摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-14页 |
·糖化酶的概况及工业应用 | 第7-8页 |
·国内外对于提高糖化酶活力的研究 | 第8页 |
·国产糖化酶制剂中存在的问题 | 第8-9页 |
·α-葡萄糖苷酶的分布及组分多型性 | 第9页 |
·α-葡萄糖苷酶的特性 | 第9-11页 |
·相对分子质量 | 第9页 |
·热稳定性及pH 稳定性 | 第9-10页 |
·底物专一性 | 第10-11页 |
·α-葡萄糖苷酶的分子结构及催化机制 | 第11-12页 |
·基本结构 | 第11页 |
·催化机制 | 第11-12页 |
·α-葡萄糖苷酶在分子生物学水平上的研究 | 第12-13页 |
·本文立题意义与背景 | 第13-14页 |
第二章 α-葡萄糖苷酶的产酶进程及酶学性质研究 | 第14-21页 |
·引言 | 第14页 |
·材料与方法 | 第14-18页 |
·菌株和培养基 | 第14页 |
·主要试剂、缓冲液 | 第14页 |
·粗酶液的制备 | 第14页 |
·生物量的确定 | 第14-15页 |
·主要仪器设备 | 第15页 |
·糖化酶酶活测定方法 | 第15-16页 |
·α-葡萄糖苷酶酶活测定方法 | 第16-18页 |
·结果与讨论 | 第18-20页 |
·CICIM F0410 菌株的发酵进程曲线 | 第18页 |
·α-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 | 第18-20页 |
·本章小结 | 第20-21页 |
第三章 通过优化发酵条件降低α-葡萄糖苷酶产量 | 第21-33页 |
·引言 | 第21页 |
·材料与方法 | 第21页 |
·菌株 | 第21页 |
·培养基与培养方法 | 第21页 |
·酶活测定方法 | 第21页 |
·结果与讨论 | 第21-32页 |
·发酵培养基的优化 | 第21-29页 |
·发酵培养条件的优化 | 第29-32页 |
·本章小结 | 第32-33页 |
第四章 α-葡萄糖苷酶基因克隆、序列分析及基因敲除质粒的构建 | 第33-47页 |
·引言 | 第33页 |
·研究材料 | 第33-34页 |
·菌株和质粒 | 第33页 |
·工具酶和试剂 | 第33-34页 |
·培养基和培养条件 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·研究方法 | 第34-37页 |
·A. niger F0410 染色体的提取(研磨法) | 第34-35页 |
·A. niger F0410 α-葡萄糖苷酶基因序列的PCR 扩增 | 第35页 |
·A. niger F0410 α-葡萄糖苷酶基因序列测定 | 第35-36页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第36页 |
·重组质粒的构建 | 第36页 |
·转化实验 | 第36-37页 |
·快速小量抽提质粒DNA | 第37页 |
·结果与讨论 | 第37-46页 |
·A. niger F0410 基因序列扩增、测定与分析 | 第37页 |
·测序用重组质粒pMD19T-aglU 的构建 | 第37-38页 |
·α-葡萄糖苷酶基因序列分析 | 第38-45页 |
·重组质粒pMD19-aglU::G418 的构建及菌株对G418 抗性敏感度实验 | 第45-46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
论文主要结论 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |