中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-9页 |
缩略词 | 第9-10页 |
1 绪论 | 第10-25页 |
·引言 | 第10-11页 |
·绿僵菌的研究进展 | 第11-17页 |
·分类与寄主范围 | 第11-12页 |
·生物化学和分子生物学研究 | 第12-15页 |
·绿僵菌剂型的开发研究 | 第15-17页 |
·产孢机制的研究进展 | 第17-19页 |
·孢子的形态建成 | 第17页 |
·影响产孢的因素 | 第17-18页 |
·产孢的分子机制及相关基因 | 第18-19页 |
·RNAi 技术及研究进展 | 第19-22页 |
·RNAi 技术的机制 | 第19-20页 |
·RNAi 技术的特点 | 第20页 |
·RNAi 技术的应用前景 | 第20-21页 |
·RNAi 技术的病原真菌中的应用 | 第21-22页 |
·立题依据和研究目标 | 第22-23页 |
·研究内容和技术路线 | 第23-24页 |
·研究内容 | 第23页 |
·技术路线 | 第23-24页 |
·本研究创新之处 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-38页 |
·材料 | 第25-27页 |
·供试菌株和昆虫 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25-26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·培养基及主要溶液配制 | 第26-27页 |
·产孢相关基因MaECM33 的克隆 | 第27-30页 |
·PCR 扩增绿僵菌产孢时期均一化全长cDNA 文库 | 第27-29页 |
·基因组文库筛选获取DNA 序列 | 第29-30页 |
·MaECM33 基因的表达特征分析和Southern 杂交 | 第30-33页 |
·MaECM33 基因的表达特征分析 | 第30-31页 |
·southern 杂交 | 第31-33页 |
·金龟子绿僵菌ECM33 基因RNA 干扰载体的构建 | 第33-34页 |
·ECM33 基因RNA 干扰载体转化绿僵菌 | 第34-36页 |
·金龟子绿僵菌分生孢子的培养和收集 | 第34-35页 |
·金粉处理质粒DNA | 第35页 |
·基因枪法转化绿僵菌 | 第35-36页 |
·转化子的筛选鉴定及表型分析 | 第36-38页 |
·转化子的筛选鉴定 | 第36页 |
·转化子的表型分析 | 第36-38页 |
3 结果和分析 | 第38-50页 |
·金龟子绿僵菌ECM33 的克隆 | 第38-44页 |
·全长cDNA 的克隆 | 第38页 |
·DNA 全序列的克隆 | 第38-40页 |
·MaECM33 基因的生物信息学分析 | 第40-44页 |
·表达特征分析和Southern 杂交 | 第44-46页 |
·表达特征分析 | 第44-46页 |
·Southern 杂交 | 第46页 |
·ECM33 基因的RNA 干扰载体的构建 | 第46-47页 |
·转化子的筛选鉴定 | 第47-48页 |
·转化子表型分析 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
·MaECM33 基因的cDNA 序列克隆的策略 | 第50页 |
·MaECM33 的编码产物 | 第50-51页 |
·RNA 干扰技术在分析基因功能中的应用 | 第51页 |
·转化子表型分析 | 第51-53页 |
5 结论与后续工作展望 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
附录 | 第63页 |