| 缩略词表(Abbreviation) | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 材料与方法 | 第14-25页 |
| 1. 材料 | 第14-15页 |
| ·检测样品和毒株 | 第14页 |
| ·工具酶和其他试剂 | 第14页 |
| ·主要溶液配置 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| 2. 猪γ干扰素ELISPOT检测方法的建立 | 第15-17页 |
| ·猪外周血单个核细胞的制备 | 第15页 |
| ·ELISPOT检测中抗体的优化 | 第15-16页 |
| ·ELISPOT检测中上板细胞数的优化 | 第16-17页 |
| ·ELISPOT检测中刺激物浓度的优化 | 第17页 |
| 3. 猪IL-2、IL-4、IL-10的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第17-22页 |
| ·PBMC总RNA的制备及cDNA第一链的合成 | 第17-18页 |
| ·猪IL-2、IL-4、IL-10、β-actin重组质粒的构建 | 第18-22页 |
| ·猪IL-2、IL-4、IL-10标准曲线的建立 | 第22页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的敏感性评价 | 第22页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的重复性评价 | 第22页 |
| 4. 猪细胞因子检测体系的初步应用 | 第22-25页 |
| ·实验动物和样品采集 | 第22-23页 |
| ·ELISPOT检测猪Y干扰素 | 第23-24页 |
| ·TaqMan荧光定量RT-PCR检测猪IL-2、IL-4、IL-10 | 第24页 |
| ·相对定量分析各细胞因子mRNA的表达差异 | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-42页 |
| 1. 猪γ干扰素ELISPOT检测方法的建立 | 第25-26页 |
| ·PBMC分离及细胞活力检测 | 第25页 |
| ·ELISPOT检测上板抗体浓度的优化结果 | 第25页 |
| ·ELISPOT检测上板细胞数的优化结果 | 第25-26页 |
| ·ELISPOT检测中刺激物浓度的优化结果 | 第26页 |
| 2. 猪IL-2、IL-4、IL-10的Taqman荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第26-38页 |
| ·猪IL-2、IL-4、IL-10、β-actin重组质粒的构建与鉴定 | 第26-31页 |
| ·猪IL-2、IL-4、IL-10标准曲线的建立 | 第31-34页 |
| ·猪IL-2、IL-4、IL-10荧光定量RT-PCR方法的敏感性评价 | 第34-36页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的重复性评价 | 第36-38页 |
| 3. 猪细胞因子检测体系的初步应用 | 第38-42页 |
| ·ELISPOT检测猪γ干扰素结果 | 第38-39页 |
| ·相对定量分析各细胞因子mRNA的表达差异结果 | 第39-42页 |
| 讨论 | 第42-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 文献综述 | 第51-58页 |
| 发表论著 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 个人简历 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
