |
| ·用Taxol 和paclitaxelmicelleplexsiPlk1治疗乳腺癌原位肿瘤 | 第60页 |
| ·不同载药量的paclitaxelmicelleplexsiNonsense治疗乳腺癌原位肿瘤 | 第60页 |
| ·肿瘤组织中的Plk1、Pro-Caspase-3 和Pro-Caspase-9 表达水平检测 | 第60页 |
| ·TUNEL 染色检测乳腺癌原位肿瘤细胞凋亡 | 第60页 |
| ·Ki-67 染色检测乳腺癌原位肿瘤细胞增殖 | 第60-61页 |
| ·酶联免疫吸附实验（ELISA）检测荷瘤裸鼠血清中的免疫因子表达 | 第61页 |
| ·检测荷瘤裸鼠血清中心脏、肝脏和肾脏的功能因子表达 | 第61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-81页 |
| ·mPEG45-PCL80-PPEEA10聚合物胶束纳米粒能同时携载siRNA 和紫杉醇 | 第61-64页 |
| ·Rho-paclitaxelmicelleplexFAM-siRNA将Rhodamine标记的紫杉醇与FAM标记的同步输送到肿瘤细胞 | 第64-65页 |
| ·paclitaxelMicelleplexsiPlk1同步输运paclitaxel与siPlk1显著降低乳腺癌细胞的增殖，并体现协同增效作用 | 第65-69页 |
| ·Rho-paclitaxelmicelleplexFAM-siRNA将紫杉醇与siRNA 同时输送到肿瘤组织，并同步进入肿瘤细胞 | 第69-73页 |
| ·paclitaxelMicelleplexsiPlk1 同时输送紫杉醇与siPlk1 显著抑制乳腺癌的生长，体现协同增效作用 | 第73-79页 |
| ·paclitaxelMicelleplexsiPlk1具有良好的生物安全性 | 第79-81页 |
| ·本章小结 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 第四章 键合阿霉素的金纳米粒用于乳腺癌干细胞治疗的研究 | 第86-112页 |
| ·引言 | 第86-88页 |
| ·实验材料 | 第88-89页 |
| ·主要材料 | 第88页 |
| ·实验动物 | 第88页 |
| ·细胞株 | 第88页 |
| ·主要药品及试剂 | 第88-89页 |
| ·实验方法 | 第89-93页 |
| ·球囊细胞培养 | 第89页 |
| ·流式细胞术检测乳腺癌贴壁细胞和球囊细胞中CD44+CD24-细胞的比例 | 第89-90页 |
| ·流式细胞术检测乳腺癌贴壁细胞和球囊细胞中ALDHhi细胞的比例 | 第90页 |
| ·MTT 法检测乳腺癌贴壁细胞和球囊细胞的耐药性 | 第90页 |
| ·流式细胞术检测乳腺癌贴壁细胞和球囊细胞对阿霉素的摄取 | 第90-91页 |
| ·流式细胞术检测乳腺癌干细胞对阿霉素的摄取 | 第91页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察药物处理的乳腺癌干细胞 | 第91页 |
| ·球囊形成率实验检测乳腺癌干细胞的干性 | 第91页 |
| ·Soft agar 实验检测乳腺癌干细胞的干性 | 第91-92页 |
| ·乳腺癌原位肿瘤模型的建立 | 第92页 |
| ·小动物成像检测药物在荷瘤鼠体内的定位 | 第92页 |
| ·流式细胞术检测荷瘤鼠肿瘤中肿瘤干细胞对阿霉素的摄取 | 第92-93页 |
| ·乳腺癌原位肿瘤的治疗及肿瘤体积测量 | 第93页 |
| ·流式细胞术检测乳腺癌中肿瘤干细胞的比例 | 第93页 |
| ·肿瘤组织切片的H&E 染色、TUNEL 染色、Ki-67 染色 | 第93页 |
| ·结果与讨论 | 第93-107页 |
| ·乳腺癌干细胞能通过球囊培养方式富集 | 第93-96页 |
| ·DOX-Hyd@ AuNP 更有效将阿霉素输送到乳腺癌干细胞 | 第96-100页 |
| ·DOX-Hyd@ AuNP 处理影响乳腺癌干细胞的干性 | 第100-102页 |
| ·DOX-Hyd@ AuNP 更有效抑制肿瘤生长，但不增加乳腺癌中肿瘤干细胞的比例 | 第102-107页 |
| ·本章小结 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-112页 |
| 附录一 常规试剂 | 第112-113页 |
| 附录二 主要溶液配制 | 第113-116页 |
| 附录三 主要仪器设备 | 第116-118页 |
| 附录四 常规实验方法 | 第118-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第126-129页 |
