| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 前言 | 第10-32页 |
| ·宫颈癌与宫颈癌疫苗 | 第10-25页 |
| ·HPV病毒结构与分子病毒学 | 第10-15页 |
| ·疫苗的有效性 | 第15页 |
| ·预防性疫苗 | 第15-18页 |
| ·治疗性疫苗 | 第18-24页 |
| ·其它类型HPV疫苗 | 第24页 |
| ·结论和未来展望 | 第24-25页 |
| ·甲醇酵母表达系统简介 | 第25-31页 |
| ·甲醇酵母中的甲醇代谢 | 第25-27页 |
| ·甲醇酵母表达系统 | 第27-28页 |
| ·外源蛋白在甲醇酵母中的表达 | 第28-30页 |
| ·甲醇酵母的发酵 | 第30-31页 |
| ·两种甲醇酵母的区别 | 第31页 |
| ·本实验的研究背景及目的 | 第31-32页 |
| 2 实验材料与方法 | 第32-48页 |
| ·实验材料 | 第32-36页 |
| ·工具酶和主要生化试剂 | 第32页 |
| ·试剂盒 | 第32页 |
| ·质粒与菌株 | 第32-33页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·常用溶液的配制 | 第34-36页 |
| ·实验方法 | 第36-48页 |
| ·常用实验方法 | 第36-40页 |
| ·HPV18晚期蛋白L1在毕赤酵母菌中的表达及鉴定 | 第40-43页 |
| ·人乳头瘤病毒18型L1基因原核表达与纯化 | 第43-45页 |
| ·人乳头瘤病毒18L1抗血清的制备和鉴定 | 第45-46页 |
| ·毕赤酵母工程菌发酵与纯化工艺研究 | 第46-48页 |
| 3 结果与讨论 | 第48-59页 |
| ·HPV18晚期蛋白L1在毕赤酵母菌中的表达及鉴定 | 第48-51页 |
| ·毕赤酵母表达载体构建与鉴定 | 第48-50页 |
| ·电击转化GS115,G418筛选 | 第50页 |
| ·HPV18L1基因的诱导表达与Western blot检测 | 第50页 |
| ·免疫电镜观察 | 第50-51页 |
| ·人乳头瘤病毒18型L1基因原核表达与纯化 | 第51-54页 |
| ·原核重组质粒的构建和鉴定 | 第51-52页 |
| ·原核表达质粒构建 | 第52页 |
| ·表达产物的鉴定与纯化 | 第52-53页 |
| ·化学发光Wester-blot检测与定量纯化的蛋白 | 第53-54页 |
| ·人乳头瘤病毒18L1抗血清的制备和鉴定 | 第54-56页 |
| ·DNA疫苗重组质粒的构建和鉴定 | 第54-55页 |
| ·免疫小鼠 | 第55页 |
| ·抗血清的检测 | 第55-56页 |
| ·毕赤酵母工程菌发酵与纯化工艺研究 | 第56-59页 |
| ·毕赤酵母工程菌发酵工艺研究 | 第56页 |
| ·毕赤酵母工程菌纯化工艺研究 | 第56-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 硕士期间发表论文 | 第71-72页 |
| 附录1 HPV18 L1基因经优化序列与氨基酸序列 | 第72-73页 |
| 附录2 pAO819-HPV18L1 Ⅱ质粒HPV L1基因部分测序结果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
