| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| 1 细胞质雄性不育的分子机理研究 | 第15-19页 |
| ·线粒体基因组与CMS的关系 | 第15-18页 |
| ·与细胞质雄性不育有关的线粒体基因或片段 | 第15-17页 |
| ·线粒体蛋白与细胞质雄性不育 | 第17-18页 |
| ·叶绿体基因组与CMS的关系 | 第18页 |
| ·核质互作的结果导致CMS的发生 | 第18-19页 |
| 2 辣椒细胞质雄性不育的研究 | 第19-22页 |
| ·辣椒CMS的分子生物学研究 | 第19-21页 |
| ·辣椒CMS在生产上的应用 | 第21页 |
| ·辣椒CMS应用展望 | 第21-22页 |
| 3 实时荧光定量PCR技术 | 第22-25页 |
| ·两个重要概念 | 第22页 |
| ·荧光阈值(threshold) | 第22页 |
| ·Ct值 | 第22页 |
| ·作用原理 | 第22-23页 |
| ·SYBR Green I荧光染料技术原理 | 第23页 |
| ·TaqMan探针技术原理 | 第23页 |
| ·实时荧光定量基因表达方法 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-31页 |
| 第二章 辣椒AFLP技术体系的建立与优化 | 第31-39页 |
| 摘要 | 第31页 |
| ABSTRACT | 第31-32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-34页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·酶切和连接 | 第33页 |
| ·预扩增 | 第33页 |
| ·选择性扩增 | 第33页 |
| ·PAGE和银染 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·影响辣椒AFLP分析的关键因素 | 第34-35页 |
| ·DNA提取方法 | 第34页 |
| ·酶切与连接 | 第34-35页 |
| ·选择性扩增 | 第35页 |
| ·优化后的辣椒AFLP技术体系 | 第35-37页 |
| ·酶切连接体系 | 第35-36页 |
| ·预扩增体系 | 第36页 |
| ·选择性扩增体系 | 第36页 |
| ·PAGE和银染 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-39页 |
| 第三章 辣椒细胞质雄性不育基因的AFLP分析 | 第39-51页 |
| 摘要 | 第39页 |
| ABSTRACT | 第39-41页 |
| 1 材料和方法 | 第41-43页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·AFLP分析 | 第41-42页 |
| ·辣椒叶片DNA的提取 | 第41页 |
| ·辣椒基因组AFLP分析 | 第41-42页 |
| ·特异条带的回收、克隆和测序 | 第42-43页 |
| ·特异条带的回收 | 第42页 |
| ·特异条带的克隆 | 第42-43页 |
| ·特异条带的测序 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-47页 |
| ·AFLP引物在不育系21A及其保持系21B间的多态性 | 第43-44页 |
| ·不育系21A及其保持系21B基因组DNA的AFLP标记筛选 | 第44-45页 |
| ·特异条带的克隆、测序结果及序列分析 | 第45-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第四章 用实时荧光定量PCR技术选择辣椒内参基因 | 第51-67页 |
| 摘要 | 第51页 |
| ABSTRACT | 第51-53页 |
| 1 材料和方法 | 第53-56页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·非生物胁迫处理 | 第53页 |
| ·激素处理 | 第53页 |
| ·不同组织 | 第53页 |
| ·总RNA提取和cDNA第一链合成 | 第53-55页 |
| ·总RNA提取 | 第54页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第54-55页 |
| ·引物设计、qRT-PCR表达及数据分析 | 第55-56页 |
| ·qRT-PCR内参基因引物设计 | 第55-56页 |
| ·qRT-PCR表达分析 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-62页 |
| ·内参基因的表达水平 | 第56-59页 |
| ·内参基因的选择 | 第59-62页 |
| ·geNorm分析 | 第59-61页 |
| ·NormFinder分析 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 第五章 辣椒细胞质雄性不育相关基因的克隆与表达分析 | 第67-79页 |
| 摘要 | 第67页 |
| ABSTRACT | 第67-69页 |
| 1 材料与方法 | 第69-71页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-71页 |
| ·DNA的提取 | 第69页 |
| ·辣椒细胞质雄性不育相关基因片段的克隆及序列分析 | 第69-70页 |
| ·总RNA提取和cDNA第一链合成 | 第70页 |
| ·qRT-PCR参照基因引物设计及相对标准曲线的建立 | 第70页 |
| ·qRT-PCR表达分析 | 第70-71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-75页 |
| ·辣椒细胞质雄性不育相关基因片段的克隆及序列分析 | 第71-72页 |
| ·总RNA提取 | 第72-73页 |
| ·相对定量标准曲线的构建 | 第73-74页 |
| ·CMS292的qRT-PCR表达分析 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 全文结论 | 第79-81页 |
| 创新之处 | 第81-83页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
