| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-42页 |
| ·细菌细胞表面展示技术进展 | 第14-22页 |
| ·细菌细胞表面展示技术概述 | 第14页 |
| ·细菌细胞表面展示体系的结构组成 | 第14-17页 |
| ·存在的问题及展望 | 第17-22页 |
| ·冰晶核蛋白研究进展 | 第22-31页 |
| ·植物霜冻害 | 第22页 |
| ·冰晶核蛋白概述 | 第22-23页 |
| ·冰晶核蛋白的结构和功能 | 第23-25页 |
| ·冰晶核蛋白的应用 | 第25-27页 |
| ·冰晶核蛋白的细胞表面展示 | 第27-31页 |
| ·无机磷酸盐吸附研究进展 | 第31-38页 |
| ·化学除磷法 | 第32页 |
| ·吸附法除磷 | 第32-33页 |
| ·人工湿地系统 | 第33-34页 |
| ·生物除磷法 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌磷酸盐吸附蛋白 | 第35-38页 |
| ·细菌AiiA研究进展概述 | 第38-40页 |
| ·细菌的群体感应系统简介 | 第38-39页 |
| ·软腐病致病原理简介 | 第39页 |
| ·AHL内酯酶(AiiA)简介 | 第39-40页 |
| ·研究的目的和意义 | 第40-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-59页 |
| ·实验材料 | 第42-47页 |
| ·菌株和质粒 | 第42-44页 |
| ·培养基配方及培养条件 | 第44-45页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·试剂和仪器 | 第45-47页 |
| ·实验方法 | 第47-59页 |
| ·DNA操作 | 第47-48页 |
| ·重组质粒的转化和转化子的筛选鉴定 | 第48-49页 |
| ·菌落原位杂交 | 第49-51页 |
| ·PCR扩增 | 第51-52页 |
| ·细菌细胞表面定位实验方法 | 第52-56页 |
| ·冰核活性测定实验 | 第56页 |
| ·磷酸盐吸附实验 | 第56-57页 |
| ·抑制软腐病能力实验 | 第57-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-110页 |
| ·冰晶核蛋白基因的克隆、蛋白质结构预测分析与异源表达的跨膜分泌活性 | 第59-74页 |
| ·丁香假单胞菌冰晶核蛋白基因的克隆 | 第59-60页 |
| ·冰晶核蛋白编码基因的序列分析 | 第60-61页 |
| ·冰晶核蛋白氨基酸序列分析 | 第61-66页 |
| ·冰晶核蛋白基因在大肠杆菌中的表达和重组菌跨膜分泌活性检测 | 第66-74页 |
| ·利用冰晶核蛋白构建大肠杆菌细胞表面展示系统与性能分析 | 第74-86页 |
| ·大肠杆菌展示载体的构建 | 第74-75页 |
| ·大肠杆菌展示体系的优化 | 第75-78页 |
| ·细胞表面定位分析 | 第78-81页 |
| ·多拷贝串联重复InaQ-N展示载体的构建 | 第81-83页 |
| ·多拷贝串联重复InaQ-N展示体系的细胞表面定位分析 | 第83-86页 |
| ·利用冰晶核蛋白构建恶臭假单胞菌表面展示系统与性能分析 | 第86-95页 |
| ·恶臭假单胞菌细胞表面展示载体的构建 | 第86-87页 |
| ·恶臭假单胞菌展示体系的优化 | 第87-88页 |
| ·细胞表面定位分析 | 第88-91页 |
| ·多拷贝串联重复InaQ-N展示载体的构建 | 第91-92页 |
| ·多拷贝串联重复InaQ-N展示体系的细胞表面定位分析 | 第92-95页 |
| ·在大肠杆菌细胞表面展示磷酸盐吸附蛋白与工程菌生物吸磷性能 | 第95-100页 |
| ·表面展示载体的构建 | 第95-96页 |
| ·细胞表面定位分析 | 第96-97页 |
| ·磷酸盐标准曲线的测定 | 第97页 |
| ·磷酸盐溶液初始浓度及检测时间的确定 | 第97-99页 |
| ·磷酸盐吸附能力的测定 | 第99-100页 |
| ·在恶臭假单胞菌细胞表面展示磷酸盐吸附蛋白与工程菌生物吸磷性能 | 第100-104页 |
| ·表面展示载体的构建 | 第100-101页 |
| ·细胞表面定位分析 | 第101-103页 |
| ·磷酸盐吸附能力的测定 | 第103-104页 |
| ·在恶臭假单胞菌细胞表面展示AiiA蛋白与工程菌抑制胡萝卜软腐病性能 | 第104-110页 |
| ·表面展示载体的构建 | 第105页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第105-106页 |
| ·抑制软腐病分析 | 第106-110页 |
| 4 讨论 | 第110-115页 |
| ·冰晶核蛋白InaQ的分析 | 第110页 |
| ·冰晶核蛋白InaQ与分泌锚定相关结构域的确定 | 第110-111页 |
| ·InaQ-N展示性能分析 | 第111-113页 |
| ·磷酸盐吸附能力检测 | 第113-114页 |
| ·抑制软腐病性能分析 | 第114-115页 |
| 5 总结 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 附录1 发表论文情况 | 第135页 |
| 附录2 冰核基因inaQ及其编码氨基酸序列 | 第135-138页 |
