| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 黄曲霉毒素M_1直接竞争ELISA的建立 | 第11-37页 |
| 第一节 文献综述 | 第11-18页 |
| ·黄曲霉毒素简介 | 第11页 |
| ·黄曲霉毒素M_1的理化特性及其产生 | 第11-12页 |
| ·AFM_1的危害污染现状和防治措施 | 第12-13页 |
| ·AFM_1的检测分析方法 | 第13-15页 |
| ·薄层色谱法(TLC) | 第14页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC) | 第14页 |
| ·免疫亲和柱法 | 第14页 |
| ·酶联免疫吸附(ELISA) | 第14-15页 |
| ·酶联免疫吸附法简介 | 第15-16页 |
| ·主要研究内容和意义 | 第16-18页 |
| ·主要研究内容 | 第16-17页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| 第二节 材料与方法 | 第18-27页 |
| ·实验材料以及试剂配置 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-27页 |
| ·AFM_1-HRP的合成与鉴定 | 第19-22页 |
| ·实验原理 | 第19-21页 |
| ·合成步骤 | 第21-22页 |
| ·黄曲霉毒素M_1直接竞争ELISA的建立 | 第22-27页 |
| ·直接非竞争ELISA方法的建立 | 第22页 |
| ·酶标板均一性检测 | 第22页 |
| ·包被条件的优化 | 第22页 |
| ·封闭液的优化 | 第22-23页 |
| ·棋盘滴定确定抗体以及酶标抗原最佳使用浓度 | 第23页 |
| ·直接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第23-24页 |
| ·样品加标回收实验 | 第24-25页 |
| ·单克隆抗体特异性测定 | 第25页 |
| ·重复性实验 | 第25-27页 |
| 第三节 结果 | 第27-35页 |
| ·AFM_1肟化物的制备 | 第27页 |
| ·AFM_1-HRP的合成与鉴定 | 第27-29页 |
| ·酶标板均一性的检测 | 第29-30页 |
| ·包被驴抗鼠二抗条件的确定 | 第30页 |
| ·封闭液的优化 | 第30-31页 |
| ·棋盘滴定 | 第31-32页 |
| ·直接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第32-33页 |
| ·样品加标回收结果 | 第33-34页 |
| ·单克隆抗体特异性测定 | 第34页 |
| ·重复性实验 | 第34-35页 |
| 第三节 讨论 | 第35-36页 |
| 第四节 小结 | 第36-37页 |
| 第二章 黄曲霉毒素M_1无毒体系的建立 | 第37-60页 |
| 第一节 文献综述 | 第37-42页 |
| ·噬菌体展示技术的概念 | 第37页 |
| ·噬菌体展示技术的发展与应用 | 第37-39页 |
| ·噬菌体展示技术的应用 | 第39-41页 |
| ·以单克隆抗体作为靶分子,确定相关的抗原表位 | 第39页 |
| ·以纯化的蛋白质或其它分子为靶分子,确定它们的结合位点 | 第39-40页 |
| ·以细胞为靶分子,淘选出能结合细胞和器官的特异肽 | 第40页 |
| ·疫苗研究 | 第40-41页 |
| ·研究内容和意义 | 第41-42页 |
| ·研究内容 | 第41页 |
| ·研究意义 | 第41-42页 |
| 第二节 材料与方法 | 第42-51页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·仪器和设备 | 第42页 |
| ·主要试剂的配置 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-51页 |
| ·噬菌体的第一轮淘选 | 第44-45页 |
| ·第一轮淘选噬菌体的扩增和纯化 | 第45页 |
| ·噬菌体滴度的测定 | 第45-46页 |
| ·噬菌体的第二,三,四轮淘选 | 第46页 |
| ·噬菌斑的扩增和纯化 | 第46-47页 |
| ·AFM_1模拟表位的鉴定 | 第47-49页 |
| ·挑选与AFM_1单克隆抗体具有亲和性的阳性噬菌体克隆 | 第47-48页 |
| ·阳性噬菌体克隆交叉反应的测定 | 第48页 |
| ·最佳抗体稀释倍数和噬菌体工作浓度的确定 | 第48-49页 |
| ·竞争ELISA筛选AFM_1的模拟表位 | 第49页 |
| ·阳性噬菌体克隆单链DNA的提取和测序 | 第49-50页 |
| ·以AFM_1模拟表位建立竞争ELISA标准曲线 | 第50-51页 |
| 第三节 结果 | 第51-57页 |
| ·噬菌体富集效果 | 第51页 |
| ·阳性噬菌体克隆的挑选 | 第51-52页 |
| ·阳性噬菌体克隆交叉反应的测定 | 第52页 |
| ·最佳抗体使用浓度和噬菌体工作浓度的确定 | 第52-53页 |
| ·间接竞争ELISA筛选AFM_1模拟表位 | 第53-54页 |
| ·DNA序列及多肽的核心序列分析 | 第54-55页 |
| ·以AFM_1模拟表位建立间接竞争ELISA标准曲线 | 第55-57页 |
| 第四节 讨论 | 第57-59页 |
| 第五节 小结 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
