| 内容提要 | 第1-6页 |
| 英文缩写词表 | 第6-12页 |
| 第一篇 蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2 的组织表达与活力分析 | 第12-52页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| 第一节 蛋白质可逆磷酸化概述 | 第13-15页 |
| 1. 蛋白质可逆磷酸化基本概念 | 第13-14页 |
| 2. 蛋白质可逆磷酸化在信号传导中的意义 | 第14-15页 |
| 第二节 蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2 概述 | 第15-21页 |
| 1.P TP-MEG2 研究现状 | 第15-17页 |
| 2.P TP-MEG2 的cDNA 序列图谱 | 第17-21页 |
| 第三节 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2 的克隆表达 | 第23-27页 |
| 第一节 实验材料 | 第23-24页 |
| 1. 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2. 试剂 | 第23-24页 |
| 3. 仪器 | 第24页 |
| 第二节 试验方法 | 第24-26页 |
| 1. 基本分子生物学实验方法 | 第24页 |
| 2. 引物设计 | 第24页 |
| 3. 表达载体的构建和诱导表达 | 第24-26页 |
| 第三节 实验结果 | 第26-27页 |
| 第三章 蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2 的分离纯化及活性分析 | 第27-32页 |
| 第一节 实验材料 | 第27-28页 |
| 1. 试剂与柱料 | 第27页 |
| 2. 仪器 | 第27-28页 |
| 3. 实验缓冲液和培养基 | 第28页 |
| 第二节 实验方法 | 第28-30页 |
| 1.P TP-MEG2 的分离纯化 | 第28-29页 |
| 2.P TP-MEG2 的活性分析 | 第29-30页 |
| 第三节 实验结果 | 第30-32页 |
| 1.P TP-MEG2 分离纯化结果 | 第30-31页 |
| 2.P TP-MEG2 活力分析结果 | 第31-32页 |
| 第四章 蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2 单克隆抗体制备 | 第32-48页 |
| 第一节 实验材料 | 第32-33页 |
| 1. 动物 | 第32页 |
| 2. 细胞系 | 第32页 |
| 3. 试剂 | 第32-33页 |
| 4. 实验缓冲液 | 第33页 |
| 5. 仪器 | 第33页 |
| 第二节 实验方法 | 第33-43页 |
| 2. 动物免疫 | 第34页 |
| 3. 骨髓瘤细胞、脾淋巴细胞和饲养细胞的制备 | 第34-36页 |
| 4. 细胞融合与选择性培养 | 第36-38页 |
| 5. 杂交瘤细胞筛选 | 第38-40页 |
| 6. 杂交瘤细胞的克隆化 | 第40页 |
| 7. 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第40-41页 |
| 8. 单克隆抗体的生产 | 第41-43页 |
| 第三节 实验结果 | 第43-48页 |
| 1. 小鼠免疫后抗血清效价检测结果 | 第43页 |
| 2. 杂交瘤细胞筛选结果 | 第43-45页 |
| 3. 杂交瘤细胞克隆化结果 | 第45-46页 |
| 4. 单抗纯度鉴定结果 | 第46页 |
| 5. 纯化后PTP-MEG2 单克隆抗体的效价及灵敏度 | 第46-48页 |
| 第五章 蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2 的组织表达 | 第48-51页 |
| 第一节 实验材料 | 第48-49页 |
| 1. 动物 | 第48页 |
| 2. 试剂 | 第48页 |
| 3. 实验缓冲液 | 第48页 |
| 4. 仪器 | 第48-49页 |
| 第二节 试验方法 | 第49页 |
| 1. 小鼠组织的提取与分离 | 第49页 |
| 2. 小鼠组织中PTP-MEG2 的表达水平检测 | 第49页 |
| 3. ECL 法实验原理 | 第49页 |
| 第三节 实验结果 | 第49-51页 |
| 本篇小结 | 第51-52页 |
| 第二篇 蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2 的抑制剂筛选 | 第52-81页 |
| 第一章 前言 | 第52-57页 |
| 第一节 与糖尿病相关的蛋白质酪氨酸磷酸酶 | 第52-55页 |
| 1. 蛋白质酪氨酸磷酸酶IB | 第52-53页 |
| 2. 蛋白质酪氨酸磷酸酶SHP1 | 第53-54页 |
| 3. 蛋白质酪氨酸磷酸酶SHP2 | 第54-55页 |
| 4. 蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2 | 第55页 |
| 第二节 本研究的目的与意义 | 第55-57页 |
| 第二章 ΔPTPS 的表达及分离纯化 | 第57-67页 |
| 第一节 实验材料 | 第57-58页 |
| 1. 试剂 | 第57页 |
| 2. 实验培养基和缓冲液 | 第57-58页 |
| 3. 仪器设备 | 第58页 |
| 第二节 实验方法 | 第58-60页 |
| 1. ΔPTPs 的表达及分离纯化 | 第58-59页 |
| 2. 蛋白浓度测定 | 第59页 |
| 3. 蛋白纯度鉴定 | 第59页 |
| 4. 酶活力分析 | 第59-60页 |
| 第三节 实验结果 | 第60-66页 |
| 1. ΔPTPIB 分离纯化结果 | 第60-61页 |
| 2. ΔTCPTP 分离纯化结果 | 第61页 |
| 3. ΔSHP1 分离纯化结果 | 第61-62页 |
| 4. ΔSHP2 分离纯化结果 | 第62-63页 |
| 5. GST-HePTP 分离纯化结果 | 第63-64页 |
| 6. ΔYOPH 分离纯化结果 | 第64-65页 |
| 7. ΔMEG2 分离纯化结果 | 第65-66页 |
| 本章小结 | 第66-67页 |
| 第三章 ΔPTPS 抑制剂的体外筛选 | 第67-76页 |
| 第一节 实验材料 | 第67页 |
| 1. 天然产物 | 第67页 |
| 2. 试剂 | 第67页 |
| 3. 仪器 | 第67页 |
| 4. 缓冲液 | 第67页 |
| 第二节 实验方法 | 第67-69页 |
| 1. 天然组分的提取与配制 | 第67-68页 |
| 2. Time-course 曲线的测定 | 第68页 |
| 3. 抑制效果的测定 | 第68页 |
| 4. 半数抑制浓度（IC_(50)）的测定 | 第68-69页 |
| 第三节 实验结果 | 第69-75页 |
| 1. Time-course 曲线 | 第69-71页 |
| 2. 各种天然产物对ΔPTPs 的抑制率 | 第71-73页 |
| 3. IC_(50) 的测定 | 第73页 |
| 4. 抑制剂专一性的考察 | 第73-75页 |
| 本章小结 | 第75-76页 |
| 第四章 PTPS 抑制剂对细胞信号传导的影响 | 第76-81页 |
| 第一节 实验材料 | 第76-77页 |
| 1. 试剂及材料 | 第76页 |
| 2. 缓冲液 | 第76-77页 |
| 3. 仪器 | 第77页 |
| 第二节 实验方法 | 第77-78页 |
| 1. 细胞培养与样品制备 | 第77-78页 |
| 2. Western Blotting | 第78页 |
| 第三节 实验结果 | 第78-80页 |
| 1. β-actin Western Blotting 结果 | 第78-79页 |
| 2. p-Erk Western Blotting 结果 | 第79-80页 |
| 本章小结 | 第80-81页 |
| 总结 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 攻博期间发表的学术论文 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 中文摘要 | 第89-92页 |
| ABSTRACT | 第92-94页 |
