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HIV-1跨种传播限制性和易感非人灵长类动物模型初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 前言第14-41页
   ·引言第14-20页
     ·HIV-1 的发现过程第15-17页
     ·HIV-1 的致病性第17-18页
     ·AIDS/HIV-1 的治疗第18页
     ·HIV-1 与艾滋病的预防第18-20页
     ·HIV-1 与 HIV-2 起源第20页
   ·HIV-1 及艾滋病动物感染模型的研究进展第20-23页
     ·非洲自然宿主的 SIV 感染第21页
     ·免疫缺陷鼠模型第21页
     ·SIV 动物感染模型第21-22页
     ·SHIV 动物感染模型第22-23页
   ·HIV-1 易感动物模型研究进展第23-38页
     ·TRIM5α 研究进展概述第24-31页
       ·TRIM5α 的发现过程第24-25页
       ·TRIM5α 与 TRIM 蛋白家族第25-27页
       ·TRIM5α 限制 HIV-1 感染的机理第27-28页
       ·TRIM5α 与 TRIMCyp第28-29页
       ·TRIM5α 基因座的进化第29-31页
     ·APOBEC3G 研究进展概述第31-38页
       ·抗逆转录病毒因子 APOBEC3 的发现第31-32页
       ·非允许细胞系中对 Vif 敏感的抗 HIV-1 因子的发现第32页
       ·APOBEC3G 功能的发现:从 APOBEC1 中得到的启示第32-34页
       ·APOBEC3G 抗逆转录感染活性的多样性第34-35页
       ·APOBEC3G-脱氨基抗病毒酶第35-36页
       ·APOBEC3G 细胞内表达水平的微调控:抗病毒感染的新机制第36-37页
       ·逆转录病毒抗 APOBEC3G 抗病毒活性的多重策略第37-38页
   ·本研究的目的和意义第38-41页
     ·立题依据第38-39页
     ·本研究的目的和意义第39-41页
第二章 材料与方法第41-55页
   ·实验材料第41-44页
     ·实验所用菌种第41页
     ·实验所用细胞第41-43页
     ·主要试剂与工具酶第43-44页
       ·基因克隆所使用的酶制剂第43-44页
       ·本论文中所使用的试剂盒第44页
   ·实验方法第44-55页
     ·凝胶回收 DNA 片段第44-45页
     ·质粒 DNA 的小量制备第45页
     ·质粒 DNA 的定点诱变第45页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备(CaCl2 一步法)第45-46页
     ·血液 RNA 的小量提取第46页
     ·血液 DNA 的小量提取第46-47页
     ·反转录反应组分及用量(用于 cDNA 合成)第47页
     ·HIV-1 p24 半定量检测(酶联免疫法)第47页
     ·HIV-1 p24 标准定量检测检测(酶联免疫法)第47-49页
     ·质粒的中量提取与大量提取第49页
     ·脂质体法质粒 DNA 转染第49-50页
     ·磷酸钙质粒 DNA 转染第50-51页
     ·重组蛋白 westren blotting 检测第51页
     ·反转录酶活性检测第51-52页
     ·萤光素酶报告基因活性检测第52页
     ·猴外周血 PBMC 分离第52页
     ·本实验中所用细胞系培养第52-53页
     ·GHOST 细胞系萤光素酶活性测定第53页
     ·TZM-bl 细胞系萤光素酶活性测定第53-54页
     ·病毒增殖试验第54页
     ·重组 HSIV 病毒克服限制性试验第54-55页
第三章 重组病毒 HSIV 的构建与检测第55-68页
   ·以 HIV-1 NL4-3 为骨架的系列 HSIV 感染性克隆的构建与检测第55-67页
     ·构建携带 SIV ca 基因的重组 HSIV 病毒第55-57页
     ·构建携带 SIV vif(或 vpx 基因)基因的重组 HSIV 病毒第57-62页
     ·重组 HSIV 病毒中插入荧光素酶(luciferase)报告基因第62页
     ·使用 CCR5 作为共受体的重组 HSIV 病毒的构建第62-67页
 小结第67-68页
第四章 中国境内部分旧大陆猴 TRIMCyp 基因型的调查及个体筛选第68-87页
   ·TRIMCyp 基因型检测引物的设计与筛选第68-69页
   ·广东/四川地区恒河猴 TRIMCyp 基因型的 DNA 样本检测第69-71页
   ·云南恒河猴、广东食蟹猴和四川恒河猴 TRIMCyp 基因型的 DNA 检测第71-72页
   ·TRIMCyp 基因型猕猴个体的基因转录状态第72-74页
   ·毛发 DNA TRIMCyp 基因型检测方法的建立第74-75页
   ·中国境内部分猕猴属品系猴 TRIM5α 与 TRIMCyp 基因进化分析第75-86页
 小结第86-87页
第五章 重组 HSIV 病毒功能检测第87-93页
   ·重组 HSIV 克服 TRIMCyp 因子的限制活性检测第88-90页
   ·重组 HSIV 克服 APOBEC3G 因子的限制活性检测第90-92页
 小结第92-93页
第六章 讨论第93-96页
第七章 全文结论第96-97页
   ·成功构建了单独或同时嵌合 SIV CA/VIF/VPX 基因的多种重组 HSIV 病毒第96页
   ·成功检测出 TRIMCyp 基因型猴并用于本论文研究第96页
   ·重组 HSIV 病毒可克服猴 TRIMCyp 和 APOBEC3G 的限制第96-97页
参考文献第97-113页
致谢第113-114页
作者简历第114页

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