| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-34页 |
| ·2型猪链球菌病的概述 | 第12-21页 |
| ·历史与分布 | 第12-13页 |
| ·病原学 | 第13-14页 |
| ·流行病学 | 第14-15页 |
| ·致病机理 | 第15-17页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第17-20页 |
| ·诊断 | 第20页 |
| ·防治 | 第20-21页 |
| ·2型猪链球菌病毒力因子的研究进展 | 第21-32页 |
| ·荚膜多糖(capsular polysaccharide,CPS) | 第22页 |
| ·溶菌酶释放蛋白(muramidase-released protein,MRP)和胞外蛋白因子extracellular protein factor,EF) | 第22-24页 |
| ·溶血素(suilysin,Sly) | 第24页 |
| ·纤连蛋白结合蛋白(Fibronectin and Fibrinogen binding protein,FBPS) | 第24-25页 |
| ·IgG结合蛋白(Immunoglobulin G-binding protein) | 第25页 |
| ·粘附素(Bacterial Adherence) | 第25-26页 |
| ·透明质酸裂解酶 | 第26页 |
| ·猪链球菌类细菌素抑制物 | 第26-27页 |
| ·甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) | 第27页 |
| ·二元信号转导系统 | 第27-28页 |
| ·Sortase | 第28页 |
| ·溶源性噬菌体Ss1 | 第28-29页 |
| ·谷氨酸脱氢酶 | 第29页 |
| ·分泌性核酸酶SsnA | 第29页 |
| ·精氨酸氨基肽酶 | 第29-30页 |
| ·可疑基因岛 | 第30页 |
| ·orf2毒力相关基因 | 第30-31页 |
| ·表面抗原蛋白(Surface antigen one,Sao) | 第31页 |
| ·血清浑浊因子(Serum Opacific Factor,OFS) | 第31页 |
| ·酪蛋白酶(Casinse) | 第31页 |
| ·类胰凝乳蛋白酶(Chymotrypsin-like) | 第31-32页 |
| ·细菌中谷氨酰胺代谢的概述 | 第32-34页 |
| 第2章 研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第3章 材料和方法 | 第36-54页 |
| ·试验材料 | 第36-43页 |
| ·菌株、质粒、细胞及培养条件 | 第36-38页 |
| ·主要药品及试剂 | 第38页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第38-39页 |
| ·缓冲液 | 第39-40页 |
| ·引物 | 第40-42页 |
| ·实验动物 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-54页 |
| ·2型猪链球菌的复苏 | 第43页 |
| ·2型猪链球菌基因组的提取 | 第43-44页 |
| ·PCR扩增 | 第44页 |
| ·PCR或酶切产物的回收与纯化 | 第44-45页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第45页 |
| ·连接产物的转化 | 第45页 |
| ·质粒的小量制备(改良的碱裂解法) | 第45-46页 |
| ·质粒的大量制备(碱裂解法) | 第46页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第46-47页 |
| ·2型猪链球菌的电转化 | 第47-49页 |
| ·突变株的生物学特性研究 | 第49页 |
| ·细胞感染实验 | 第49-51页 |
| ·中性粒细胞(PMN)介导的杀菌实验 | 第51-52页 |
| ·突变株对小鼠致病力分析 | 第52-54页 |
| 第4章 结果与分析 | 第54-97页 |
| ·S.suis 2谷氨酰胺合成酶GlnA的生物学功能研究 | 第54-69页 |
| ·S.suis 2谷氨酰胺合成酶glnA基因敲除突变株ΔGlnA及互补菌株CΔGlnA的构建 | 第54-58页 |
| ·GlnA的缺失对S.suis 2基本生物学性状的影响 | 第58-64页 |
| ·GlnA的缺失对S.suis 2致病力的影响 | 第64-69页 |
| ·S.suis 2谷氨酰胺代谢对细菌致病力的影响及其可能机制的研究 | 第69-97页 |
| ·谷氨酰胺代谢调节基因GlnR缺失突变株ΔGlnR、GlnR/GlnA双缺失突变株ΔGlnRA及相应的互补菌株CΔGlnR、CΔGlnRA的构建 | 第69-74页 |
| ·GlnR、GlnR/GlnA的缺失对S.suis 2基本生物学性状的影响。 | 第74-80页 |
| ·GlnR、GlnR/GlnA的缺失对S.suis 2致病力的影响 | 第80-86页 |
| ·S.suis 2谷氨酰胺代谢机制及其致病机理的研究 | 第86-97页 |
| 第5章 讨论 | 第97-103页 |
| ·目标基因glnR和glnA的选择 | 第97-98页 |
| ·基因敲除突变株ΔGlnR、ΔGlnA、ΔGlnRA及相应的互补菌株CΔGlnR、CΔGlnA、CΔGlnRA的构建 | 第98-99页 |
| ·glnR和glnA对S.suis 2致病力的影响 | 第99-100页 |
| ·S.suis 2谷氨酰胺代谢机制的初步研究 | 第100-103页 |
| 第6章 结论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 附录 | 第116页 |
