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对虾白斑综合症病毒部分核衣壳蛋白基因的鉴定及核衣壳蛋白之间相互作用的初步研究

中文摘要第1-14页
英文摘要第14-17页
缩略词表第17-18页
背景第18-30页
 1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其功能基因研究第18-30页
   ·对虾白斑综合症病毒研究概况第18-22页
     ·对虾白斑综合症病毒的基本特征第18-19页
     ·对虾白斑综合症的病理特点第19页
     ·对虾白斑综合症病毒的分离纯化第19-22页
   ·对虾白斑综合症病毒功能基因研究第22-28页
     ·结构蛋白第22-28页
   ·蛋白组学在WSSV病毒结构蛋白研究中的应用第28-30页
第一部分 WSSV核衣壳蛋白VP51、VP60和VP76基因的鉴定第30-70页
 1 内容和意义第30页
 2 材料与方法第30-46页
   ·材料第30-31页
   ·方法第31-46页
     ·WSSV完整病毒和核衣壳的制备第31-32页
     ·VP51、VP60和VP76的质谱分析第32-33页
     ·计算机分析vp51、vp60和vp76基因第33页
     ·vp51、vp60和vp76基因的反转录PCR分析第33-35页
     ·vp51、vp60和vp76基因的cDNA末端快速扩增第35-39页
     ·基因的体外表达和蛋白质纯化第39-42页
     ·多克隆抗体的制备第42页
     ·不同方法处理完整病毒和核衣壳第42-44页
     ·Western blot分析第44-45页
     ·VP51、VP60和VP76的免疫电镜定位第45页
     ·VP51、VP60和VP76的流式细胞仪定位分析第45-46页
 3 结果第46-66页
   ·VP51、VP60和VP76的质谱鉴定第46-50页
   ·vp51、vp60和vp76基因的结构第50-52页
     ·vp51基因的结构第50页
     ·vp60基因的结构第50-51页
     ·vp76基因的结构第51-52页
   ·vp51、vp60和vp76基因的时相转录分析第52-55页
   ·vp51p、vp60p和vp76p基因在E.coli BL21中的表达和蛋白质纯化第55-56页
   ·Western blot分析第56-59页
   ·不同的方法处理完整病毒和核衣壳及Western blotting分析第59-62页
   ·VP51、VP60和VP76的免疫电镜定位第62-65页
   ·VP51、VP60和VP76的流式细胞仪定位分析第65-66页
 4 讨论第66-70页
第二部分 WSSV核衣壳蛋白之间的相互作用第70-81页
 1 内容和意义第70页
 2 材料与方法第70-73页
   ·材料第70-71页
   ·方法第71-73页
     ·核衣壳蛋白的复性第71页
     ·Far Western第71-73页
     ·免疫共沉淀第73页
 3 结果第73-79页
   ·几种主要的核衣壳蛋白第73-74页
   ·Far Western实验验证几种核衣壳蛋白的关系第74-76页
   ·分析核衣壳蛋白荧光素标记效果第76-77页
   ·免疫共沉淀第77-79页
 4 讨论第79-81页
参考文献第81-87页
附录第87-94页

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