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仿刺参(Apostichopus japonicus)水溶性海参皂苷的分离纯化及其药理活性研究

中文摘要第1-15页
英文摘要第15-18页
第一章 前言第18-37页
 1 皂苷概述第18-19页
 2 海参皂苷研究进展第19-31页
   ·海参皂苷的分离制备及纯化第20-23页
     ·海参皂苷的提取第20-21页
     ·海参皂苷的分离纯化第21-23页
   ·海参皂苷的生物学活性第23-28页
     ·溶血活性(hemolytic activity)第23-24页
     ·细胞毒活性(cytotoxic activity)第24-25页
     ·抗肿瘤活性(antitumour activity)第25页
     ·抑菌活性(antimicrobial activity)第25-26页
     ·免疫调节活性(Immunoregulation activity)第26-27页
     ·Na+-K+-ATP酶活性抑制作用(Inhibition of Na+-K+-ATPase activity )第27页
     ·抑制肿瘤新生血管的形成活性(anti-angiogenic activity)第27-28页
   ·海参皂苷的种类及化学构成第28-31页
     ·海参烷型皂苷(holostane-type)第28-30页
     ·非海参烷型皂苷(non-hoiustane-type triterpene glycoside)第30-31页
 3 海星皂苷研究进展第31-33页
   ·多羟基甾体皂苷(polyhydroxysteroids glycosides)第32页
   ·环式甾体皂苷(Cycle steroid glycosides)第32-33页
   ·海星皂苷(Asterosaponins)第33页
 4 本文研究的目的、实验设计、创新及意义第33-37页
   ·本研究目的第33-34页
   ·实验设计第34页
   ·该课题主要创新点第34-35页
   ·研究意义第35-37页
     ·社会经济效益第35页
     ·科研价值第35-37页
第二章 水溶性海参总皂苷的提取分离及生物学活性研究第37-68页
 1 材料与方法第38-46页
   ·材料第38-40页
     ·实验用材料第38页
     ·试剂第38-39页
     ·仪器设备第39-40页
   ·实验方法第40-46页
     ·仿刺参水抽液的制备第40页
     ·水溶性海参总皂苷的大孔树脂分离第40页
     ·水溶性海参总皂苷的性质鉴定实验第40-41页
     ·水溶性海参总皂苷抗真菌活性实验第41-42页
     ·水溶性海参总皂苷体外抗肿瘤活性实验第42-43页
     ·水溶性海参总皂苷体外抗氧化活性实验第43-45页
     ·水溶性海参皂苷体外驱蝇活性实验第45页
     ·正交设计优化从仿刺参废弃液中制备水溶性海参总皂苷的工艺第45-46页
     ·数据处理第46页
 2 结果与分析第46-58页
   ·水溶性海参总皂苷制品的性质鉴定第46-47页
   ·抗真菌活性实验第47-51页
     ·抑菌环测定结果第47-50页
     ·供试真菌MIC 值的测定第50-51页
   ·体外抗肿瘤活性实验第51-53页
     ·细胞形态学观察第51-53页
     ·癌细胞抑制率测定结果第53页
   ·水溶性海参总皂苷体外抗氧化活性实验第53-55页
     ·水溶性海参总皂苷的还原力第53-54页
     ·水溶性海参总皂苷清除羟自由基的功能第54-55页
     ·对邻苯三酚自氧化的抑制作用第55页
   ·驱蝇活性实验结果第55-56页
   ·仿刺参加工废弃液水溶性海参总皂苷制备工艺的正交实验第56-58页
 3 讨论第58-66页
   ·水溶性海参总皂苷的提取第58-61页
   ·水溶性海参总皂苷性质测定第61页
   ·水溶性海参总皂苷的抑菌活性第61-63页
   ·水溶性海参皂苷的体外抗肿瘤活性第63页
   ·水溶性海参总皂苷抗氧化活性的研究第63-64页
   ·水溶性海参总皂苷驱蝇活性第64-65页
   ·冻干仿刺参废弃液中水溶性海参皂苷的工艺优化第65-66页
 4 结论第66-68页
第三章 水溶性海参总皂苷的部分纯化及抗真菌抗肿瘤活性的跟踪筛选第68-79页
 1 材料与方法第68-71页
   ·材料与试剂配制第68-70页
