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果蝇细胞凋亡抑制因子类似蛋白和MA3蛋白结构域异构酶在拟南芥细胞死亡中的功能分析

ACKNOWLEDGEMENTS第1-11页
ABSTRACT第11-13页
摘要第13-15页
TABLE OF CONTENTS第15-18页
LIST OF TABLES第18-19页
LIST OF FIGURES第19-21页
ABBREVIATIONS第21-23页
CHAPTER 1 PROGRAMMED CELL DEATH IN PLANTS第23-41页
   ·General introduction第23-25页
   ·Research objectives第25-26页
   ·Literature review第26-41页
     ·Programmed cell death第26-29页
     ·Apoptosis第29-31页
     ·Genes involved in PCD第31-36页
     ·Defense response in plants第36-41页
CHAPTER 2 GENERAL EXPERIMENTAL PROCEDURES第41-55页
   ·Plant growth第41-42页
   ·Extraction of DNA and RNA第42-43页
     ·Quick genomic DNA extraction第42-43页
     ·Extraction of total RNA第43页
   ·PCR amplification第43-44页
   ·Restriction enzyme digest第44-47页
     ·Plasmid extraction第44-45页
     ·Restriction enzyme(single) digestion of plasmid第45-46页
     ·Restriction enzyme(double) digestion of plasmid第46页
     ·Recovery of digested PCR products via agarose gel electrophoresis第46-47页
   ·Cloning第47-48页
   ·Transformation to Agrobacterium第48-49页
   ·Arabidopsis transformation and identification of transgenic Plants第49-50页
   ·Yeast transformation第50-51页
     ·Yeast transformation solutions第50页
     ·Quick and easy yeast transformation第50-51页
   ·Disease assays第51-55页
     ·Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000 infiltration第51-53页
     ·Botrytis cinerea inoculation第53-54页
     ·Alternaria brassicicola inoculation第54-55页
CHAPTER 3 DAL1 AND DAL2:NOVEL REGULATORS OF PROGRAMMED CELL DEATH IN ARABIDOPSIS第55-86页
 Summary第55-56页
   ·Introduction第56-57页
   ·Materials and methods第57-62页
     ·RT-PCR analysis of gene expression第57-58页
     ·Screening for homozygous T-DNA lines第58页
     ·Disease assays第58-59页
     ·Treatment of Fumonisin B1(FB1)第59页
     ·Detection of cell death第59-60页
     ·Detection of callose deposition and autofluorescence第60页
     ·Detection of reactive oxygen species第60页
     ·Apoptosis inhibitory activity in yeast第60-62页
   ·Results第62-82页
     ·Characterization of DAL1 and DAL2 in Arabidopsis第62-64页
     ·Expression of DAL1 and DAL2 in response to Pseudomonas syringae pv.Tomato第64页
     ·Identification of T-DNA insertion lines第64-66页
     ·Disease phenotype of dal1 and dal2 mutants against Pst DC3000第66-70页
     ·Expression of PR-1 genes in dal1 and dal2 mutant plants after infection with Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000第70-71页
     ·Extensive PCD induced by Fumonisin B1 in dal1 and dal2 mutant plants第71-78页
     ·Response of the dal1 and dal2 mutant plants to necrotrophic fungi第78-81页
     ·DAL1 and DAL2 do not suppress H_2O_2-induced cell death in yeast第81-82页
   ·Discussion第82-86页
CHAPTER 4 POSSIBLE INVOLVEMENT OF A SMALL SUBGROUP OF MA3 DOMAIN-CONTAINING TOPOISOMERASES IN ARABIDOPSIS PROGRAMMED CELL DEATH第86-107页
 Summary第86-87页
   ·Introduction第87-88页
   ·Materials and methods第88-90页
     ·RT-PCR analysis of gene expression第88-89页
     ·Confirmation of knockouts第89页
     ·Disease assays第89页
     ·Treatment of Fumonisin B1第89页
     ·Studies on ABA第89-90页
   ·Results第90-104页
     ·Molecular characterization of a small subgroup of MA3 domaincontaining topoisomerases in Arabidopsis第90-94页
     ·Identification of T-DNA insertion lines第94页
     ·Altered disease responses to Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000第94-97页
     ·Response to FB1第97-100页
     ·Response to Alternaria brassicicola第100页
     ·Response to ABA第100-104页
   ·Discussion第104-107页
CHAPTER 5 CONCLUSIONS AND FUTURE DIRECTIONS第107-110页
   ·Main findings and conclusions第107-109页
   ·Future directions第109-110页
REFERENCES第110-126页

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