| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第11-21页 |
| ·除虫菊酯概述 | 第11-12页 |
| ·除虫菊酯残留检测 | 第12-15页 |
| ·除虫菊酯的检测方法 | 第12-14页 |
| ·除虫菊酯检测的发展趋势 | 第14-15页 |
| ·单链抗体的研究 | 第15-19页 |
| ·单链抗体概述 | 第15-17页 |
| ·噬菌体抗体库技术 | 第17-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19页 |
| ·研究目的 | 第19页 |
| ·研究意义 | 第19页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第19-21页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 2 抗除虫菊酯重组单链抗体文库的构建 | 第21-38页 |
| ·技术路线 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·试剂及用液 | 第22-23页 |
| ·PCR 引物 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·免疫小鼠 | 第24-25页 |
| ·抗血清效价测定 | 第25页 |
| ·小鼠单个脾细胞的分离 | 第25-26页 |
| ·脾细胞mRNA 的提取 | 第26页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第26-27页 |
| ·VH 和 VL 的扩增及纯化 | 第27页 |
| ·VH 和 VL 加端反应 | 第27-28页 |
| ·重叠 PCR 扩增scFv 基因 | 第28页 |
| ·感受态 XL1-Blue 的制备和噬粒 pComb3H 的扩增 | 第28-29页 |
| ·全套scFv 基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·抗体文库构建 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-38页 |
| ·抗血清效价测定 | 第31-33页 |
| ·mRNA 提取 | 第33页 |
| ·第一链cDNA 合成与鉴定 | 第33页 |
| ·PCR 扩增 VH 和 VL 基因 | 第33-34页 |
| ·加端PCR 扩增 VH 和 VL 基因 | 第34-35页 |
| ·重叠 PCR 扩增scFv 基因 | 第35-36页 |
| ·抗体文库的构建与分析 | 第36-38页 |
| 3 抗除虫菊酯单链抗体文库的初步筛选 | 第38-47页 |
| ·技术路线 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·试剂药品 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·噬菌体抗体文库的富集 | 第39页 |
| ·回收率与ELISA 分析 | 第39-40页 |
| ·Bst NI 指纹图谱分析 | 第40-41页 |
| ·单克隆噬菌体抗体的筛选 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-47页 |
| ·抗体文库的富集 | 第41-42页 |
| ·Bst NI 指纹图谱分析 | 第42-43页 |
| ·噬菌体单克隆抗体的筛选 | 第43-47页 |
| 4 讨论 | 第47-51页 |
| ·抗除虫菊酯单链抗体文库的构建 | 第47-49页 |
| ·小鼠免疫与效价测定 | 第47页 |
| ·mRNA 提取与可变区扩增 | 第47-48页 |
| ·Linker 选择与scFv 扩增 | 第48-49页 |
| ·抗体文库的构建 | 第49页 |
| ·噬菌体抗体文库的筛选 | 第49-51页 |
| ·抗体库的富集 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体的筛选 | 第50-51页 |
| 5 结论与展望 | 第51-53页 |
| ·结论 | 第51页 |
| ·后续工作进展 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61页 |
| A. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第61页 |
| B. 作者在攻读硕士学位期间申请的专利 | 第61页 |