     ·实验用样品第68页
     ·试剂第68-69页
     ·仪器设备第69页
     ·几种常用试剂配方第69-70页
   ·实验方法第70-71页
     ·水溶性海参总皂苷的大孔树脂柱层析第70页
     ·各乙醇洗脱组分的抗真菌活性筛选第70-71页
     ·各乙醇洗脱组分的抗肿瘤活性筛选第71页
     ·实验数据的统计学处理第71页
 2 实验结果第71-77页
   ·大孔树脂柱层析各组分得量第71-72页
   ·大孔树脂洗脱组分的抗真菌活性筛选结果第72-75页
   ·大孔树脂乙醇洗脱组分抗肿瘤活性筛选第75-77页
 3 讨论第77-78页
 4 结论第78-79页
第四章 水溶性海参皂苷的纯化及高抗真菌和抗肿瘤活性组分的筛选第79-98页
 1 材料与方法第79-83页
   ·材料与试剂配制第79-81页
     ·实验用样品第79页
     ·试剂第79-80页
     ·仪器设备第80页
     ·展开剂与显色剂第80-81页
   ·实验方法第81-83页
     ·水溶性海参皂苷的硅胶柱层析第81页
     ·水溶性海参皂苷的Sephadex LH-20 柱层析第81页
     ·纯化组分的性质鉴定实验第81页
     ·水溶性海参皂苷纯化样品的HPLC 纯度鉴定第81-82页
     ·各层析组分的抗真菌活性实验第82页
     ·各层析组分的抗肿瘤活性实验第82-83页
     ·实验数据的统计学处理第83页
 2 实验结果第83-93页
   ·大孔树脂 70%乙醇洗脱组分的硅胶柱层析图谱第83-85页
   ·Sephadex LH-20 柱层析图谱第85-86页
   ·纯化组分的性质鉴定结果第86页
   ·水溶性海参皂苷纯化样品的纯度鉴定结果第86-88页
   ·抗真菌活性第88-90页
     ·纯化组分的抗真菌活性筛选结果第88-90页
     ·纯化组分对供试真菌的MIC 测定结果第90页
   ·抗肿瘤活性筛选第90-93页
 3 讨论第93-97页
   ·水溶性海参皂苷的分离纯化第94-95页
   ·抗真菌活性的筛选第95-96页
   ·体外抗肿瘤活性筛选第96-97页
 4 结论第97-98页
第五章 水溶性海参皂苷纯品SC-2 体内外抗肿瘤药理作用的实验研究第98-117页
 1 材料与方法第98-104页
   ·材料第98-101页
     ·实验用药物第98页
     ·动物及瘤株第98页
     ·仪器设备第98-99页
     ·试剂第99页
     ·几种重要试剂配方第99-101页
   ·方法第101-104页
     ·水溶性海参皂苷SC-2 体外抑瘤实验第101页
     ·SC-2 诱导体外培养的HeLa 细胞凋亡的研究第101-102页
     ·SC-2 对小鼠5180 移植瘤的抑制作用实验第102-104页
     ·数据处理第104页
 2 结果第104-112页
   ·SC-2 体外对HeLa 细胞的增殖作用第104-107页
     ·MTT 检测结果第104-105页
     ·SC-2 体外对HeLa 细胞的光镜观察第105-106页
     ·SC-2 体外对HeLa 细胞的Giemsa 染色观察第106-107页
   ·SC-2 诱导体外培养的HeLa 细胞凋亡第107-109页
     ·SC-2 作用于HeLa 细胞荧光显微观察第107-108页
     ·SC-2 作用于HeLa 细胞的DNA 琼脂糖凝胶电泳第108-109页
   ·SC-2 抗肿瘤的动物实验第109-112页
     ·SC-2 对荷瘤小鼠 S180 的抑制作用第109-111页
     ·SC-2 对小鼠免疫器官的影响第111-112页
 3 讨论第112-116页
   ·水溶性海参皂苷SC-2 体外抑制HeLa 细胞增殖作用第112-113页
   ·水溶性海参皂苷SC-2 诱导HeLa 细胞凋亡的作用第113-114页
   ·水溶性海参皂苷SC-2 的体内抗肿瘤作用第114-116页
     ·SC-2 的抗肿瘤作用第114-115页
     ·SC-2 对免疫器官指数的影响第115-116页
 4 结论第116-117页
全文总结第117-120页
参考文献第120-129页
攻读博士学位期间发表及整理的专利和文章第129-130页
致谢第130页

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