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金龟子绿僵菌MaECM33基因的克隆及分析

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-9页
缩略词第9-10页
1 绪论第10-25页
   ·引言第10-11页
   ·绿僵菌的研究进展第11-17页
     ·分类与寄主范围第11-12页
     ·生物化学和分子生物学研究第12-15页
     ·绿僵菌剂型的开发研究第15-17页
   ·产孢机制的研究进展第17-19页
     ·孢子的形态建成第17页
     ·影响产孢的因素第17-18页
     ·产孢的分子机制及相关基因第18-19页
   ·RNAi 技术及研究进展第19-22页
     ·RNAi 技术的机制第19-20页
     ·RNAi 技术的特点第20页
     ·RNAi 技术的应用前景第20-21页
     ·RNAi 技术的病原真菌中的应用第21-22页
   ·立题依据和研究目标第22-23页
   ·研究内容和技术路线第23-24页
     ·研究内容第23页
     ·技术路线第23-24页
   ·本研究创新之处第24-25页
2 材料与方法第25-38页
   ·材料第25-27页
     ·供试菌株和昆虫第25页
     ·主要仪器设备第25-26页
     ·主要试剂第26页
     ·培养基及主要溶液配制第26-27页
   ·产孢相关基因MaECM33 的克隆第27-30页
     ·PCR 扩增绿僵菌产孢时期均一化全长cDNA 文库第27-29页
     ·基因组文库筛选获取DNA 序列第29-30页
   ·MaECM33 基因的表达特征分析和Southern 杂交第30-33页
     ·MaECM33 基因的表达特征分析第30-31页
     ·southern 杂交第31-33页
   ·金龟子绿僵菌ECM33 基因RNA 干扰载体的构建第33-34页
   ·ECM33 基因RNA 干扰载体转化绿僵菌第34-36页
     ·金龟子绿僵菌分生孢子的培养和收集第34-35页
     ·金粉处理质粒DNA第35页
     ·基因枪法转化绿僵菌第35-36页
   ·转化子的筛选鉴定及表型分析第36-38页
     ·转化子的筛选鉴定第36页
     ·转化子的表型分析第36-38页
3 结果和分析第38-50页
   ·金龟子绿僵菌ECM33 的克隆第38-44页
     ·全长cDNA 的克隆第38页
     ·DNA 全序列的克隆第38-40页
     ·MaECM33 基因的生物信息学分析第40-44页
   ·表达特征分析和Southern 杂交第44-46页
     ·表达特征分析第44-46页
     ·Southern 杂交第46页
   ·ECM33 基因的RNA 干扰载体的构建第46-47页
   ·转化子的筛选鉴定第47-48页
   ·转化子表型分析第48-50页
4 讨论第50-53页
   ·MaECM33 基因的cDNA 序列克隆的策略第50页
   ·MaECM33 的编码产物第50-51页
   ·RNA 干扰技术在分析基因功能中的应用第51页
   ·转化子表型分析第51-53页
5 结论与后续工作展望第53-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-63页
附录第63页

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