摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-21页 |
第一章 绪论 | 第21-32页 |
·前言 | 第21页 |
·东方田鼠抗血吸虫的研究 | 第21-24页 |
·东方田鼠抗日本血吸虫病现象 | 第22页 |
·日本血吸虫在东方田鼠体内的发育及宿主炎症反应 | 第22页 |
·东方田鼠抗日本血吸虫特异性免疫机制研究 | 第22-24页 |
·东方田鼠抗日本血吸虫体液免疫机制研究 | 第22-23页 |
·东方田鼠抗日本血吸虫的细胞免疫机制研究 | 第23页 |
·东方田鼠抗日本血吸虫非特异性免疫机制研究 | 第23页 |
·东方田鼠抗日本血吸虫其他可能机制研究 | 第23-24页 |
·血吸虫疫苗的研究 | 第24-28页 |
·血吸虫疫苗的种类 | 第24-25页 |
·血吸虫研究的保护性抗原介绍 | 第25-28页 |
·基因芯片技术在寄生虫学中的应用 | 第28-32页 |
·基因芯片的定义 | 第28页 |
·基因芯片的制备 | 第28-29页 |
·基因芯片技术在寄生虫学中的应用 | 第29-32页 |
第二章 不同宿主来源日本血吸虫 10d 童虫形态观察和体细胞凋亡研究 | 第32-39页 |
·绪言 | 第32页 |
·材料和方法 | 第32-33页 |
·试验动物 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·虫体收集 | 第32-33页 |
·扫描电镜观察不同宿主来源10d 童虫的形态 | 第33页 |
·透射电镜观察不同宿主来源10d 童虫的形态 | 第33页 |
·Annexin V-FITC/propidium iodide (PI)法检测不同宿主来源虫体细胞细胞凋亡 | 第33页 |
·结果 | 第33-37页 |
·扫描电镜分析不同宿主来源10d 童虫的形态 | 第33-36页 |
·透射电镜分析不同宿主来源10d 童虫的形态 | 第36-37页 |
·不同宿主来源虫体细胞细胞凋亡分析 | 第37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第三章 不同宿主来源日本血吸虫童虫基因表达的芯片分析 | 第39-58页 |
·绪言 | 第39页 |
·材料和方法 | 第39-43页 |
·试验动物 | 第39页 |
·主要仪器 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39-40页 |
·虫体收集 | 第40页 |
·寡核苷酸芯片的定制与杂交 | 第40-41页 |
·芯片结果的实时定量PCR 验证 | 第41-43页 |
·结果 | 第43-55页 |
·虫体总RNA 的提取 | 第43页 |
·不同宿主来源童虫差异表达基因分析 | 第43-51页 |
·芯片结果Real time RT-PCR 验证 | 第51-55页 |
·讨论 | 第55-58页 |
第四章日本血吸虫细胞凋亡因子和凋亡抑制因子 SjIAP 研究 | 第58-74页 |
·绪言 | 第58页 |
·材料和方法 | 第58-63页 |
·主要试剂和酶 | 第58页 |
·菌种、实验动物和血清 | 第58-59页 |
·RNA 的提取 | 第59页 |
·不同宿主来源童虫caspase3/7 活性检测 | 第59页 |
·IAP 基因的扩增及生物信息学分析 | 第59页 |
·荧光实时定量RT-PCR 检测 | 第59-60页 |
·重组表达质粒的构建与表达 | 第60页 |
·Western blotting 检测 | 第60-61页 |
·重组蛋白质谱鉴定 | 第61页 |
·IAP 质粒转染对ActD 药物诱导凋亡的抑制作用 | 第61-62页 |
·免疫组化 | 第62页 |
·虫体蛋白与重组IAP 蛋白相互作用 | 第62-63页 |
·结果 | 第63-72页 |
·不同宿主来源童虫caspase3/7 活性分析 | 第63页 |
·不同宿主来源虫体caspase3 和caspase7 实时定量分析 | 第63-64页 |
·Sj IAP 基因的克隆及生物信息学分析 | 第64-66页 |
·重组原核表达质粒的构建、原核表达及重组蛋白纯化 | 第66-68页 |
·Sj IAP 基因的期别差异表达分析 | 第68-69页 |
·Sj IAP 在293T 细胞中对caspase 活性的抑制作用 | 第69-70页 |
·Sj IAP 重组蛋白对血吸虫caspase 活性影响的研究 | 第70页 |
·Sj IAP 的免疫定位研究 | 第70-71页 |
·Sj IAP 在不同宿主来源童虫中的表达差异 | 第71-72页 |
·讨论 | 第72-74页 |
第五章 日本血吸虫甲硫氨酰氨肽酶2基因(MAP 2)和mago nashi基因的研究 | 第74-90页 |
·绪言 | 第74页 |
·材料和方法 | 第74-77页 |
·主要试剂和酶 | 第74页 |
·菌种、实验动物和血清 | 第74-75页 |
·RNA 的提取 | 第75页 |
·cDNA 片段的扩增及生物信息学分析 | 第75页 |
·荧光实时定量RT-PCR 检测 | 第75-76页 |
·重组表达质粒的构建与表达 | 第76页 |
·Sj MAP2 和Sj mago nashi 基因在不同宿主来源童虫的基因和蛋白表达情况 | 第76页 |
·吡喹酮作用对SjMAP2 基因表达影响 | 第76-77页 |
·小鼠免疫保护性试验 | 第77页 |
·结果 | 第77-87页 |
·Sj MAP 2 和Sj mago nashi 基因的克隆及生物信息学分析 | 第77-80页 |
·重组表达质粒的构建与原核表达、重组蛋白纯化 | 第80-82页 |
·Sj MAP2 和Sj mago nashi 基因的期别差异表达分析 | 第82-83页 |
·Sj MAP2 和Sj mago nashi 在不同宿主来源童虫中的表达差异 | 第83-85页 |
·吡喹酮作用对血吸虫Sj MAP2 基因表达影响 | 第85-86页 |
·动物免疫试验结果 | 第86页 |
·血清特异性抗体水平 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-90页 |
第六章 日本血吸虫Cyclophilin 家族基因的研究 | 第90-107页 |
·绪言 | 第90页 |
·材料和方法 | 第90-93页 |
·主要试剂和酶 | 第90页 |
·菌种、实验动物和血清 | 第90-91页 |
·RNA 的提取 | 第91页 |
·含ORF cDNA 片段和基因组序列的扩增及生物信息学分析 | 第91页 |
·荧光实时定量RT-PCR 检测 | 第91-92页 |
·重组表达质粒的构建与表达 | 第92页 |
·复性后重组蛋白CyPA 的PPIase 酶活性测定 | 第92页 |
·Cyclosporin A 作用日本血吸虫后Sj CyPA 基因的表达检测 | 第92-93页 |
·小鼠免疫保护性试验 | 第93页 |
·结果 | 第93-105页 |
·SjCyPA、CyPB 和CyPC 基因的克隆及生物信息学分析 | 第93-95页 |
·SjCyPA、CyPB 和CyPC 基因的期别差异表达分析 | 第95-97页 |
·Sj CyPA、CyPB 和CyPC 重组蛋白的表达纯化 | 第97-99页 |
·表达产物抗原性分析 | 第99-100页 |
·重组复性蛋白 CyPA 的 PPIase 酶活性测定 | 第100-101页 |
·Cyclosporin A 作用后 CyPA 基因的表达检测 | 第101-102页 |
·动物免疫试验结果 | 第102-103页 |
·血清抗体水平 | 第103-105页 |
·讨论 | 第105-107页 |
第七章 全文结论 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
作者简历 | 第116-117页 |