苦荞蔗糖合酶的原核表达及纯化

摘要	第1-6页
ABSTRACT	第6-11页
第一章 文献综述	第11-21页
·植物中与蔗糖代谢有关的酶	第11-12页
·蔗糖概述	第11页
·蔗糖代谢相关的酶	第11-12页
·蔗糖合酶概况	第12-15页
·蔗糖合酶的基本性质	第12-13页
·蔗糖合酶的生物学功能	第13-14页
·蔗糖合酶基因的表达调控	第14-15页
·蔗糖合酶的转基因研究	第15页
·包涵体纯化技术	第15-19页
·包涵体形成的原因	第15-16页
·包涵体的破碎洗涤及溶解	第16-17页
·包涵体的复性	第17-19页
·选题的目的及意义	第19-21页
·选题的目的、意义	第19-20页
·主要研究内容	第20-21页
第二章 苦荞蔗糖合酶基因序列的生物信息学分析	第21-26页
·实验材料	第21页
·实验方法	第21页
·苦荞蔗糖合酶基因的序列分析	第21页
·苦荞蔗糖合酶的功能及结构预测	第21页
·苦荞蔗糖合酶系统发育树的构建	第21页
·结果与分析	第21-25页
·苦荞蔗糖合酶基因序列的分析	第21页
·苦荞蔗糖合酶的结构功能预测	第21-22页
·苦荞蔗糖合酶系统发育树的构建	第22-25页
·讨论	第25-26页
第三章 苦荞蔗糖合酶原核表达载体的构建	第26-31页
·材料与试剂	第26-27页
·菌种与质粒	第26页
·工具酶及主要试剂	第26页
·主要溶液的配方	第26页
·主要仪器及设备	第26-27页
·实验与方法	第27-29页
·引物设计	第27页
·苦荞蔗糖合酶目的基因的扩增	第27页
·目的基因的胶回收	第27-28页
·目的基因及载体的双酶切	第28页
·目的片段与载体的连接	第28页
·连接产物的转化及阳性克隆的筛选和鉴定	第28-29页
·结果与分析	第29-30页
·苦荞蔗糖合酶基因的PCR 扩增	第29页
·重组质粒的PCR 及双酶切鉴定	第29-30页
·讨论	第30-31页
第四章 苦荞蔗糖合酶的诱导表达及优化	第31-39页
·材料与试剂	第31-32页
·菌种与质粒	第31页
·主要试剂	第31页
·主要溶液的配制	第31页
·主要仪器和设备	第31-32页
·实验方法	第32-35页
·苦荞蔗糖合酶的诱导表达	第32-34页
·目的蛋白诱导条件的优化	第34-35页
·结果与分析	第35-37页
·目的蛋白的诱导表达	第35页
·目的蛋白表达形式的分析	第35-36页
·诱导时间优化	第36页
·IPTG 浓度的优化	第36-37页
·诱导温度的优化	第37页
·讨论	第37-39页
第五章 包涵体的纯化及His-tag 鉴定	第39-43页
·材料与试剂	第39-40页
·主要试剂	第39页
·主要溶液的配方	第39页
·主要仪器	第39-40页
·实验方法	第40-41页
·包涵体纯化	第40页
·目的蛋白的钴离子螯合层析	第40页
·目的蛋白的His-tag 鉴定	第40-41页
·结果与分析	第41-42页
·包涵体的纯化	第41页
·目的蛋白的钴离子螯合层析	第41页
·目的蛋白的His-tag 鉴定	第41-42页
·讨论	第42-43页
第六章 包涵体复性研究	第43-46页
·材料与试剂	第43-44页
·菌种与质粒	第43页
·实验试剂	第43-44页
·主要仪器及设备	第44页
·实验方法	第44页
·包涵体纯化	第44页
·包涵体复性	第44页
·结果与分析	第44-45页
·讨论	第45-46页
第七章 结论	第46-47页
参考文献	第47-53页
附录	第53-55页
致谢	第55-56页
作者简介	第56页