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糖化酶生产菌次要水解酶的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-14页
   ·糖化酶的概况及工业应用第7-8页
   ·国内外对于提高糖化酶活力的研究第8页
   ·国产糖化酶制剂中存在的问题第8-9页
   ·α-葡萄糖苷酶的分布及组分多型性第9页
   ·α-葡萄糖苷酶的特性第9-11页
     ·相对分子质量第9页
     ·热稳定性及pH 稳定性第9-10页
     ·底物专一性第10-11页
   ·α-葡萄糖苷酶的分子结构及催化机制第11-12页
     ·基本结构第11页
     ·催化机制第11-12页
   ·α-葡萄糖苷酶在分子生物学水平上的研究第12-13页
   ·本文立题意义与背景第13-14页
第二章 α-葡萄糖苷酶的产酶进程及酶学性质研究第14-21页
   ·引言第14页
   ·材料与方法第14-18页
     ·菌株和培养基第14页
     ·主要试剂、缓冲液第14页
     ·粗酶液的制备第14页
     ·生物量的确定第14-15页
     ·主要仪器设备第15页
     ·糖化酶酶活测定方法第15-16页
     ·α-葡萄糖苷酶酶活测定方法第16-18页
   ·结果与讨论第18-20页
     ·CICIM F0410 菌株的发酵进程曲线第18页
     ·α-葡萄糖苷酶的酶学性质研究第18-20页
   ·本章小结第20-21页
第三章 通过优化发酵条件降低α-葡萄糖苷酶产量第21-33页
   ·引言第21页
   ·材料与方法第21页
     ·菌株第21页
     ·培养基与培养方法第21页
     ·酶活测定方法第21页
   ·结果与讨论第21-32页
     ·发酵培养基的优化第21-29页
     ·发酵培养条件的优化第29-32页
   ·本章小结第32-33页
第四章 α-葡萄糖苷酶基因克隆、序列分析及基因敲除质粒的构建第33-47页
   ·引言第33页
   ·研究材料第33-34页
     ·菌株和质粒第33页
     ·工具酶和试剂第33-34页
     ·培养基和培养条件第34页
     ·主要仪器第34页
   ·研究方法第34-37页
     ·A. niger F0410 染色体的提取(研磨法)第34-35页
     ·A. niger F0410 α-葡萄糖苷酶基因序列的PCR 扩增第35页
     ·A. niger F0410 α-葡萄糖苷酶基因序列测定第35-36页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第36页
     ·重组质粒的构建第36页
     ·转化实验第36-37页
     ·快速小量抽提质粒DNA第37页
   ·结果与讨论第37-46页
     ·A. niger F0410 基因序列扩增、测定与分析第37页
     ·测序用重组质粒pMD19T-aglU 的构建第37-38页
     ·α-葡萄糖苷酶基因序列分析第38-45页
     ·重组质粒pMD19-aglU::G418 的构建及菌株对G418 抗性敏感度实验第45-46页
   ·本章小结第46-47页
论文主要结论第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-53页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第53页

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