| 内容提要 | 第1-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-48页 |
| ·嗜热微生物 | 第10页 |
| ·嗜热酶 | 第10-14页 |
| ·嗜热酶稳定性 | 第10-13页 |
| ·嗜热酶的应用 | 第13-14页 |
| ·细菌脂肪酶/酯酶 | 第14-26页 |
| ·细菌脂肪酶/酯酶的分类 | 第15-19页 |
| ·细菌嗜热脂肪酶的研究现状 | 第19-20页 |
| ·细菌嗜热酯酶的研究现状 | 第20-21页 |
| ·细菌脂肪酶的结构研究 | 第21-24页 |
| ·细菌脂肪酶的催化机制研究 | 第24-26页 |
| ·磷酸三酯酶 | 第26-29页 |
| ·磷酸三酯酶的结构研究 | 第27页 |
| ·磷酸三酯酶的催化机制研究 | 第27-29页 |
| ·嗜热磷酸三酯酶的研究现状 | 第29页 |
| ·生物信息学在蛋白质结构研究中的应用 | 第29-31页 |
| ·蛋白质结构预测 | 第29-30页 |
| ·分子动力学模拟 | 第30-31页 |
| ·蛋白质晶体学 | 第31-34页 |
| ·蛋白质的结晶 | 第32-33页 |
| ·X 射线衍射数据收集与数据处理 | 第33页 |
| ·相位问题 | 第33-34页 |
| ·立题依据和实验设计 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-48页 |
| 第二章 重组嗜热闪烁杆菌脂肪酶的性质研究 | 第48-77页 |
| ·材料与方法 | 第48-56页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第48页 |
| ·实验用菌株及质粒 | 第48-49页 |
| ·使用的数据库及软件 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-56页 |
| ·序列比对及系统发育学分析 | 第50页 |
| ·嗜热菌Fervidobacterium nodosum Rt17-B1 的培养 | 第50页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第50页 |
| ·基因的克隆与表达 | 第50-52页 |
| ·嗜热脂肪酶 FnL 的分离纯化 | 第52-53页 |
| ·脂肪酶活力测定 | 第53-54页 |
| ·重组嗜热脂肪酶酶学性质表征 | 第54-55页 |
| ·嗜热脂肪酶 FnL 的结构研究方法 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-75页 |
| ·嗜热闪烁杆菌嗜热脂肪酶序列及系统发育学分析 | 第56-61页 |
| ·嗜热闪烁杆菌脂肪酶基因的克隆,表达及性质表征 | 第61-70页 |
| ·嗜热菌 Fervidobacterium nodosum 的培养 | 第61页 |
| ·重组质粒的构建 | 第61-63页 |
| ·嗜热脂肪酶 FnL 的分离纯化 | 第63-65页 |
| ·嗜热脂肪酶 FnL 的酶学性质研究 | 第65-70页 |
| ·嗜热脂肪酶FnL 的结构预测 | 第70-75页 |
| ·嗜热脂肪酶 FnL 的三维结构模建和结构评估 | 第70-72页 |
| ·嗜热脂肪酶 FnL 的底物选择性分析 | 第72-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第三章 重组嗜热闪烁杆菌酯酶的性质表征 | 第77-87页 |
| ·材料与方法 | 第77页 |
| ·结果与讨论 | 第77-86页 |
| ·嗜热闪烁杆菌嗜热酯酶序列分析及同源比较研究 | 第77-78页 |
| ·嗜热闪烁杆菌酯酶基因的克隆，表达及性质表征 | 第78-83页 |
| ·重组质粒的构建 | 第78-79页 |
| ·嗜热酯酶 FNE 的分离纯化 | 第79-80页 |
| ·嗜热酯酶 FNE 的酶学性质研究 | 第80-83页 |
| ·嗜热酯酶 FNE 的三维结构模建和结构评估 | 第83-86页 |
| 参考文献 | 第86-87页 |
| 第四章 嗜热磷酸三酯酶晶体结构解析 | 第87-108页 |
| ·材料与方法 | 第87-91页 |
| ·嗜热磷酸三酯酶 GK1506 的克隆、表达、纯化与晶体制备 | 第87-89页 |
| ·嗜热磷酸三酯酶突变体的克隆 | 第87页 |
| ·野生型及突变体的表达及纯化 | 第87-89页 |
| ·嗜热磷酸三酯酶 GK1506 的晶体生长条件的初筛及优化 | 第89页 |
| ·数据收集与晶体结构解析 | 第89-90页 |
| ·GK1506 的X 射线衍射数据收集与处理 | 第89页 |
| ·分子置换法解析GK1506 的晶体结构 | 第89-90页 |
| ·结构模型的建立和相位的求解 | 第90页 |
| ·GK1506 结构模型的精修 | 第90页 |
| ·晶体结构分析与讨论 | 第90-91页 |
| ·GK1506 与同源结构间的比较 | 第90-91页 |
| ·结果与讨论 | 第91-107页 |
| ·嗜热磷酸三酯酶及突变体的克隆表达,纯化及活力检测 | 第91-92页 |
| ·嗜热磷酸三酯酶的结晶 | 第92页 |
| ·结晶条件的优化 | 第92-93页 |
| ·数据收集与晶体结构解析 | 第93-95页 |
| ·GK1506 的X 射线衍射数据收集与处理 | 第93-94页 |
| ·分子置换法解析GK1506 的晶体结构 | 第94页 |
| ·最终结构模型的质量评估 | 第94-95页 |
| ·晶体结构分析与讨论 | 第95-107页 |
| ·嗜热磷酸三酯酶GK1506 的整体结构 | 第95-97页 |
| ·GK1506 与同源结构间的比较 | 第97-100页 |
| ·GK1506 的双金属催化中心 | 第100-103页 |
| ·GK1506 的底物选择性机制 | 第103-105页 |
| ·GK1506 的催化机理 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-108页 |
| 创新点 | 第108-109页 |
| 攻读博士期间研究成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 中文摘要 | 第111-113页 |
| Abstract | 第113-114页 |
