| 前言 | 第1-14页 |
| 1 实验材料 | 第14-16页 |
| ·实验仪器及实验材料 | 第14-15页 |
| ·试剂配制 | 第15-16页 |
| 2 实验方法 | 第16-24页 |
| ·样品的采集 | 第16-17页 |
| ·动物实验 | 第16页 |
| ·采样方法(呼吸道、食管和肠道内容物采集) | 第16-17页 |
| ·标准菌株的培养 | 第17-18页 |
| ·粪便细菌总DNA的提取 | 第18-19页 |
| ·引物与探针的设计 | 第19-20页 |
| ·定量PCR引物与探针的设计 | 第19页 |
| ·常规PCR引物设计 | 第19-20页 |
| ·标准品的制备 | 第20-21页 |
| ·模板的制备 | 第20页 |
| ·常规PCR反应条件的建立 | 第20页 |
| ·常规PCR产物测序 | 第20页 |
| ·胶回收标准品 | 第20-21页 |
| ·定量PCR条件的建立 | 第21-22页 |
| ·Mg~(2+)的优化 | 第21页 |
| ·TaqMan探针的优化 | 第21页 |
| ·定量PCR反应的特异性检测 | 第21-22页 |
| ·定量PCR反应的重复性、灵敏性检测 | 第22页 |
| ·定量PCR反应标准曲线的建立 | 第22页 |
| ·实时荧光定量PCR对鸭的消化道及呼吸道双歧杆菌、芽胞杆菌、肠球菌变化规律的研究 | 第22-24页 |
| 3 实验结果 | 第24-40页 |
| ·粪便细菌总DNA的提取 | 第24页 |
| ·标准品的制备 | 第24-25页 |
| ·常规PCR反应结果 | 第24页 |
| ·常规PCR产物测序 | 第24-25页 |
| ·定量PCR条件的建立 | 第25-28页 |
| ·Mg~(2+)的优化 | 第25页 |
| ·TaqMan探针的优化 | 第25-26页 |
| ·定量PCR体系优化结果 | 第26页 |
| ·定量PCR反应的特异性检测 | 第26页 |
| ·定量PCR反应的重复性、灵敏性检测 | 第26-27页 |
| ·定量PCR反应的标准曲线的建立 | 第27-28页 |
| ·实时荧光定量PCR对鸭消化道及呼吸道双歧杆菌、芽胞杆菌、肠球菌变化规律的研究 | 第28-40页 |
| ·对照组实验鸭的消化道及呼吸道的双歧杆菌、芽孢杆菌、肠球菌数量变化规律 | 第28-29页 |
| ·感染组实验鸭消化道及呼吸道的双歧杆菌变化规律 | 第29-31页 |
| ·感染组实验鸭消化道及呼吸道的芽孢杆菌变化规律 | 第31-34页 |
| ·感染组实验鸭消化道及呼吸道的肠球菌变化规律 | 第34-40页 |
| 4 分析和讨论 | 第40-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-62页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第62页 |
