| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·L-精氨酸的性质及应用 | 第7-8页 |
| ·L-精氨酸的生物学意义 | 第7页 |
| ·L-精氨酸的应用 | 第7-8页 |
| ·L-精氨酸的生产现状 | 第8页 |
| ·L-精氨酸在生物体内的合成途径 | 第8-10页 |
| ·L-精氨酸生产的国内外研究进展 | 第10-11页 |
| ·L-精氨酸在传统诱变育种方面的研究进展 | 第10页 |
| ·L-精氨酸在基因工程育种方面的研究进展 | 第10-11页 |
| ·鸟氨酸乙酰转移酶的研究进展 | 第11-12页 |
| ·鸟氨酸乙酰转移酶的功能 | 第11页 |
| ·鸟氨酸乙酰转移酶的研究进展 | 第11-12页 |
| ·立题意义与研究内容 | 第12-13页 |
| ·立题意义 | 第12页 |
| ·研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-24页 |
| ·菌株与质粒 | 第13页 |
| ·培养基与培养方法 | 第13-14页 |
| ·培养基 | 第13-14页 |
| ·培养方法 | 第14页 |
| ·主要试剂与工具酶 | 第14-16页 |
| ·生化试剂 | 第14页 |
| ·蛋白质相关试剂 | 第14-15页 |
| ·工具酶及其他试剂 | 第15页 |
| ·抗生素的配制 | 第15页 |
| ·溶菌酶的配制 | 第15页 |
| ·IPGT 溶液的配制 | 第15页 |
| ·SDS-PAGE 电泳试剂的配制 | 第15-16页 |
| ·SDS-PAGE 电泳凝胶的配制 | 第16页 |
| ·镍琼脂糖凝胶FF 亲和色谱缓冲液的配制 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-24页 |
| ·发酵参数分析 | 第17-18页 |
| ·棒杆菌基因组DNA 的提取 | 第18页 |
| ·谷氨酸棒杆菌与钝齿棒杆菌argJ 基因的扩增 | 第18页 |
| ·钝齿棒杆菌OATase 中α、β亚基的分别扩增 | 第18-19页 |
| ·PCR 产物与T 载体的连接 | 第19页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第19页 |
| ·大肠杆菌重组质粒的抽提 | 第19-20页 |
| ·重组质粒中插入片段的序列测定及分析比对 | 第20页 |
| ·基因片段与载体pET-28a、pJC1-tac 的连接 | 第20页 |
| ·钝齿棒杆菌感受态细胞的制备与电击转化 | 第20-21页 |
| ·重组目的蛋白的表达与纯化 | 第21-22页 |
| ·SDS-PAGE 电泳方法 | 第22页 |
| ·酶活测定 | 第22页 |
| ·基因敲除 | 第22-23页 |
| ·钝齿棒杆菌重组菌与出发菌的发酵特性比较 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-39页 |
| ·钝齿棒杆菌中OATase 的功能鉴定 | 第24-29页 |
| ·钝齿棒杆菌与谷氨酸棒杆菌中argJ 的PCR 扩增及序列分析 | 第24-25页 |
| ·钝齿棒杆菌与谷氨酸棒杆菌中OATase 粗酶比活力的测定 | 第25页 |
| ·重组质粒pET-28a-argJ(Cg)、pET-28a-argJ(Cc)的构建 | 第25-26页 |
| ·argJ 基因在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第26-27页 |
| ·重组OATase 纯酶比活力的测定 | 第27页 |
| ·重组OATase 的功能研究 | 第27-29页 |
| ·OATase 催化作用机理的初步研究 | 第29-35页 |
| ·α、β亚基的分别表达及活性分析 | 第29-31页 |
| ·α、β亚基的分别敲除及活性分析 | 第31-35页 |
| ·argJ 基因在C. crenatum 中的增强表达 | 第35-39页 |
| ·重组穿梭表达载体pJC1-tac-argJ 的构建 | 第35页 |
| ·钝齿棒杆菌重组菌与出发菌OATase 粗酶比活力的差异 | 第35-36页 |
| ·钝齿棒杆菌重组菌与出发菌发酵产L-精氨酸的差异 | 第36-37页 |
| ·钝齿棒杆菌重组菌与出发菌发酵液中氨基酸含量分析 | 第37-39页 |
| 第四章 结论与展望 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 附录1：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第46-47页 |
| 附录2：核苷酸序列 | 第47-48页 |
