| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-24页 |
| ·引言 | 第9-11页 |
| ·黄曲霉毒素的毒性 | 第11页 |
| ·黄曲霉毒素的致癌性 | 第11-12页 |
| ·黄曲霉毒素的检测 | 第12-13页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第13-15页 |
| ·噬菌体表面展示技术的原理与方法 | 第13-14页 |
| ·噬菌体抗体库淘洗富集的原理与方法 | 第14-15页 |
| ·噬菌体展示技术的意义 | 第15页 |
| ·抗体发展 | 第15-20页 |
| ·第一代多克隆抗体 | 第16页 |
| ·第二代单克隆抗体 | 第16-17页 |
| ·鼠源单抗人源化 | 第17页 |
| ·小分子抗体scFv，Fab，F（ab’）2、Fv | 第17-19页 |
| ·双价和双特异抗体 | 第19-20页 |
| ·基因工程抗体的应用展望 | 第20页 |
| ·ELISA 原理 | 第20-22页 |
| ·ELISA 的基础 | 第20-21页 |
| ·ELISA 检测方法的类型 | 第21页 |
| ·ELISA 在食品检测中的应用 | 第21-22页 |
| ·研究背景 | 第22-24页 |
| 第二章 筛选 | 第24-34页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·菌株和文库 | 第24页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第24-25页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·辅助噬菌体的大量制备 | 第26-27页 |
| ·人源性scFv 噬菌体抗体的扩增 | 第27页 |
| ·人源性ScFv 噬菌体抗体库容量的测定 | 第27页 |
| ·人源性scFv 噬菌体次级抗体库的制备 | 第27-28页 |
| ·筛选抗 AFB1-BSA 的阳性克隆 | 第28-29页 |
| ·单克隆ELISA 鉴定阳性噬菌体克隆 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-32页 |
| ·准备工作 | 第30页 |
| ·噬菌体抗体的洗涤 | 第30-31页 |
| ·洗脱方式对筛选结果的影响 | 第31-32页 |
| ·单克隆ELISA 鉴定阳性克隆 | 第32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 第三章 单链抗体的可溶性表达、特异性鉴定以及纯化 | 第34-47页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·菌株与文库 | 第34页 |
| ·实验试剂 | 第34-35页 |
| ·实验仪器 | 第35页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| ·阳性克隆 scFv 的表达 | 第36页 |
| ·scFv 的 Ni 柱纯化 | 第36-37页 |
| ·scFv 蛋白的纯化 | 第37页 |
| ·Ni 离子柱的保存 | 第37页 |
| ·scFv 的脱盐浓缩（除去眯唑） | 第37页 |
| ·scFv 的 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第37-38页 |
| ·竞争性ELISA 鉴定特异性结合的单链抗体 | 第38-39页 |
| ·酶切和PCR 鉴定阳性克隆 | 第39-41页 |
| ·阳性克隆 scFv 基因测序 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-46页 |
| ·阳性克隆 scFv 的表达 | 第41-42页 |
| ·scFv 蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·竞争性ELISA 鉴定特异性结合的单链抗体 | 第42-43页 |
| ·酶切和PCR 鉴定阳性克隆 | 第43-44页 |
| ·阳性克隆DNA 序列的测定 | 第44-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 scFv 可溶性表达条件优化 | 第47-52页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·菌株与文库 | 第47页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第47页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第47-48页 |
| ·实验方法及结果 | 第48-51页 |
| ·菌体的生长对 scFv 蛋白可溶性表达的影响 | 第48-49页 |
| ·温度对 scFv 蛋白可溶性表达的影响 | 第49页 |
| ·IPTG 浓度对 scFv 蛋白可溶性表达的影响 | 第49-50页 |
| ·葡萄糖浓度对 scFv 蛋白可溶性表达的影响 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 主要结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |