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过氧化氢诱导的瑞氏木霉细胞凋亡研究及原生质体细胞活力流式细胞术检测

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表(Abbreviation)第10-12页
第一章 绪论第12-28页
   ·细胞凋亡概述第12-13页
   ·酵母菌细胞凋亡第13-17页
     ·酵母细胞凋亡的证据第13-15页
     ·酵母细胞凋亡的保守性第15-17页
   ·丝状真菌细胞凋亡第17-19页
     ·丝状真菌细胞凋亡的保守性第17-18页
     ·丝状真菌细胞凋亡的内外源诱因第18-19页
   ·细胞凋亡强诱导剂——过氧化氢(H_2O_2)第19-20页
   ·丝状真菌细胞凋亡的特征及研究方法第20-23页
     ·Annexin V染色第21页
     ·TUNEL染色第21-22页
     ·DNA ladder第22-23页
     ·鉴别细胞坏死与细胞凋亡第23页
   ·流式细胞术第23-28页
     ·流式细胞术概述第23-24页
     ·流式细胞术在微生物学研究中的应用第24-25页
     ·流式细胞术在丝状真菌中的应用第25-26页
     ·PI-gfp法检测细胞存活力第26-28页
第二章 过氧化氢诱导瑞氏木霉细胞凋亡第28-40页
   ·材料与方法:第28-33页
     ·菌株第28-29页
     ·主要试剂第29页
     ·培养基及溶液配制第29-30页
     ·主要仪器和设备第30页
     ·孢子制备与计数第30页
     ·诱导菌丝体凋亡与生长曲线测定第30页
     ·制备原生质体第30-31页
     ·诱导原生质体凋亡与存活力测定第31页
     ·碘化丙啶染色第31页
     ·液氮研磨法制备染色体DNA第31-32页
     ·小量抽提法制备染色体DNA第32页
     ·磷脂酰丝氨酸外翻的FITC-Annexin V检测第32-33页
   ·实验结果和讨论第33-39页
     ·H_2O_2对菌丝生长的影响第33页
     ·H_2O_2对原生质体活力的影响第33-34页
     ·H_2O_2导致菌丝细胞质的凝缩以及起泡现象第34-35页
     ·H_2O_2对细胞膜完整性的影响第35-36页
     ·H_2O_2对染色体片断化的影响第36-37页
     ·H_2O_2对磷脂酰丝氨酸外翻的影响第37-39页
   ·本章小结第39-40页
第三章 流式细胞术检测过氧化氢处理下的瑞氏木霉细胞活力第40-57页
   ·材料与方法第41-44页
     ·菌株第41页
     ·主要设备与试剂第41页
     ·孢子制备与计数第41页
     ·制备原生质体第41页
     ·碘化丙啶染色第41-42页
     ·流式细胞仪检测前准备第42页
     ·CELLQuest程序对检测条件的设定和调整第42-43页
     ·CELLQuest程序对样品的检测第43-44页
     ·原生质体处理与CFU测定第44页
   ·实验结果与讨论第44-56页
     ·流式细胞术散点图的读取第44页
     ·设门的策略第44-48页
     ·原生质体制备过程中菌丝碎片对检测的影响第48-49页
     ·上样缓冲液的选择第49-50页
     ·原生质体浓度的选择第50-51页
     ·流式细胞术检测原生质体活力第51-54页
     ·显微镜观察与CFU统计第54-56页
   ·本章小结第56-57页
参考文献第57-62页
致谢第62-64页
在读期间发(待)表的文章目录第64页

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