摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1 前言 | 第15-20页 |
1.1 锰与畜牧生产 | 第15页 |
1.2 锰污染 | 第15页 |
1.3 过量锰对神经系统的危害 | 第15-16页 |
1.4 过量锰能导致氧化应激 | 第16页 |
1.5 过量锰能导致炎症反应 | 第16-17页 |
1.6 过量重金属能导致免疫反应 | 第17页 |
1.7 过量锰能导致细胞凋亡 | 第17-18页 |
1.8 过量锰能增加热休克蛋白表达 | 第18-19页 |
1.9 研究目的,意义及创新点 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-31页 |
2.1 主要仪器 | 第20-21页 |
2.2 主要试剂 | 第21-22页 |
2.3 标准日粮组成、试验动物模型和动物管理方案 | 第22-24页 |
2.3.1 标准日粮组成 | 第22-23页 |
2.3.2 试验动物模型 | 第23页 |
2.3.3 动物管理方案 | 第23-24页 |
2.4 鸡脑组织样品的采集与处理 | 第24页 |
2.5 鸡临床症状与剖检观察 | 第24页 |
2.6 鸡脑组织和血液锰含量检测 | 第24-25页 |
2.7 鸡脑组织显微结构的观察 | 第25页 |
2.8 鸡脑组织超微结构的观察 | 第25页 |
2.9 体外试验模型 | 第25-26页 |
2.10 鸡胚神经细胞活力检测 | 第26页 |
2.11 鸡胚神经细胞凋亡检测 | 第26页 |
2.12 鸡脑组织和鸡胚神经细胞试剂盒检测 | 第26页 |
2.13 鸡脑组织和鸡胚神经细胞基因mRNA表达检测 | 第26-29页 |
2.13.1 引物设计与合成 | 第26-29页 |
2.13.2 总RNA提取和cDNA合成 | 第29页 |
2.13.3 实时定量PCR | 第29页 |
2.14 鸡脑组织和鸡胚神经细胞基因蛋白表达检测 | 第29-30页 |
2.15 试验数据的分析与统计 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-96页 |
3.1 鸡临床症状与剖检观察 | 第31页 |
3.2 鸡脑组织和血液锰含量 | 第31页 |
3.3 鸡脑组织形态学观察 | 第31-39页 |
3.3.1 鸡脑组织显微结构观察 | 第31-35页 |
3.3.2 鸡脑组织超微结构观察 | 第35-39页 |
3.4 鸡胚神经细胞细胞活力 | 第39-40页 |
3.5 鸡胚神经细胞凋亡观察 | 第40-41页 |
3.6 鸡脑组织和鸡胚神经细胞试剂盒 | 第41-47页 |
3.6.1 鸡脑组织和鸡胚神经细胞SOD活性 | 第41-43页 |
3.6.2 鸡脑组织和鸡胚神经细胞T-AOC活性 | 第43-44页 |
3.6.3 鸡脑组织和鸡胚神经细胞NO含量 | 第44-45页 |
3.6.4 鸡脑组织和鸡胚神经细胞iNOS活性 | 第45-47页 |
3.7 鸡脑组织和鸡胚神经细胞炎症因子、细胞因子、凋亡基因和热休克蛋白mRNA表达 | 第47-88页 |
3.7.1 基因qPCR检测方法的鉴定 | 第47-49页 |
3.7.2 鸡脑组织和鸡胚神经细胞炎症因子(NF-κB、TNF-α、iNOS、COX-2和PTGEs)mRNA表达 | 第49-57页 |
3.7.3 鸡脑组织和鸡胚神经细胞细胞因子(IL-4、IL-7、IL-10、IL-17、IFN-γ和TGF-β4)mRNA表达 | 第57-67页 |
3.7.4 鸡脑组织和鸡胚神经细胞凋亡基因(p53、Bcl-2、Bcl-x、Bax、Bak、fas和caspase-3)mRNA表达 | 第67-79页 |
3.7.5 鸡脑组织和鸡胚神经细胞热休克蛋白(HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90)mRNA表达 | 第79-88页 |
3.8 鸡脑组织和鸡胚神经细胞炎症因子、凋亡基因和热休克蛋白蛋白表达 | 第88-96页 |
3.8.1 鸡脑组织和鸡胚神经细胞炎症因子(NF-κB、iNOS和PTGEs)蛋白表达 | 第88-91页 |
3.8.2 鸡脑组织和鸡胚神经细胞凋亡基因(p53、Bcl-2、Bax和caspase-3)蛋白表达.. | 第91-94页 |
3.8.3 鸡脑组织和鸡胚神经细胞热休克蛋白(HSP60、HSP70和HSP90)蛋白表达 | 第94-96页 |
4 讨论 | 第96-104页 |
4.1 过量锰导致鸡脑组织和鸡胚神经细胞氧化应激 | 第96页 |
4.2 过量锰导致鸡脑组织和鸡胚神经细胞炎性损伤 | 第96-98页 |
4.3 过量锰引起鸡脑组织和鸡胚神经细胞免疫反应 | 第98-99页 |
4.4 过量锰导致鸡脑组织和鸡胚神经细胞凋亡 | 第99-101页 |
4.5 过量锰增加鸡脑组织和鸡胚神经细胞热休克蛋白表达 | 第101-103页 |
4.6 过量锰对鸡大脑、小脑、丘脑和脑干毒性的差异 | 第103-104页 |
5 结论 | 第104-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-119页 |
附录 | 第119-133页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第133页 |